儿童保健心得范文

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篇1

随着社会经济的发展，儿童出现心理疾病的人数越来越多，这引起临床医学界及社会上的广泛关注。儿童是一个人成长的关键阶段，健康的身心将有助于儿童健康成长。对此，需要对心理疾病的儿童采取心理卫生保健措施，这样才能够取得较好的临床治疗效果。为此，本文选取从2009年11月至2012年12月间在区建立档案的3-10岁的100例有心理疾病的儿童的临床资料进行分析。现报告如下：

1资料与方法

1.1临床资料选取从2009年11月至2012年12月间在我区建立档案的3-10岁的100例有心理疾病的儿童，这些患儿全部采取美国AchenbachJL童行为自评量表，得出儿童的其中有一个项目的测量分值超过正常分值。[1]按照1：1的比例，将其划分为观察组（A组）与对照组（B组），患儿年龄集中处在3-10岁，平均年龄为（5.2±0.8）岁；男55例，女45例，男女比例为11：9。这两组患儿在身高、体重、性别、年龄、病程等临床资料比较方面上，没有显著的差异，有可比性。

1.2方法对照组（B组）采取常规治疗，观察组（A组）采取“一对一”的心理辅导及集体的卫生保健宣传教育，具体措施：①认知疏导。由于患儿心理孤寂，大多生活在自己的世界里，家长也不清楚心理治疗的方法，为此，医生应当针对患儿及家长的具体情形，让他们认清自己的心理问题，采取正确的措施，让他们逐渐纠正不良的心理认知，为以后的治疗奠定基础。②亲情感动法。心理医生只能够为患儿采取心理治疗方案，具体措施还是需要家长实施，为此，医生应当指导家长采取亲情感动法，以家长的实际行动去感化患儿，让儿童对外界事物充满好奇，逐渐摆脱自闭、不愿交流的现状。[2]③情感转移方法。当儿童一直关注某一项事务而情绪低落时，医生可以转移患儿的情感，如播放儿童喜欢看的动画片、影视作品，也可以做儿童喜欢的游戏，让他们积极参与这些活动，自然就能够摆脱低落的情绪。并对以上儿童进行为期3个月的追踪调查，在3个月之后再次实施心理评估，儿童治疗前后进行自评量表（SAS）评分，并详细记录这些分数，其中大于50分存在心理问题。[3]

1.3统计学方法本文采用的数据均应用SPSS17.0软件来详细分析统计的，同时为加强可信度，这两组数据的资料在比较中都是运用了了χ2检验，文中的实验中数据均为使用的平均值。P

2结果

这两组患儿在采取3个月的治疗之后，心理状况均有一定程度的改善。在SAS评分比较中，对照组在治疗前的评分为（62.4±6.1）分，治疗后为（48.3±9.6）；观察组在治疗前的评分为（62.1±6.3），治疗后为（30.3±6.8）。在SAS评分下降幅度比较上，观察组明显高于对照组，差异显著，有统计学意义（P

3讨论

心理对于儿童健康成长起着关键性作用，由于儿童来自家庭、社会、学校等方面的因素影响，造成他们的心理状况远低于前一辈的，造成他们心理出现严重的障碍或扭曲，这就不利于他们在社会上茁壮成长。为此，家长要做好早发现，当发现儿童心理出现问题之后，应当立即送到医院就诊。

由于不同的儿童的心理问题不一，对此，心理医生在对儿童采取集体的卫生保健宣传教育措施，让他们认清自己的心理问题，积极接受医院的治疗；同时针对不同儿童的心理状况，如动症、精神迟滞、交往不良、抑郁症、孤独症等心理状况，采取“一对一”的心理辅导、引导，具体解决他们心理上的个案问题，帮助他们重塑价值观。本文结果显示，对儿童采取心理卫生保健之后，SAS评分下降幅度比较上，观察组明显高于对照组，差异显著，有统计学意义（P

综上所述，对儿童采取积极的心理卫生保健治疗，可以极大地改善儿童心理抑郁的状态，提高患儿的生活水平，增进医患之间的情谊，非常值得各医院广泛应用。

参考文献

[1]杨静.浅谈儿童心理卫生在儿童保健中的重要性[J].中外医疗，2008，15（04）：243-244.

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【中图分类号】R179 【文献标识码】B 【文章编号】2095-6851（2014）2-0433-01

引言

儿童期的健康可以影响人一生的健康，并且儿童保健服务也是衡量一个国家全面发展的重要指标同样也是一个社区卫生服务的关键部分。随着人们生活水平的提高人们对儿童的预防与保健服务逐渐提高，根据市场的要求我国很多地区成立了城区防保中心，并且这些社区防保中心正在更新服务理念推行多种服务模式，为儿童保健模式的发展与创新做出了重要贡献。

1 儿童社区保健服务模式分析

长期以来我国社区内对儿童开展保健工作一直是通过三级妇幼保健网运转来开展的，其中乡村医生是儿童保健工作的主要操作人，乡村儿童医生是村镇保健的主要承担者，这种服务模式为保健事业的发展和普及奠定了基石的基础。随着人们对保健需求的不断增建，人们逐渐对保健的质量提出更高的要求不再满足于保健的数量而是对保健的知识和服务质量的需求不断增加。在当前进一步提高儿童保健系统质量的要求的保健服务的开展为保健模式的进一步开展为服务模式的拓宽和工作质量的提高提供了可能，其中对被服务者也是一种服务于主动服务的关系的转换。

但是我国的乡村儿童保健模式的形式仍然需要进一步的完善，乡镇级卫生院推出的服务保健模式在各项保健工作中实施的服务模式有别于村级的服务模式，乡镇儿童卫生服务院的具体工作主要由乡儿保健医生负责卫生院组织其他防保人员配合，村级儿童保健工作的重点主要是由乡村医生对儿童在每个月需要体检的儿童发放相应的通知，并督促儿童定期到卫生院进行检查。村级保健服务的开展为扩大保健覆盖面建立群众保健意识提供了可能。乡村级保健模式的服务的提高也是儿童保健事业向更高层次发展的重要方向。

2 儿童保健服务的模式理论思路和运行机制

2.1儿童保健服务模式的理论思路分析

当前我国儿童保健所遵循的原则是儿童保健和全科诊疗相结合试点验证与全面推广相结合。为了全面落实社区儿童健康管理的任务为技术服务提供相应的保证和合理配置工作人员、探索儿童健康规范、连续、系统管理的服务模式是为社区儿童提供更加方便、高效、优质服务的基础。

2.2儿童保健服务模式的运行机制

组建儿童保健管理团队并给这个团队安排儿科医师、妇幼医师、护士工作人员。这个团队中的主治医生具有一定的儿科背景不仅可以实施儿科的保健工作计划，还可以对相应的工作进行组织、实施、评价和总结，同样团队中的其他工作人员要具备能够对儿童进行监看体检、技术指导和监看日常门诊出诊的技能。其中妇幼保健医生还要能够复杂初步评估、疫苗接种、新生婴儿产后观察等方面的上报工作，护士要负责儿童的健康问卷调查、协助儿童健康体检、资料录入和全科护理工作。这种模式开展的基础是预防接种因此每周都需要规定一定的日期为儿童开展预防接种及儿童保健服务。预防接种团队工作人员要根据各自的分工做好本职工作例如妇幼医生要做好产后的观察并且每周安排半天的时间与儿童保健团队成员到社会进行预防接种与健康体检工作的查漏工作，团队中的成员不仅要有明确的分工还有协同合作，这样可以提现医师和护士工作的特点。

3 创建新型儿童保健服务模式的举措分析

3.1优化儿童保健工作的流程

试点前社会卫生中心儿童保健工作主要由计划免疫登记处和预防接种室两部分组成。家长首先要带儿童到计划免疫登记处进行登记并接受健康状况评估，然后再到接种疫苗工作处进行健康体检。在这流程中健康体检需要最后进行，所以初步健康评估中如果不能及时发现极少部分儿童健康的特色状况，疫苗接种时就会出现安全隐患。试点后儿童保健工作流程进行了部分改善场所主要分为三个部分：计划免疫登记处、儿童保健室、预防接种室。具体的操作流程为妇幼医生在计划免疫登记处对儿童的健康状况进行初步的评估，并开出相应的免疫计划和儿童体检处方，必要的情况下可以预约下次接种的时间。家长凭体检收费单到儿童保健室，然后儿科医生根据体检状况检查对儿童的发育状况进行相应的评估，健康检查后如果没有其他的疫苗接种禁忌家长就可以带儿童到接种室进行接种，如果医生有必要采取一定的干预措施则需要报上级医院进行审批。整个流程中可以很好地避免疫苗接种中出现的安全隐患，从而可以最大限度地保障保健服务的安全。

3.2增加儿童保健服务的时间

在儿童保健模式中预防接种的当天从以前的每周2 d增加到每周4 d， 健康检查和指导也由试点前平均每人3m in增加到试点后的8～ 12m in。服务时间的增加， 极大地延长了社区儿童的单位保健时间， 儿童保健医师有充裕时间为社区儿童提供个性化服务， 使儿童保健工作能够做得更细、更好。

3.3推出儿童保健服务的系统管理模式

根据技术服务规范的要求，儿童保健服务试点前的管理模式是4：2：1方式改革后的试点变为了9：3：2的管理方式。其中对1岁以内的儿童健康体检检查9次、1-2岁的儿童健康体检3次、2-3岁的儿童体检2次。健康体检次数的大幅度增加，一部分家长可以接受新型的儿童健康管理方式，这点充分说明了儿童保健意识不断增强儿童保健服务意识逐渐受到了家长的重视。

3.4扩大儿童保健服务的范围和项目

根据儿童的不同层次的保健需求，应该对常规服务项目进行增加并对一些具有选择性的项目进行更改和删减。改革后的常规项目检查主要包括计划免疫、生长发育检测、母乳喂养和营养指导、抚触教育、神经心理发育评估、贫血筛查、意外伤害预防指导等。选择性项目主要包括听力筛选、微量元素检测和康复训练等项目。试点前儿童保健服务的常规项目开展的比较少，主要包括预防接种及简单的健康检查，家长普遍感觉简单的健康体检意义不是很大所以很少有家长愿意参加体检。试点后儿童的保健服务工作内容涉及的内容非常广泛，不仅有针对特殊人群的服务项目例如听力筛选而且服务质量明显提高。这些都使家长感觉到儿童保健医生的保健能力大大提高，所以很多家长主动接受健康体检。

3.5强化体弱婴儿的专案管理

儿童保健工作质量的体现主要是通过对体弱婴儿的管理来体现的，并且也是试点验证中心儿童保健管理工作的重要工作内容。所以，社会儿童保健服务模式的改建要对体弱儿构建新型的专门档案并及时通知家长带儿童到社会康复中心进行健康检查，从而可以提出有针对性的健康指导意见。同时加强双向转诊工作，这样可以使体弱儿童得到连续的更好的健康照顾。

3.6完善内部监督管理机制

新型儿童保健服务模式中的主要工作人员除了要由团队的队长的负责督导外儿童保健团队还需要统计每天的工作量，并于第二天早晨交接班时汇报工作情况并做好周报和月报。并通过内部监督的方式做好儿童保健工作的多重监督工作，从而为儿童保健工作的顺利开展提供有力保证。

3.7改善服务环境

根据疾病预防和控制理念疾病诊治和预防保健的工作场所必须严格分开用以减少健康人群的交叉感染。医院要与社区的有关部门做好协调沟通，争取能够为社区开设专门的保健用房专门为儿童的保健服务工作使用。同时科室在设置上要注意人性化的特点，在预防接种室和儿童保健室之间留有一定的等候区，有条件的社区还可以增添儿童娱乐设施营造温馨的服务环境。

4 结语

儿童保健服务模式是保证儿童健康的重要医疗条件，因此各级行政部门应该结合当地的实际和状况做好调研工作，把新型服务模式的改善工作落实到实处，从而提高儿童的保健水平。

参考文献

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为进一步加强幼儿园安全工作，切实保障幼儿在园期间的人身安全，2021年6月16日中心学校组织专班对全镇14所民办幼儿园封闭管理、一键报警、视频监控、安保人员、“八件套”配备、消防安全、用电用气设施安全、心理安全、食品卫生安全、交通安全、校舍安全、校园周边、疫情防护等13个方面进行安全检查。现将有关检查情况通报如下：

一、工作成效

1、大部分幼儿园能重视安全工作，在中心学校的指导下，成立了安全工作领导小组，明确细化责任，完善管理制度，较好地保证了幼儿园安全工作的顺利开展。大部分学校围墙或护栏高度达到了2米且实行封闭式管理，学校出入口设置门卫值班室并有人值守，门卫登记认真查验和登记人员、车辆等身份证件信息。

2、大部分配备专，兼，职门卫，学校门卫值班室都安装了一键报警装置，一键报警装置能与属地接警中心联网，视频监控做到了全覆盖、无死角。大部分幼儿园专职保安数量达标，保安持证上岗；门卫值班室配备了“八件套“：防暴头盔(1顶/人)、防护盾牌（1副/人）、防刺背心(1套/人)、防割手套(1副/人)、橡胶警棍(1支/人)、强光电筒(1支/人)、自卫喷雾剂(1支/人)、安全钢叉(2套)，保安人员较熟悉防卫器械的使用方法。

3、所查幼儿园教学楼、学生宿舍、食堂等学生集中学习和生活场所按规定配置了灭火器、消防栓等消防设施、器材，消防设施、器材是否完好有效，定期开展检查；大部分幼儿园安全出口、疏散通道、消防通道保持畅通；显著位置是否设置了消防疏散提示标志和应急照明装置。

4、食堂环境卫生良好，物品摆放整齐，从业人员均有健康证，幼儿园食堂均取得了卫生许可证，大部分食堂能做到按规定有饭菜留样和记录。

5、所查幼儿园用于接送学生的车辆能够按时年检，购买了车辆保险，有接送学生跟车记录。

二、存在问题

1、安保制度落实不到位。安保人员既不是专职也不够专业，安保力量不足，安保器械配备不够保安人员未着制式服装，没有佩带警棍,部分幼园没有执行来访人员登记制度。

2、部分园没有建立安全隐患台帐制度，没有安全工作会议记录和“安全教育周”活动材料，安全管理工作机制未能得到有效落实。

3、基础设施还存在安全隐患。有的灭火器过期,

小太阳、育才、智多星、贵族、爱心灭火器数量不足，有的用电管理不规范，废旧线路不及时清理。大部分幼儿园没有对消防设施进行定期排查，爱心幼儿园户外活动场所与居民小区共用。童心厕所墙体有裂缝，蓝精灵储物间是钢构房结构，##部分厨房操作间存在钢构结构，##200米内有加油站，小博士幼儿园存在托管学生现象。春晖、童心厨房存有大煤气坛，智多星厨房使用柴火做饭，育才使用液化乙醇放在楼顶无遮盖。出##、##、春晖外，其他幼儿园均无消防栓，

4、饮食卫生安全管理欠规范。部分幼儿园没有建立食品购买台帐，饭菜没有留样，有的有留样但没有加盖，没有标明日期。爱心没有食品留样，##留样柜放有其他食品，智慧星、智多星留样没有标明日期，智多星使用转基因食用油。

5、校车安全管理不到位。大部分校车存在超载和不按规定规定路线行驶现象，##、##、小燕子等幼儿园学生上下学跟车记录不规范。

6、疫情防控均没有设置健康检测码。

三、整改意见

1、要进一步强化对幼园安全工作的领导。各幼儿园要牢固确立安全第一、责任重于泰山的观念，要以如履薄冰的紧迫意识和强烈的责任感，切实抓好本单位安全稳定工作。各园长要切实负起“第一责任人”的责任，老师要象呵护自己的孩子一样保护好每一名学生的在园安全，切实抓好教育和管理,各单位要对存在的问题对号入座，举一反三，认真整改,6月25日前完成整改工作，并把整改情况用书面材料汇报中心学校,不能立即解决的问题，要拿出有效措施限时解决。

2、要进一步加大隐患排查力度，坚持经常查与定期查、重点查与普遍查相结合，切实把隐患消灭在萌芽状态，确保安全工作落到实处。

3、要进一步加大民办幼儿园基础设施的改造力度。安全可靠的基础设施是办学的基本条件，是确保学校生命财产安全的最关键因素。各单位一定要进一步树立“花钱买平安”的观念，克服麻痹思想，把有限的经费花在刀刃上，针对本单位存在的问题，切实抓好校舍、水电管线的整治和改造，备齐备足消防器材，疫情防控等各类应急物质。

4、要进一步健全制度抓好落实。制度不完善、落实不到位是安全工作的大敌，也是最大的安全隐患。抓安全工作重点在末端、关键在落实、可贵在经常。

5、严格按照校车“6定”管理模式，对校车进行定人、定车、定座、定检、定路、定时的检查，坚决杜绝校车超车、超速超载现象，认真填写有关跟车表册。

篇4

入睡仪式有助于培养宝宝的自主睡眠

入睡仪式就是一种“仪式”，或者说是一种“程序”。比如，父母每晚在同一个时间里喂宝宝吃的、给宝宝洗澡、讲故事、唱催眠曲、给宝宝一个晚安吻等，久而久之，宝宝就知道应该准备睡觉了。这个过程需要基本相同地进行，不要提前，也不要有什么惊喜，如果一旦出现变化，宝宝就不知道什么情况是该睡觉的时间了。

能给宝宝带来安全感

儿童心理学家Stephan Valentin博士认为，睡觉是一种孤独的状态，入睡仪式能帮助宝宝做好和父母分开的准备。当事情每天都有顺序地，以同一种方式发生的时候，宝宝每天的期待就能得到满足，父母细心的照料也让宝宝感到舒适，所有的这一切，会让宝宝有安全感。

可以从0岁开始

如果父母愿意的话，可以从宝宝O岁（或者一个星期后）开始实施睡眠仪式。这可以帮助宝宝开始认识到：白天结束了，晚上开始了。最晚到宝宝6个月或者8个月大时，就需要每天晚上都重复进行。许多宝宝到1岁半时，就可以自己命令了'他们可以清楚地告诉父母，怎样他们才能入睡：读哪个故事（一直听同一个故事，并且不能跳过某页！），用哪个瓶子和睡前奶。

需要父母花费时间和精力来培养

宝宝的整套入睡仪式需要父母花费一定的时间和耐心，如果一直惦记着外出聚会或者看电视剧，你的不安情绪和焦虑就会传染给宝宝。入睡仪式最重要的就是父母和宝宝之间的亲密联系。

不同照顾者在宝宝睡前所做的一切最好不要轻易地改变

在一个家庭里，照料宝宝的除了爸爸和妈妈，可能有其他的照顾人，那么在宝宝睡觉前所做的仪式必须是一样的吗？其实，宝宝能够分辨出爸爸和妈妈，以及其他抚养者行为的不同。但是，专家建议，所有的人在宝宝睡觉前所做的一切最好不要轻易地改变，否则宝宝会觉得缺少了什么，久久不能入睡。

入睡仪式不是一成不变的，可以调整和替换

如果你的宝宝这几周必须要伴着吹风机的响声才能入睡，可能会令你抓狂。对此，儿童心理学家认为没有什么万能药方，入睡仪式是一个阶段，会产生并随着宝宝成长而逐渐消失，甚至是可以用其他方式来替换的。令人欣慰的是，当某一种方式让你感到有足够大的压力时，几乎都可以做到，结束一个让人抓狂、麻烦的入睡习惯，并尝试一个新的入睡仪式。

睡前一起捉怪兽

宝宝：Nelle，4岁

入睡仪式：Nelle要把房间中的怪兽都赶走，所以爸爸妈妈每天晚上要狩猎恶魔。爸爸用大手电筒照亮儿童房的每一个角落：谁在衣柜下面？是不是藏在装袜子的抽屉里？在床单下面吗？谁在窗帘后面沙沙作响？四处寻找一番，最终以“把怪兽吓跑了”这样的结局来收尾，宝宝就会安心地开始睡觉了。

形成原因：自从Nelle—年前自己睡儿童房开始，吱吱作响的旧地板让他感到非常害怕。于是，就开始每晚帮他抓怪兽。没想到，这竟然成了他的入睡仪式了，每天都要上演一番。

执行难度：一开始会觉得抓怪兽游戏很累人，但希望就在眼前。几个星期下来，Nelle觉得他的入睡仪式越来越有意思，已经不像最开始时那么害怕藏在床底下的小矮人了，他希望能够找到这个怪兽，并把它吓跑。等怪兽吓跑的那一天，我想就可以结束他的这个入睡仪式了。

不玩爸爸的智能手机就不睡觉

宝宝：Live Alexander，2岁

入睡仪式：Live睡觉时，首先要爸爸挨着他躺在床上，然后把i Phone放在爸爸肚子上，之后看动画片系列剧，看一集之后开始睡觉。这几件事必须要一起做，缺一不可。

形成原因：一年半以前，Live开始在自己的床上睡觉，但他不喜欢自己待着。因此，爸爸就躺在旁边陪他。然后，两个人开始一起看了第一集动画片。这种感觉好极了，所以他开始把这一套作为入睡仪式，想改都改不了。

执行难度：中等。还好他只需要看一集，大概20分钟就可以了。现在家中所有的成员，都能够背出这部动画片所有的剧情了。

和白天说晚安

宝宝：Gabriel，1岁

入睡仪式：Gabriel入睡很简单，最重要的是：要和所有的东西说再见。尽管他大部分时间说法语（他的爸爸是法国人，妈妈是英国人），但告别时却要用英语：“晚安，白天。晚安，儿童房。晚安，泰迪熊。晚安，小猫咪。”在关灯睡觉前，他会和所有喜欢的东西挥手告别。

形成原因：很简单，一年前妈妈从一本母婴杂志上学到了这个方法，并一直应用至今。

执行难度：没有。没有比Gabriel的入睡仪式再简单的了。挥手告别后他会安静地躺在床上，自己决定何时闭上眼睛。一般可以马上入睡，有时他会再玩一会儿毛绒玩具。

握着大人的手入睡

宝宝：Theresa，2岁

入睡仪式：每天晚上，她要从众多玩具中挑出5到7只毛绒玩具放到枕头边上，用一条大毛毯，一边盖住她自己，一边盖住这些毛绒玩具，最重要的是她需要一只手。Theresa需要握着妈妈或者爸爸的一只手，并需要另一只手的指尖抚摩着手背，直到她睡着。

形成原因：半岁时Theresa第一次感冒，那天她很难受，妈妈用了这种方式来安抚她，她感觉很放松，并安稳地睡觉。自此之后，她入睡前都要抓着一只手才行。

执行难度：对于Theresa来讲，握住谁的手都行，所以保姆陪她入睡也没有问题。我们也一直试图在寻找一个可替代人手的东西，比如用樱桃核填充的毛绒驴玩具。

篇5

【中图分类号】 R 179 G 479 R 77 【文献标识码】 A 【文章编号】 1000-9817(2009)11-1007-04

近年来,我国学生单纯性近视发病年龄提前,患病率居高不下,已成为受社会各界关注的公共卫生热点问题。在学生近视综合防制策略中,视力保健行为教育越来越受到重视,各种规模的行为干预项目不断出现。由于视力保健行为涵盖的范围较广,采用单一行为变量的分析方法,无法有效评估行为干预的效果,因此,如何将行为变量量化,已成为学生近视干预研究中亟待解决的问题。本研究采用理论构建法和因子分析法编制“儿童视力保健相关行为评定量表”,并进行测量学的一系列检验,目的在于为分析学生视力保健相关行为特点及行为干预评估提供量化的测评工具。

1 问卷编制与调查步骤

1.1 问卷的编制 采用理论构建法和因子分析法编制问卷量表,以小学生视力保健行为为基本出发点,通过查阅有关文献和专家访谈,定义行为内容,用理论构建法编制核心行为框架及题项库;经2轮专家咨询对题项库进行增补和修订;抽取部分题项在学生、家长、班主任教师中测试,确定以家长评分的方法来反映近期学生行为的调查方式;全部题项库经16名小学生父母的试验性测试,修改题项的表达、语义,形成含有65项题项的初始问卷。

为进一步对问卷各个题项进行筛查,探索量表的潜在结构,整群抽取上海市中心城区(卢湾区)某公立小学一～五年级学生家长585名进行“初始问卷”调查,有效回收率为97.2%,应用SPSS 13.0进行项目分析及探索性因子分析,剔除载荷量

1.2 测试问卷的信度和效度检验 选择上海市中心城区(徐汇区)人口密度较大、教育水平中等的公立小学,整群抽取一～五年级学生父母进行测试,测试采用问卷自填方式,统一指导语,内容包括人口学基本信息和31项测试量表题项,实际完成测试840份,有效完成率为96.8%。调查样本情况见表1。

为考核量表的评分者信度(父母同时填写同样问卷的一致性程度)和重测信度(同一家长间隔2周后再次填写同样问卷,2次填写的一致性程度),在各年级中整群随机抽取1个班级进行相应调查,获得评分者平行调查问卷326套,重测调查问卷286套。应用EpiData 3.0建立数据库,SPSS 13.0统计分析。信度检验考测信度、分半信度、同质信度和评分者信度[1-2];效度检验考查内容效度和结构效度。

2 结果

2.1 量表的信度检验 同质信度以Cronbach α系数为指标,全量表的α系数为0.842,9个维度的α系数在0.415～0.811之间。分半信度按奇、偶分半,以Guttman分半系数为指标,全量表的分半系数为0.610,9个维度的分半系数在0.308～0.753之间。重测信度采用Spearman等级相关分析,总量表的重测相关系数为0.644,各维度的重测相关系数在0.408～0.617之间。评分者信度采用Fridman χ2检验,结果全量表及9个维度的检验统计量的P值均>0.05,故认为评分者信度可信。见表2。

2.2 量表的效度检验 在广泛查阅国内外文献和专家访谈的基础上,经调查和试验性测试,通过反复修改和筛选而成,保障了内容的效度。采用因子分析和因子间的相关分析来判断量表的结构特征。

2.2.1 因子分析 对因子分析的适宜性作KMO和Bartlett球形检验。KMO统计量为0.770>0.7;Barlett球形检验值为1 274.3,P

对840例总样本的9个维度进行主成分分析,经方差最大正交旋转后,提取6个公因子(F1为主要解释读写姿势;F2为主要解释持续用眼间歇休息行为;F3～F6分别为反映阅读环境选择行为、户外活动、饮食习惯和眼保健操行为)。方差累积贡献率达到82.72%,各公因子差异均有统计学意义,结果见表3。

2.2.2 各维度得分和总分间的相关分析 以Pearson积差相关方法计算各维度得分以及与总分间的相关程度。结果显示,各维度得分r值均在0.072～0.447之间,呈低度和中度相关,说明各维度之间有一定的独立性;各维度得分与总分r值均在0.409～0.729之间,呈中度和高度相关。各维度得分间以及与总分间的r值经检验,差异均有统计学意义(P值均

3 讨论

在学生近视防制研究方面,随着流行病学调查设计方法和统计方法学的发展和应用,用眼行为在学生近视发生发展中的作用越来越明确,用眼行为的内涵也日渐丰富[3-8]。除长期以来受到广泛关注的读写姿势、读写环境选择、眼保健操外,近年来的研究表明,户外活动、视近间歇眼放松行为、娱乐性视近活动以及饮食睡眠习惯等均与学生近视屈光改变有关[9-10]。但是,在目前日益增多的近视行为危险因素研究和行为干预研究中使用的均是未经测量学检验的自编调查问卷,这些问卷结构不一,稳定性未经检验,缺乏在各项研究间进行同质比较的能力。因此,发展一套满足测量学要求的“儿童视力保健相关行为评定量表”成为十分迫切而又具有广泛应用价值的任务。

本量表编制中最具有挑战性的是定义行为内容。研究通过深入考察目前小学生的作息特点、查阅文献和专家访谈,将学生视力保健行为的范畴定义为6个方面:视近活动(包括学习性和娱乐性)、视近间歇休息、视近环境选择、视近姿势和距离、生活习惯(包括户外活动、饮食和睡眠等)以及眼保健操等,在此核心行为框架基础上,发展正向、反向题项库。通过专家咨询和试验性测试,对题项库进行增删和修订,使编制出的量表在内容上具有了较强的针对性和可操作性。在第2次试验性测试中,经项目分析和探索性因子分析,视近活动和生活习惯中的睡眠行为等共12条题项均为达到设定的鉴别要求,反映出上述2个方面需发展其他的测量方法;视近姿势题项库中分解出3个维度――视近距离、读写坐姿、握笔姿势;视近间歇休息分解出2个维度――眼放松行为和持续用眼;生活习惯中分解出2个维度――户外活动和饮食习惯;加之视近环境选择和眼保健操共9个维度。

一般认为,总量表的信度系数在0.7以上,分量表信度系数在0.6以上,则量表的信度较好[11-12]。本量表全量表的Cronbach α系数为0.842,Guttman分半系数为0.610,总体信度可以接受,而在阅读环境选择、眼保健操维度上的稳定性尚有欠缺。重测信度反映量表的时间稳定性,本量表的重测相关系数为0.644,可以接受;各维度中读写姿势(r=0.408)和持续用眼(r=0.439)时间稳定性不理想,推测这2个维度对学业负担的影响较敏感,用于监测时应考虑在不同学期的同一学习周中进行测量。评分者信度经Fridman χ2检验,P值均>0.05,可认为2位监护人评分的一致性较好。

内容效度考查题项库的充分性,即某题项集合对某内容范畴的反映程度[11]。本量表是在广泛查阅国内外文献和专家访谈基础上,通过Delphi法咨询眼防、疾病预防控制中心、班主任教师和保健教师等资深人员编制,形成题项库;按照问卷量表的编制程序[13],经2次试验性测试反复修改而成,可以认为内容效度充分。结构效度检验欲测量结构与已有的其他结构之间的相关程度。校标效度分析量表测验结果与某个标准测验的关联程度。由于国内外没有评价儿童视力保健行为的金标准和同类量表,不能进行校标效度考查,在这种情况下,结构效度就成为检验量表效度的重要方法[1-2]。因子分析方法是检验结构效度最常用的方法,本研究对量表的9个维度进行因子分析,提取解释总变异82.72%的6个公因子。从各维度对公因子的贡献率来看,第1公因子主要反映用眼距离、读写坐姿、握笔姿势,可定义为视近姿势因子,与实际操作中的“一尺、一拳、一寸”读写习惯相吻合;第2公因子主要代表眼放松行为和持续用眼行为,可定义为视近间歇休息因子;第3公因子代表阅读环境选择,与“二要二不要”行为培养相吻合;第4～6公因子可称为户外活动、饮食习惯、眼保健操因子。6个公因子涵盖了小学生视力保护行为教育的各个方面,即问卷结构反映了理论和实际工作中的视力保健行为成分结构。

“儿童视力保健相关行为评定量表”按照问卷量表的常规编制程序编制而成,经项目分析和因子分析,证明问卷结构合理,信度、效度检验均满足测量学要求,可用于小学生近视防制的相关研究。

4 参考文献

[1] 方积乾,陆盈,主编.现代医学统计学.北京:人民卫生出版社,2002:230-320.

[2] 张文彤,主编.SPSSⅡ统计分析教程.北京:北京希望电子出版社,2002:190-250.

[3] 王爱民,张开金,王盛波.小学生近视眼危险因素的病例对照研究.中国校医,2002,16(1): 63-64.

[4] MARJORIE JR, LYNN M, MARK AB, et al. Prospective quantification of near work using the experience sampling method. Optometry and Vis Sci, 2001,78:496-502.

[5] 陈国民,王洁贞,薛付忠.Bayes公式分析用眼卫生习惯与视力不良的关系.中国学校卫生,2001,22(3):264-265.

[6] 吴家兵,叶临湘.中学生近视发病影响因素Cox回归分析.公共卫生与预防医学,2006,17(2):63.

[7] 凌红,谭晖,汪玲,等.上海市徐汇区小学生近视影响因素的多水平模型分析.中国学校卫生,2009,30(6):542-544.

[8] MARJORIE JR, JEFFREY JW, LYNN M, et al. Comparison of the experience sampling method and questionnaires to assess visual activities in pre-teen and adolescent children. Ophthal Physiol Opt, 2006,26:483-489.

[9] MUTTI DO, MITCBELL GL, MOESCBBERGER ML, et al. Parental myopia, near work, school achievement, and children's refractive error. Invest Ophthalmol Vis Sci, 2002,43:3 633-3 640.

[10]JEREMY AG, RICARDO PW, CHRIS SH, et al. Correlations in refractive errors between siblings in the Singapore Cohort Study of risk factors for myopia. Br J Ophthalmol, 2007,91:781-784.

篇6

[中图分类号] R722.13+1 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701（2014）06-0157-03

新生儿败血症是新生儿期的危重疾病，具有较高的发病率和死亡率，是导致新生儿死亡的重要原因[1]。新生儿败血症治疗的关键是尽早明确诊断，然而由于新生儿败血症的临床表现具有不典型性，病情变化较快，其临床早期诊断相对困难[2，3]。可溶性细胞间黏附分子-1 （soluble Intercellular adhesion molecule-1， sICAM-1）是ICAM-1的同型蛋白分子，在败血症等病理条件下sICAM-1表达增加，增强细胞间黏附和介导炎症反应，通过检测sICAM-1的表达可反应体内的炎症反应强度，为新生儿败血症的诊断提供新的方法[4]。已有不少研究探索了sICAM-1对新生儿败血症的诊断价值，其结论不尽一致，本研究拟通过Meta分析系统评价sICAM-1诊断新生儿败血症的价值。

1 资料与方法

本次系统评价严格参照Cochrane图书馆所推荐的诊断性试验系统评价/Meta分析操作指南进行[5]。

1.1 设定纳入与排除标准

只有同时提供利用sICAM-1诊断新生儿败血症的敏感度和特异度等可以提取四格表数据的文献才能纳入，败血症的诊断有明确的标准，研究对象必须是人。纳入的文献为中英文文献，会议摘要等包含信息不全的文献不能纳入。

1.2文献检索

在Pubmed、Embase、万方数据、中国期刊全文数据库（中国知网）、维普网等数据库进行文献检索。本次文献检索未设置检索起始时间，检索截止时间设定为2013年8月31日。主要英文检索词包含：sICAM-1、neonatal septicemia、neonatal sepsis，主要中文检索词包含：可溶性细胞间黏附分子-1、新生儿脓毒败血症、新生儿败血症等。所有检索策略均由多次预检索后确定最终检索方案。

1.3 数据提取与文献质量评价

两名作者根据设定的纳入与排除标准独立提取纳入文献中的基础信息，主要包括：第一作者姓名、发表时间、患者与对照者数量、sICAM-1检测方法、临界值等，通过详细阅读文献直接获取或根据文献内容计算四格表数据。由两名作者参照诊断性试验准确性质量评价工具（Quality assessment of diagnostic accuracy studies， QUADAS）评价纳入文献质量[6]，如有不同意见，由研究小组成员协商解决。

1.4 统计学分析

本次统计分析采用诊断性系统评价的专用软件Meta-DiSc 1.4进行[7]。首先χ2检验对纳入研究的敏感度、特异度进行异质性检验，以I2值定量评价异质性大小，如果I2值大于等于50%提示纳入研究之间有明显异质性，则选择随机效应模型合并数据，反之则选择固定效应模型。根据选择的模型合并计算合并敏感度、特异度、阳性似然比、阴性似然比和诊断比值比，并绘制汇总受试者工作特征（summary receiver operating characteristic， SROC）曲线，计算曲线下面积。

2 结果

2.1纳入文献临床信息与质量评价

本次系统评价共纳入7篇文献，合计547例新生儿[8-14]。有4项研究在国内开展[10-12，14]，所有研究均使用酶联免疫吸附法（Enzyme-linked immunosorbent assay， ELISA）测定血液中sICAM-1的表达。通过QUADAS质量评价显示本次纳入的研究其质量尚可，6篇文献QUADAS评分≥9分。纳入的7项研究的基本信息如第一作者姓名、发表时间、临床样本量、临界值和QUADAS评分等见表1。

2.2异质性检验

本次系统评价通过评估异质性大小选择合适的数据合并效应模型，对统计分析结果的解读更具客观性。经计算敏感度、特异度、阳性似然比、阴性似然比和诊断比值比的χ2检验值分别为15.05 （P=0.02， I2=60.1%）、16.17（P=0.01，I2=62.9%）、14.52（P=0.02，I2=58.7%）、13.92（P=0.03，I2=56.9%）、15.27（P=0.02，I2=60.7%），提示纳入的7项研究之间有显著的异质性，所以采用随机效应模型。

2.3 Meta分析结果

Meta分析显示，利用sICAM-1诊断新生儿败血症的合并敏感度为0.83 [95%CI（0.78，0.88）] （图1），特异度为0.68[95%CI（0.63，0.73）] （图2），阳性似然比2.56[95%CI（1.88，3.49）]，阴性似然比0.25[95%CI（0.16，0.40）]，诊断比值比为11.87[95%CI（5.58，25.24）]（图3）。图4为sICAM-1诊断新生儿败血症的SROC曲线。本次Meta分析显示SROC曲线下面积为0.84，Q值为0.78。

3 讨论

sICAM-1在感染等刺激下释放增多，参与体内的炎症反应过程，目前已有不少研究探索了其诊断新生儿败血症的诊断价值，但是得出的结论各异，本研究首次从循证医学的角度系统评价了sICAM-1对新生儿败血症的诊断价值，sICAM-1诊断新生儿败血症的合并敏感度为0.83，特异度为 0.68， SROC曲线下面积为0.84，显示sICAM-1诊断新生儿败血症具有较高的敏感度，具有一定的诊断价值。

本次系统评价主要选用了诊断比值比、阳性似然比、阴性似然比等指标来反映sICAM-1诊断新生儿败血症的价值。其中诊断比值比其定义为病例组中sICAM-1检测阳性的比例与对照组中sICAM-1检测阳性的比例之间的比值，诊断比值比的值越大，对应的诊断性实验的诊断价值越大[15]，本次系统评价sICAM-1诊断新生儿败血症的诊断比值比为11.87，提示sICAM-1作为诊断新生儿败血症的工具其诊断价值较高。阳性似然比、阴性似然比是诊断性实验的重要定量评价指标[16]，本次系统评价sICAM-1诊断新生儿败血症的合并阳性似然比为2.56，表明新生儿败血症者sICAM-1检测的阳性率约是非败血新生儿的2.56倍。本次系统评价sICAM-1诊断新生儿败血症的合并阴性似然比为0.25，表示如果sICAM-1检测结果为阴性，该新生儿仍有25%的可能性是败血症，还没有低至排除新生儿败血症诊断。我们还绘制了SROC曲线对纳入的7个诊断性研究进行了总体评价[17]，图4中7个点代表着纳入的7项独立研究。Q值是汇总评价纳入诊断性实验结果的重要指标，从SROC曲线左上角到右下角绘制模拟连线，其与SROC曲线的交点所对应的值即为Q值，本次系统评价的Q值为0.78，提示利用检测sICAM-1来诊断新生儿败血症的最大联合敏感度和特异度为0.78，其用来筛查和确诊新生儿败血症的价值还需要进一步的研究来确认。本次系统评价绘制的SROC曲线下面积为0.84，表明sICAM-1诊断新生儿败血症具有一定的临床诊断价值。

需要特别指出的是，本次系统评价仅纳入7项临床研究合计547例患者，即当前的研究证据非常有限，对本次系统评价所得出的研究结论的解读和临床应用应持客观的态度，临床上还需要进一步的研究客观评价sICAM-1对新生儿败血症的诊断价值。另外限于语言水平，本次系统评价仅纳入了中文与英文文献，具有潜在的语言偏倚；另外考虑到阳性结果的研究更容易发表的情况，亦不能排除潜在的发表偏倚，在解读系统评价结果时应充分考虑这些偏倚的影响。

本次系统评价从循证医学的角度评估了sICAM-1对新生儿败血症的综合诊断价值，系统评价结果显示sICAM-1作为诊断标记物诊断新生儿败血症具有一定的临床诊断价值，其敏感度相对较高，可作为筛查新生儿败血症的重要辅助方法。

[参考文献]

[1] Ganatra HA， Stoll BJ， Zaidi AK. International perspective on early-onset neonatal sepsis[J]. Clin Perinatol， 2010， 37（2）：501-523.

[2] 焦建成， 余加林. 新生儿败血症诊断研究进展[J]. 中华儿科杂志， 2010， 48（1）： 32-35.

[3] 靳瑞霞. 新生儿败血症早期白细胞介素-6和C反应蛋白的变化[J]. 中国现代医生， 2012， 50（23）：159-160.

[4] Mahmoud S， Maklad S， Abo Elmagd EK. Soluble intercellular adhesion molecule-1 （slCAM-1） for early diagnosis of neonatal infections[J]. Egypt J Immunol， 2009， 16（2）：83-94.

[5] Leeflang MM， Deeks JJ， Gatsonis C， et al. Systematic reviews of diagnostic test accuracy[J]. Ann Intern Med， 2008， 149：889-897.

[6] Whiting PF，Weswood ME，Rutjes AW， et al. Evaluation of QUADAS， a tool for the quality assessment of diagnostic accuracy studies[J]. BMC Med Res Methodol， 2006， 6：9.

[7] Zamora J， Abraira V， Muriel A， et al. Meta-DiSc： a software for meta-analysis of test accuracy data[J]. BMC Med Res Methodol， 2006， 6：31.

[8] Berner R， Niemeyer CM， Leititis JU， et al. Plasma levels and gene expression of granulocyte colony-stimulating factor， tumor necrosis factor-alpha， interleukin （IL）-1 beta， IL-6， IL-8， and soluble intercellular adhesion molecule-1 in neonatal early onset sepsis[J]. Pediatr Res， 1998， 44（4）：469-477.

[9] Küster H， Weiss M， Willeitner AE， et al. Interleukin-1 receptor antagonist and interleukin-6 for early diagnosis of neonatal sepsis 2 days before clinical manifestation[J]. Lancet， 1998， 352（9136）：1271-1277.

[10] 马莉， 刘翠青， 刘智慧， 等. 可溶性细胞间黏附分子-1、降钙素原在新生儿败血症诊断中的价值[J]. 中华儿科杂志， 2004， 42（9）：654-658.

[11] 黄丽君， 陈正跃， 冯国富. 降钙素原与可溶性细胞间黏附分子-检测在新生儿败血症中的应用[J]. 实用儿科临床杂志， 2006， 21（15）：1009-1014.

[12] 王会茹， 李贵霞， 马莉. 细胞间黏附分子-1和C反应蛋白诊断新生儿败血症的价值[J]. 天津医药， 2006， 24（2）：127-128.

[13] Figueras-Aloy J， Gómez-López L， Rodríguez-Miguélez JM， et al. Serum soluble ICAM-1， VCAM-1， L-selectin， and P-selectin levels as markers of infection and their relation to clinical severity in neonatal sepsis[J]. Am J Perinatol， 2007， 24（6）：331-338.

[14] 郝玲， 陈宝昌， 王娜. 新生儿败血症早期诊断方法的探讨[J]. 中国综合临床， 2010， 26（7）：765-767.

[15] Glas AS， Lijmer JG， Prins MH， et al. The diagnostic odds ratio： a single indicator of test performance[J]. J Clin Epidemiol， 2003， 56（11）：1129-1135.

篇7

1.1 MAPK通路:丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen-Activated Protein Kinase,MAPK)属于丝/苏氨酸蛋白激酶,存在于大多数生物体细胞胞质内,参与调节细胞的各种生理功能和变化[1]。早在1989年～1991年,学者们就发现了第一组MAP激酶序列,从而发现了一组新的蛋白激酶[2]。MAPK通过有三至五个环节构成的保守三级酶促级联反应(即MAPKKK-MAPKK-MAPK),激活转录因子,促使核内事件的发生。MAPK是通过VIII区域苏氨酸、酪氨酸双位点磷酸化活化和由脯氨酸介导的Ser/Thr蛋白激酶(其同工酶均有最小共同靶序列Ser/Thr-Pro)[3]。目前,MAPK家族有五大类成员,分别为细胞外信号调节激酶(Extracellular-signal regulated protein kinase, ERK)1/2、c-Jun氨基末端激酶(JNK)/应激激活蛋白激酶(Stress-activated protein kinase, SAPK)、p38MAPK、ERK5/BMK1 (bigMAP kinase 1)和ERK3/4 等[4]。本文就与成骨细胞的发生关系密切的ERK信号转导通路来进行阐述。

1.2 ERK转导通路的主要过程:当细胞外基质与前体细胞(如间充质干细胞)接触,细胞外基质即与表面整合素受体结合,受体异源二聚化,自身磷酸化,粘附斑激酶磷酸化,鸟核苷酸交换因子募集,从而使与Ras结合的GDP脱落而结合GTP,激活Ras,然后通过MAPKKK(MEK)-MAPKK-MAPK途径激活转录因子,促进细胞增殖和分化[5]。ERK信号通路是目前研究较为彻底的MAPK通路之一,是多数生长因子、细胞因子调控细胞增殖分化的重要途径,对其机制的深入研究有利于体外诱导间充质干细胞向成骨细胞的分化,从而有助于骨组织工程学的发展。然而近年来,对骨髓间充质干细胞分化的研究较为普遍,尤其是研究其向神经细胞、肝细胞、脂肪细胞以及成骨细胞的分化等,但对于人脐带间充质干细胞的研究报道则相对较少,研究相对滞后。

1.3ERK通路与P38、JNK通路之间的关系:真菌中的MAPK信号通路并无相互作用,其每一条MAPK通路都是相对独立的,一般不会发生交联。但是,在哺乳类细胞中各个MAPK信号通路之间通过复杂的机制既可相互区别,又可相互调节,保持其自身的独立性,同时又相互促进或抑制。ERK、JNK、p38MAPK三条通路,总是可以在不同的作用位点找到相互交汇的地方[6]。Hotokezaka等[7]发现p38抑制剂引起p38磷酸化减少的同时伴随了ERK磷酸化的增加,而MEK抑制剂减少ERK的磷酸化同样也使p38的磷酸化程度增加。Suzuki 等[8] 利用鼠颅骨源的成骨细胞系MC3T 32E1 细胞研究发现, 经过胎牛血清诱导,ERK通路可快速激活, 而p38通路 和JNK通路激活则大大延迟。国内廖清船等[9]实验发现植物雌激素金雀异黄酮可激活p38MAPK通路,但同时抑制ERK通路,而人雌激素则对ERK和p38MAPK通路均有激活作用[10]。关于ERK、p38、JNK三者之间究竟是怎样互相作用与调节,具体作用环节在何处,如何形成交联网络等还有待进一步的阐明。

2 ERK信号转导通路与人脐带间充质干细胞

2.1人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells, hUCMSCs):人脐带间充质干细胞是存在于脐带和血管周围组织中的一种干细胞,具有多向分化和自我更新的潜能[11]。自1966年Friedenstein [12]发现骨髓间充质干细胞以来,由于易于培养、扩增和遗传因素相对稳定的特点而常用于科研中。但骨髓间充质干细胞在具有细胞增殖分化能力的同时,其数目随年龄增长而下降,采集尚不方便,因此临床上也需寻找一种新的间充质干细胞以克服上述不足。人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)就是一类具有自我更新、增殖和多向分化潜能的干细胞,具有来源丰富,易于采集、保存和运输,无异体排斥,避免伦理争议等诸多优点,近年来的研究也表明hUCMSCs有可能替代骨髓间充质干细胞成为重要的种子细胞来源,并有望大量应用于口腔颌面部骨缺损的临床治疗中。

2006年,Hoynowski等[13]发现hUCMSCs除了可以表达骨髓间充质干细胞的细胞因子外,还可表达GM-CSF和GSF,并特异性表达HLA-G和神经胶质来源的神经营养因子。Campard等[14]在2008年利用肝细胞生长因子成功地在体外将hUCMSCs向肝细胞分化。2009年,野向阳等[15]对人脐带间充质干细胞进行成骨诱导,其碱性磷酸酶检测阳性,说明其具有骨髓间充质干细胞的特异性表明标志,且具有同种异体移植的低免疫原性。此后还有学者[16]也将人脐带间充质干细胞进行体外诱导培养,并证实hUCMSCs具有成脂、成骨的分化能力。以上研究均表明hUCMSCs可代替骨髓间充质干细胞作为组织工程,尤其是骨组织工程的种子来源。而ERK信号转导通路是间充质干细胞成骨分化的决定性通路之一,故可通过研究ERK调节成骨分化的具体分子机制而促进hUCMSCs向成骨细胞分化,在骨组织工程应用领域有着重要的意义。

2.2 ERK信号传导通路在间充质干细胞增殖分化中所起的作用:研究发现,ERK途径对细胞的增殖和诱导起重要作用。廖清船等[17]诱导小鼠的MSCs向成骨细胞分化,观察p44/p42 MAPK通路(即ERK通路)在MSCs向成骨细胞分化过程的作用,实验结果表明p44/p42 MAPK可能参与MSCs的增殖调节。Jalswad等[18]发现,在诱导成人MSCs向成骨细胞分化过程中,ERK具有重要作用。Salasznyk等[19]证明了ERK对ECM诱导的MSCs的成骨分化具有十分重要的驱动作用。2006年,Salasznyk等[20]研究发现胞外基质(ECM),特别是层粘连蛋白(Ln-5)通过ERK相关的信号通路对MSCs的成骨分化起着有效的诱导作用。

3ERK信号转导通路与成骨细胞分化

3.1成骨细胞:成骨细胞是骨形成的主要功能细胞,负责骨基质的合成、分泌和矿化。骨不断地进行着重建,骨重建过程包括破骨细胞贴附在旧骨区域,分泌酸性物质溶解矿物质,分泌蛋白酶消化骨基质,形成骨吸收陷窝;其后,成骨细胞移行至被吸收部位,分泌骨基质,骨基质矿化而形成新骨。破骨与成骨过程的平衡是维持正常骨量的关键,成骨细胞数目减少、功能减弱将导致骨形成降低,进一步引起骨质疏松。在膜内成骨和软骨内成骨中,MSCs分化为成骨细胞,同时分泌胞外基质,随着细胞外基质的钙化,成骨细胞被包埋在骨质中成为骨细胞。

3.2 ERK信号转导通路在向成骨细胞分化过程中的作用:在成骨方面,ERK信号通路起着一个传递细胞内外信号导线的作用,对细胞外各种信号刺激如激素/生长因子的刺激、细胞外基质-整合蛋白的结合及机械负荷的刺激等作出反应。活化的ERK可以磷酸化ELK-1,启动即刻早期基因的表达,在成骨细胞分化过程可以激活众多靶蛋白,包括转录因子复合物AP1和成骨细胞特异性转录因子Osf2 /Cb-fal。Lai等[6]应用显性失活法将ERK-DN ( ERK-dominant negative) 转染人成骨细胞,阻滞ERK/MAPK通路的活性,导致成骨细胞的增殖分化能力下降,阐述了在成骨细胞中ERK不仅对成骨细胞的增殖,而且对成骨细胞的粘附、伸展、迁移以及整合素的表达都有重要意义。此后国内有关学者[21]用不同剂量的ERK通道阻滞剂-PD98059可抑制骨髓间充质干细胞向成骨分化,并存在剂量依赖性,说明ERK通路可能在MSC向成骨细胞分化中起到重要作用。Takami等[22]通过研究说明ERK信号通路对成骨细胞RANKL的表达起重要作用,单独抑制ERK信号通路不能完全抑制RANKL的表达,这与其受多种信号通路调节相关。之后还有学者发现较大的应力改变可以早期激活成骨细胞内的ERK通路[23]。Ge等[24]用转基因技术确定了ERK-MAPK途径通过调节cb-falmRNA的表达而刺激成骨细胞的分化及骨骼发育的作用。2009年,国内研究人员[25]通过实验说明了降钙素刺激phos-ERK1/2蛋白的表达,且上调成骨细胞cb-fa1mRNA的表达。因此,可知ERK参与了对Osf2/Cb-fal的转录调节并且在成骨细胞特异基因表达中发挥重要作用。但是,目前ERK通路对间充质干细胞向成骨细胞的分化作用尚有争议,具体分子机制尚不完全清楚。

4前景

人脐带间充质干细胞具有自我更新、增殖和多向分化潜能、来源丰富,易于采集、保存和运输,无异体排斥,避免伦理争议等诸多优点,在体内外均可定向分化为骨细胞、软骨细胞、肝细胞、心肌细胞、骨骼肌细胞以及神经元细胞等,是一种具有多种转化功能的干细胞。hUCMSCs有可能替代骨髓间充质干细胞成为重要的种子细胞来源从而促进骨组织工程的科学研究,并有望大量应用于口腔颌面部骨缺损的临床治疗中,特别是针对面部骨损伤严重的患者和先天骨性畸形的患儿有着重要的临床意义。在这一转化过程中,ERK信号转导通路正是人脐带间充质干细胞hUCMSCs向成骨细胞分化的重要路径之一,对ERK通路的研究不仅可以促进骨组织工程的科学研究,应用于临床实践,同时对ERK通路的研究还可以进一步掌握胚胎细胞发育的特性,从而对儿科尤其是颌面儿科的发展产生积极的意义。

虽然人脐带间充质干细胞目前最有可能替代骨髓间充质干细胞成为较为理想的种子细胞,但针对这一类细胞深入的研究尚有不足;另一方面,目前虽有大量针对ERK信号传导通路的实验研究,但这些研究均以小鼠间充质干细胞或人骨髓干细胞为样本,且实验结论尤其是对于临床工作的意义还存在一定争议。但必须指出的是,相比骨髓间充质干细胞而言,人脐带间充质干细胞作为骨组织工程重要的种子细胞,其研究还相对滞后,且细胞信号通路方面的研究较少,尤其是在对骨组织工程至关重要的种子细胞向成骨细胞多向分化的通路途径方面存在争议,所以,对ERK信号转导通路在人脐带间充质干细胞向成骨细胞的分化作用仍有一定的研究空间。相信在不久的将来,通过对人脐带间充质干细胞向成骨细胞分化作用研究的进一步深入,有望使人脐带间充质干细胞应用于骨组织工程的希望成为可能,为面部严重骨性损伤的患者和先天发育畸形的患儿带来福音。

[参考文献]

[1]Chang L,Karin M. Mammalina MAP kinase signaling cascades[J]. Nature,2001,4(10):37-40.

[2]Boulton TG,Nye SH,Robbins DJ,et al.ERKs:a family of protein-serine/threonine Kinases that are activated and tyrosine phosphrylated in response in insulin and NGF[J].Cell,1991,65:663-675.

[3]Koranteng RD,Swindle EJ,Davis BJ,et al.Differential regulation of mast cell cytokines by both dexamethasone and thep38 mitogen - activated p rotein kinase (MAPK ) inhibitor SB203580[J].Clin Exp Immunol, 2004,137(1):81.

[4]Robinson MJ,Cobb MH. Mitogen-activated protein kinase pathways[J].Curr OpinCell Bio,1997,9:180-186.

[5]Tang K,Wu H,Mahata SK,et al. A crucial role for the mitogen-activated protein kinase pathway in nicotinic cholinergic signaling to secretory protein transcription in pheochromocytoma cells[J]. Molpharmacol,1998,54:59-69.

[6]Joseph MD,Maier, Ronald V.Mitogen - activatedprotein kinase (MAPK)[J].Critical Care Medocine Cellular and Molecular Biology for Intensivist,2005,33(12)suppl: S417.

[7]Hotokezaka H,Sakai E,Kanaoka K,et al.U0126 and PD 98059, specific inhibitors of MEK,Accelerate differentiation of RAW264.7 cells into osteoclast- like cells [J]. JBiologChem,2002, 277 (49): 47366

[8]Suzuki A,Guicheux J,Palmer G,et al. Evidence for a role of p38MAP kinase in expression of alkaline phosphatase during osteoblastic cell differentiation[J]. Bone, 2002, 30(1):91.

[9]廖清船,肖洲生,秦艳芳,等. 植物雌激素金雀异黄酮通过p38MAP K通路促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化[J]. 中国药理学通报,2006,22(6):683.

[10]Geraldes P,Sirois MG,Bematehez PN,et al.Estrogen regulation of endothelial and smooth tangible cell migration and proliferation:role of p38 an d p42/44 mi togenactivated protein kinase[J].Arterioscler Thromb Vasc Boil,2002,2(2):1585.

[11]郑志娟.人脐带间充质千细胞的研究进展[J].解剖科学进展,2008,14(1):100-104.

[12]Fridenstein AJ, Piatezky-shapiro, Pertakova KV. Osteogenesis in trsnsplants of bone marrow cells[J].Embryol Exp Morph,1966,16(3),581-390.

[13]Hoynowski SM,Fry MM,Gardner BM,et al. Characterization and differentiation of equine umbilical cord2derived matrix cells[J].Biochem Biophys Res Commun ,2006,362(2):347-353.

[14]Campard D ,Philippe A ,Lysy ,et al. Native Umbilical Cord Matrix Stem Cells Express Hepatic Markers and Differentiate Into Hepatocyte2like Cells[J] .Gastroenterology ,2008,134 (3) :833-848.

[15]野向阳,李相军,徐岩,等.人脐带间充质干细胞体外成骨及其免疫学特征[J].中国组织工程研究和临床康复,2009,13(36):213-216.

[16]肖宏涛,牛希华,刘 毅. 人脐带间充质干细胞的体外分离、培养及诱导分化[J].郑州大学学报(医学版),2010,2(14):267-271.

[17]廖清船,肖洲生,秦艳芳,等. p44/42和p38MAPK在骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化中发挥不同的功能[J].中国骨质疏松杂志, 2004, 10(3):267.

[18]Jaiswal RK, Jaiswal N, Bruder P, et al. Adult human mesenchymal stem cell differentiation to the osteogenic or adipogenic lineage is regulated by mitogen-activated protein kinase[J]. J Biochem,2000,275(13):9645-9652.

[19]Salasznyk RM . ERK signaling pathways regulate the osteogenic differentiation of human mesenchymal stem cells on collagen and vitronectin.Cell Commun Adhes,2004,11:137.

[20]Salasznyk RM, Klees RF ,Boskey A , et al. Activation of FAK is necessary for the osteogenic differentiation of human mesenchymal stem cells on laminin-5[J].J Cell Biochem, 2007,100(2):499.

[21]张丽蓉,项 鹏,夏文杰,等. PD98059对人骨髓间质干细胞分化为成骨细胞的影响[J].中国病理生理杂志, 2002,18(2):896-899.

[22]Takami M,Cho ES,Lee SY,et al. Phosphodiesterase inhibitors stimulate osteoclast formation viaTRANCE/ RAN KL expression in osteoblasts: possible involvement of ERK and p38 MAPK pathways[J].FEBS Lett,2005,579 (3) : 832-838.

[23]曹 阳,郑 翼,陈扬熙,等. 机械应力下成骨细胞外信号调节激酶ERK 1/2的早期变化[J]. 第四军医大学学报, 2007,28(18):1663-1666.

篇8

    附：公开发行股票公司信息披露的内容与格式准则第二号年度报告的内容与格式（试行）

    说  明

    （一）根据《股票发行与交易管理暂行条例》（以下简称《股票条例》）和《公开发行股票公司信息披露实施细则》（以下简称《信息细则》）制订本准则。

    （二）凡根据《股票条例》在中华人民共和国境内公开发行股票的股份有限公司应当按照本准则的规定编制年度报告。

    （三）本准则规定的年度报告的内容与格式包括：

    1、封面及目录；

    2、年度报告正文

    （1）公司简介，

    （2）会计数据和业务数据摘要，

    （3）董事长或总经理的业务报告，

    （4）董事会报告，

    （5）财务报告，

    （6）公司在报告年度内发生的重大事件及其披露情况要览，

    （7）关联企业，

    （8）有关本公司的参考信息；

    3、备查文件。

    （四）公司对本准则列举的各项内容应当进行披露。但是本准则某些具体要求对公司确实不适用的，公司可根据实际情况做出适当修改，同时予以说明。公司还可根据其自身的实际情况，增加其他内容。

    已发行人民币特种股票（包括B股和H股）以及其他类型的海外股票及其派生证券的公司，同时应编制年度报告外文译本。公司应努力保证两种文本内容的一致性。并在外文本上注明：“本报告分别以中、英（或日、法文等）文两种语言编制，在对两种文本的理解上发生歧义时，以中文文本为准。”

    已在境内和境外两个以上证券市场（含两个，下同）发行了股票和挂牌上市的公司，在编制境内和境外的年度报告时，应尽量做到内容一致。如果境外证券市场所要求的年度报告的内容与本准则不同，应遵守报告内容从多不从少，报告编制时间从短不从长，报告要求从严不从宽的原则办理。如境内外年度报告内容有较大差异的，应将另一文本的年度报告列为备查文件。

    （五）公司全体董事必须保证年度报告所提供的信息的真实、准确、完整和公正，并就其保证承担连带责任。向股东提供的年度报告可以刊载宣传本公司业绩的照片、图表等，但内容应与年度报告正文相一致，不得有误导和欺诈行为。

    （六）公司应当在每个会计年度结束后一百二十日内编制完成年度报告。报告完成后，公司应立即将年度报告十份报送中国证券监督管理委员会（以下简称“证监会”）和其股票挂牌交易的证券交易所。在召开年度股东会之前至少二十个工作日，公司应将不超过五千字的报告摘要刊登在至少一种由证监会指定的全国性报刊上，同时将年度报告备置于公司所在地、挂牌交易的证券交易所、有关证券经营机构及其网点，以供股东和投资公众查阅。

    已在境内和境外两个以上证券市场发行了股票和挂牌上市的公司，应在同一时间对境内、外市场公布年度报告。如果国内外市场对编制年度报告的期限要求不同，应以较短的期限为准。

    （七）如果公司确有困难，无法在会计年度结束后一百二十日内编制完成年度报告，应该在报送年度报告最后期限到期前至少十五个工作日，向其股票挂牌交易的证券交易所提出延期申请，延期最长不得超过六十日。同时报告证监会。在申请中应说明延期的原因及预计的最后期限。一旦证券交易所予以批准，公司应在指定报刊上公布延期提供年度报告的消息。

    （八）公司按以上第（六）条要求在证监会指定的报刊上披露年度报告摘要时，其内容应当至少包括年度报告正文第（二）节的数据部分，第（三）节第1、2、3、4条的主要内容，第（四）节第1、2、3、4、5条的主要内容，第（五）节、第（七）节和第（八）节。

    经交易所同意，公司可以在股东大会召开之前公布财务报表，其后公布年度报告。

    （九）年度报告所用的纸张应有良好的质量，幅面应为209×295毫米（相当于标准的A4纸规格）。

    （十）本准则由证监会负责解释，自公布之日起实施。凡地方有关规定与本准则规定相抵触的，按本准则执行。

    一、封面及目录

    年度报告的封面应载明公司的正式名称、“年度报告”字样和报告期年份，并可以载有本公司的外文名称以及公司徽章或其它标记的图案。

    目录应在封面内首页上排印。

    二、年度报告正文

    （一）公司简介

    本节简要介绍公司的历史与发展、各项主营业务、突出的特点及规模等，以400字以内为宜，可以刊载于封二或正文中。

    （二）会计数据和业务数据摘要

    本节采用数据列表方式（还可以附有图形表），提供至报告年度末为止的公司前三年（或自公司成立以来）的主要会计数据和财务指标，包括（但不限于）以下各项：净营业收入、税后利润、总资产、股东权益、每股收益、每股净资产、每股红利、净资产收益率等。

    每股收益＝税后利润／普通股份总数（按全面摊薄计算）

    每股净资产＝股东权益／普通股份总数

    每股红利＝当年可分配利润／普通股份总数

    净资产收益率＝税后利润／股东权益×100％

    已发行普通股以外的其他种类的股票（如优先股等）的公司，应按国际惯例计算以上指标，并说明计算方法和参照依据。

    除会计数据和财务指标外，公司也可以采用数据列表方式或图形表方式，提供与上述会计数据相同期间的业务数据和指标，例如，产品销售量、市场份额、以实物量计算的人均劳动生产率、公司各项主要业务占总收入的百分比，公司各地区收入占总收入的百分比等等。

    数据的排列应该从左到右，左边是报告年度（最近一期）的数据。报告年度的数据也可采用与其他年度数据不同颜色或黑体字印刷。

    （三）董事长或总经理的业务报告

    公司董事长或总经理应向股东和其他年度报告的使用人报告公司的经营情况及本节规定的其他内容。

    1、公司经营情况的回顾

    报告人应首先简要回顾公司在执行年度内总的经营情况。然后对公司所处的行业做简要介绍，例如行业的总体情况、相关产业政策、本行业的主要统计数据等。

    报告还应介绍公司在本行业中的地位，如按销售额排列的名次、是否为国家主管部门专业定点生产经营单位等。

    凡引用的有关本行业的数据，应注明数据来源。

    在介绍了行业的情况之后，报告人应较详细地介绍公司在报告年度的经营情况，包括（但不限于）以下内容：

    （1）公司在报告年度取得的成绩与进展以及对经营计划目标的完成情况。应分别介绍每类产品的生产、销售数量和市场占有率，或建设项目的进展情况、服务项目的收支情况，以及产品改进措施的落实、科研成果的应用效果，技术的改进与提高，人员的增加和专业素质的提高等。

    （2）在经营中出现的问题与困难及解决方案。

    （3）有关公司的其他情况。公司可根据其具体情况补充陈述（但不限于）下列内容：

    ①受国家限额控制的资源消耗情况；

    ②境外市场的发展情况；

    ③公司外汇平衡情况；

    ④对公司业务有影响的工业产权及版权的有关情况。

    如果公司实行多元化经营，其业务涉及不同行业，则应对占公司主管业务收入10％以上（含）的经营活动及其所在行业分别作出介绍。如果公司在不同地区或国家开展业务，还应该按照不同地区或国家来反映公司主营业务收入的构成。

    2、对实际经营结果与盈利预测的重大差异的说明

    如果公司在报告年度之前或之中公布过报告年度全年或六个月以上（含）的盈利预测，而报告年度实际经营结果与盈利预测存在重大差异的，应对差异产生的原因进行较为详细的分析与说明，包括产生差异的主要项目和造成差异的主要原因。

    本条所说重大差异，是指公司在报告年度内的主营业务利润实际数低于预测数的20％或高于预测数的50％。

    3、对前次募集资金的运用情况的说明

    如果公司在报告年度内募集过资金（包括增资配股），或者虽然报告年度内没有新募集资金，但报告年度之前募集的资金所投入的项目的建设延续到报告年度之内，则应就以下几方面（但不限于此）对资金的运用情况和结果加以说明：

    （1）资金的投入情况，是否按计划进度进行，是否控制在原预算金额之内，其他配套资金（如果有的话）是否按计划到位，如有改变，应就其原因及依据进行披露。

    （2）项目的建设进展是否符合计划进度；

    （3）项目的收益是否与预测相符。

    4、新年度的业务发展规划

    本条介绍公司在新的年度中的业务发展规划，包括（但不限于）下列各项：

    （1）公司在这一年中生产经营的总目标；

    （2）为实现这一目标所需采取的措施；

    （3）固定资产更新、改造和扩充；

    （4）新技术、新工艺、新材料的研究、开发与实施；

    （5）正在建设、开发中的项目的预期进度；

    （6）人员数量的增加和素质的提高；

    （7）配套资金的筹措等等。

    5.其他需要披露的业务情况与事项

    本条列示报告人或者公司股票挂牌的证券交易场所认为有必要披露的、与公司业务有关的其他信息。

    （四）董事会报告

    1、董事会工作报告摘要

    本条摘要登载董事会向股东会提交的工作报告的要点。

    2、股票与股东

    本条介绍公司在报告年度末股票与股东的有关情况及其在报告年度内的变动情况，包括（但不限于）下列各项：

    （1）股票与股本变动情况

    ①股票发行与上市情况

    本项介绍到报告年度末为止的前三年（或自公司成立以来）历次股票发行情况，包括每一次的股票和派生证券的种类（A种股票、B种股票、H种股票、其他种类的海外股票、优先股、认股权证等）、发行日期、发行价格、发行数量、上市日期、获准上市交易数量、交易终止日期等；

    ②对报告期内因发行新股票（包括送、配股）、拆细或合股等原因引起本公司股票面值和股份总数的变动，对认股权证的购股情况，可转换优先股转为普通股和可转换债转股的情况等应分别说明。

    ③公司本年内各类发行在外的股票的最高价、最低价、年初交易首日的开盘价和年终最后交易日的收盘价以及全年交易量。

    ④介绍到报告年度末为止的前三年（或自股份公司成立以来）普通股每股净资产的变化情况。

    ⑤介绍报告年度内公司回购和注销已发行在外的本公司股票的情况。

    ⑥内部职工股情况，指专门向内部职工发行的股票、股权证及派生证券。应介绍现存的内部职工股历次发行日期、数量、发行价格、托管起止日期、本年获准公开转让的数量等。

    （2）股东情况介绍

    ①股权结构情况，介绍报告期末的股权结构？？即以数量和比例表示的国家、法人、个人等各类股东持有的股份和外国投资人持有的股份。

    ②股东数量，介绍报告期末的股东总人数、法人股东、个人股东和内部职工股东人数等。

    ③主要股东持股情况，要求将持有本公司5％以上股份的股东的名称、年末持股数量、年度内股份增减变动的情况如实报告。若持股5％以上的股东少于10人，则应列出至少10名最大股东的持股情况。

    以上列出的股东情况中对代表国家持有股份的股东、非境内公民或外籍股东应予以注明。证监会批准豁免的情况除外。

    ④内部职工股东（指通过专门向内部职工发行而获得股票的内部职工）数量，年末持股总人数、年度内增加（或减少）的人数。

    3、董事、监事与高级管理人员

    本条包括（但不限于）下列各项：

    （1）现任公司董事、监事、高级管理人员的姓名、性别、年龄、职务、任期和专业简历，并陈述报告期内前述人员的变动情况；

    （2）公司董事、监事及高级管理人员年末持股数量、年度内股份增减变动的情况。

    （3）公司董事、监事及高级管理人员年度报酬情况（以公司支付为限），包括采用货币形式、实物形式和其他形式的工资、奖金、福利、特殊待遇及有价证券等。

    年度报告中，应列有以上人员的身份证号码。

    4、重大诉讼事项报告

    本条要求披露重大诉讼事项（如果有的话）的有关情况，内容要求如下：

    （1）对发生在编制本年度中期报告之后、且尚未编入重大事件报告的重大诉讼事项，应陈述该事项中的诉讼提出日期、参与诉讼各方当事人、人及其所在单位的姓名或名称、受理法院的名称和所在地、诉讼的原因和依据、对赔偿和处罚的要求、开庭审理日期、判决日期、判决结果、诉讼各方当事人对该结果的意见等；

    （2）对已编入本年度中期报告或重大事件报告、但当时尚未结案的重大诉讼事项，应陈述其进展情况或审理结果。

    （3）公司董事、监事和高级管理人员个人被司法机关处以拘役以上的刑事处罚或受到刑事起诉后，亦应在本节陈述。

    （4）如报告期内无以上情况发生，应明确陈述“本年度公司无重大诉讼事项。”

    本条所指的重大诉讼事项是：公司以法人的名义、公司董事、监事和高级管理人员因其在本公司任职而以个人名义作为当事人所参与的、对公司的财务状况、经营成果、声誉、业务活动和未来前景等可能产生较大影响的法律诉讼事务。

    如果公司确知存在与公司有关的重大诉讼的可能，也应对此加以说明。

    5、年度股东会

    本条应公布年度股东会的召开时间和地点，并简要介绍准备提交股东会审议批准的事项，包括下列各项：

    （1）董事会和监事会向股东会提交的工作报告；

    （2）年度决算和预算报告；

    （3）利润分配或亏损弥补方案（包括股利分配方案）；

    （4）新年度发行股票（包括配股）、公司债券和其他股本变动的方案；

    （5）董事会成员和监事会成员的变动，董事、监事的报酬、福利的变动；

    （6）董事会提交股东会审议批准的其他事项。

    6、其他报告事项

    本条提供董事会认为有必要报告，而又未包括在上述各项之中的事项，例如：