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健康的市场经济范文

发布时间:2023-10-12 17:42:27

导语:想要提升您的写作水平,创作出令人难忘的文章?我们精心为您整理的5篇健康的市场经济范例,将为您的写作提供有力的支持和灵感!

篇1

“诚信”,即“诚实守信”,这是中华民族的传统美德,是一个社会赖以生存和发展的基石。诚实是做人之本,守信是立事之根。诚实守信,对自己,是一种心灵的开放,是对自己人格的尊重;对他人,是一种交往的道德,是一种气魄和自信;对整个社会经济的发展,是宝贵的无形资产。然而近几年来,由信用弱化和缺损引发的社会经济矛盾日益突出,已严重危害了市场经济的顺利发展,阻碍了国家经济乃至整个社会文明进步的步伐。

一、诚信缺乏严重危害着市场经济的发展

中国传统社会崇尚诚信,“诚者天之道也,诚者人之道也。”“言必信,行必果”。但是,在市场经济发育不完善的今天,缺乏诚信的现象却相当普遍:假冒伪劣商品泛滥,制假贩假活动猖獗,假文凭、假证件、虚假广告遍地、银行呆账坏账、信用卡诈骗、偷税漏税、走私骗汇等等。诚信已成为当今社会最稀缺的资源之一。

市场经济是建立在信用基础上的,缺乏诚信,势必使市场经济的运行受阻。

(一)缺乏诚信,会增加经济主体的交易成本,降低效率,导致大量社会资源浪费

人们在经济生活中的一切行为,如购买商品、出售货物、投资生产建设、借贷资金、期权交易、雇佣、进行创新等,都需要消耗交易成本。交易成本包括以下几项:人们在进行经济行为前的调查成本、在经济行为中的谈判成本和沟通成本、合同付诸实施后的监管成本。诚信缺乏,都将使这些成本大大增加。

(二)诚信的缺失严重影响了企业的运营,不利于企业参与国内和国际的竞争

当前普遍存在着企业尤其是中小企业贷款难、担保难、抵押难等问题。据东方国际保理中心对我国数千家企业拖欠和亏损的案例统计,约有80%的企业是由于信用缺失造成亏损的。

(三)不诚信的行为破坏了市场经济秩序,给不法分子提供了可乘之机,容易导致经济犯罪和腐败

据有关资料显示,仅2000年一年,我国公安机关立案侦查的伪造金融票据、违法票据承兑的犯罪案件就达7419起,涉案金额高达52亿元。2000年上半年,我国立案的经济合同违法案件共有5338起,涉案金额达16.3亿元。商业欺诈已成为侵蚀市场肌体的一大毒瘤。

(四)诚信的缺乏影响了整个国民经济的健康运行,损害了中国经济的国际形象,阻碍了中国经济全球化的进程

一个国家经济主体的诚信程度是国际形象的重要组成部分,也是体现投资环境优劣的一个重要尺度。如果一个国家中一部分经济主体诚信不足,就会损害整个国家的总体对外形象,进而影响到外商来中国投资办厂和贸易的积极性。

二、造成当前经济生活缺乏诚信的主要原因

造成当前经济生活缺乏诚信的原因是多方面的,既有历史原因,也有现实原因;既有主观因素,也有客观因素。

(一)造成当前社会经济生活缺乏诚信的最主要原因是法制不健全,使得一些不法分子钻了漏洞

一方面,对失信行为的惩罚不够严厉。有的国有企业欠贷款不还,银行不能处罚它们,最后划为呆账、坏账一笔注销。这类企业由此得利,于是其他企业纷纷仿效。对失信者不重罚,使失信者获得的收益大于成本,会对其他企业产生一种示范效应。

另一方面,对于那些诚实守信的企业和个人国家缺乏相应的信用风险评级机制,信用好的与信用差的企业难以区分,信用好的企业并不见得在股票发行、债券认购、银行授信额度、优惠贷款利率等方面获得鼓励。因此,造成企业对诚信经营的热情不高。

(二)在新旧体制转换时期旧秩序遭破坏,新秩序还未完全形成

这个阶段会出现这样的情况,不道德的行为既不受旧秩序约束,又不受新秩序的处罚,比讲道德的行为获利更多,这样的利益趋动会使一部分人选择不道德行为。

(三)人员流动性加剧客观上使不守信者所受的舆论监督、惩罚作用大大减弱

在过去的管理体制下,人事关系固定,或固定在城镇的“单位”里,或固定在农村里,某人一旦丧失信誉,其所受的舆论惩罚相当严厉。而今天,跳槽流行,人员流动十分频繁,某人在某地不讲信用,换个地方照样挺起胸膛做人。舆论机制对信誉的维护作用已大大减弱。

(四)现代商业道德、标准商业行为模式还未形成

中国历史上的商业发展非常有限,谈不上现代意义上的市场经济。与此相对应的也就比较缺乏优良的商业道德传统。人们对市场经济的基本法则认识还很浅薄,而且对市场经济的内在文化意蕴存在着严重的误解。人们还未形成对现代市场经济伦理规范和商业道德规范的普遍共识。

三、建立诚信的市场经济秩序实为当务之急

市场经济是诚信经济。在市场竞争中,信誉、信用是最坚实的基石。

(一)加强信用方面的立法和执法,用严格的法律制度来规范各种信用关系

参照发达国家的经验,建设社会信用体系应立法先行,并严格执法。立法应尽可能考虑到方方面面,包括银行信用方面的立法、非银行方面的立法、规范商业信用和消费信用行为的立法、规范商业授权行为的立法、规范信用中介服务行业行为的立法等。应尽快建立和完善失信惩罚机制,用制度惩罚失信者,使其无立足之地。同时,积极利用制度来奖励和鼓励那些讲究商业道德、诚实守信的企业和个人。

(二)政府应设立专门的机构负责信用制度建设工作的统一组织和推动

具体来说,政府应加强电子网络建设,建立起覆盖全社会的信息查询网络系统,以高效的电子信息传递系统作为硬件支持,用先进的现代化手段加强信用的监督和管理,制定关于信用的国际化标准,在政府职能部门如人民银行、工商、税务、质检等发挥监督作用的同时,注重调动行业协会等民间专业机构的积极性,促使其加强对本行业的自律管理。

(三)从道德规范上强化诚信观念,加强宣传、教育

在全社会形成这样一种共识:诚信是市场经济中宝贵的无形资产,是市场经济的通行证。大力倡导爱岗敬业、诚实守信、办事公正、奉献社会的职业道德,增强全民诚信观念,努力形成与市场经济发展相适应的健康、和谐、积极向上的思想道德体系。一方面,要增强制定各项政策法规的政府官员的诚信意识,因为他们是市场经济的“仲裁者”,其责任心如何,直接影响到整个社会信用的提高与否。因此,应尽可能减少政府官员对待国内外企业界、商务接待和处理具体事项中的随意性和不稳定性现象。另一方面,对于企业,要强化诚信意识,加强对员工诚信理念的教育与培训,增强内部信用管理,形成一种讲信用、守信用、以信用求生存的良好社会风气。

(四)加快发展社会化信用服务行业,建立规范、运作良好的信用服务中介机构

要做好这项工作,应以法律的形式来规范公共信息、诚信数据的取得和使用程序。一方面,鼓励信用中介机构注重自身信用数据库的建设,另一方面,政府有关部门要建立行业部门数据库,待条件成熟时可将自建数据的部分内容提供给信息中介机构,为我国信用行业的发展提供支持。信用中介机构的运作必须处在政府的有效监督和管理下,政府规范其机构的准入、资质条件,使其真正成为体现公平、公开、公正原则和品格的社会信用管理服务机构。

(五)在各种具有民事行为能力的微观经济主体中建立起完善的信用管理体系

篇2

大家好,非常感谢朱总的邀请,也谢谢各位到场的嘉宾和与会者,我大概用20多分钟跟大家交流一下中国的经济和中国当下的资本市场。对于中国来讲,相比1990年代初我觉得我们现在更应该有理由需要一个更加健康的中国市场。所以,我今天的题目就是“中国经济需要一个健康的资本市场”。

对于中国现在面临的环境来讲,我把它概括为三句话。

第一,对于全球经济和市场,依然是一个动荡的时代。

第二,对于中国经济,目前可能是一个非常糟糕的时期。

第三,对于中国资本市场,现在是一个伟大的时代。

为什么这么讲?因为大家都知道,对于中国经济来讲还在不断地往下探,何时是底还搞不清楚。大家唯一感到有点欣慰的是,今年上半年的资本市场让大家赚了钱,但是很多人赚了钱又被股灾洗回去了,所以,就感到很迷茫。我相信大家做股权投资的可能会好一点,但是再往下走,每一个股权投资者都面临退出问题。所以,没有一个健康的资本市场,我们这么多年的忙碌估计又是一个很纠结的主题――就是说我的钱退得出来吗?因为大家知道在股灾发生的时候,IPO又停了。而我们做股权投资投进去,退出的一个主要的渠道就是IPO。IPO如果停了,毫无疑义我们投资的积极性就小了,而且更重要的是我们本来期待能把钱退出来、收回来的又黄了。所以,我是希望IPO恢复,希望只要市场起稳了,没有恐慌性的暴跌了,那我觉得市场就应该把IPO恢复,市场的正常融资是资本市场的一个重要的标志。

经济转型需要资本市场推动

我们看中国经济,大家讲中国经济现在进入新常态,新常态也就是说我们告别了8%以上的增长。但中国经济处于在历史的维度讲是什么时代?这样给我们很多对经济政策的选项做一个指引。我把美国经济和中国经济GDP的增长做一个时间的平移,以1952年前移到1929年的股灾,会发现中美经济增长的曲线波动是高度一致,中国经济特像美国1980年代初期,美国80年代面临很多的经济问题,在中国同样制约着中国经济。

比如说我们的经济增长的问题、就业的问题、经济结构转型的问题一样,1980年代美国有一个很伟大的总统――里根先生,他后来在经济学界获得一个很高的称谓,叫里根经济学。作为一个美国总统他不是学经济的,是演员出身,可以在经济学获得这么高的荣誉,说明他对美国经济是有贡献的。反过头来看,不是里根多伟大,而是他的智囊团很伟大,他自己很少做判断,基本上年龄大了以后开会就睡觉,睡完以后大家讨论完了他就签字,所以就有里根经济学这么伟大而来。在里根时代,美国通过启动科技引领创新推动美国资本市场,尤其是美国纳斯达克市场发展,促进美国经济创新。1980年,在美国代非常担心美国被日本收购基础下,美国1990年代成功超越日本,然后在21世纪遥遥领先,到现在为止一直引领全球经济增长。

所以,一个国家经济的转型是需要资本市场的推动的。对于美国在1980年代所做的很多事我们都可以拿来借鉴,包括里根时代所采取的芝加哥经济学派的主要的观点,我觉得中国当下都应该采用。

中国当下经济压力仍然很大

对中国来讲我们做一个横向的比较,中国经济和我们周边的日本、韩国,包括美国,我们处于一个什么样的时期?从人均GDP来看,我们有点像1960年代的美国,有点像1970年代的日本和1990年代的韩国。所以,对于中国经济来讲的话,毫无疑义未来增长的空间应该是很大的。对于中国当下又面临一个很大的经济下行的压力,这时大家可以看到很多新的经济数字,这些数字没有一个不是向下的,无论是消费、投资、进出口,还是当季的GDP增长。所以,对中国经济增长现在说已经见底了,或者说要启动新一轮复苏增长了,这个话我觉得还要再耐心等几个季度。

从克强指数也可以看出来还在不断创新低,而且都快奔着0去了。奔着0去什么概念?也就是说整个中国经济从增长角度讲处于一个停滞状态。而且克强指数里的发电量是个位数,我们的铁路运输量都很低。从这个角度讲中国当下经济压力仍然很大。

从结构来看,因为中国经济以前一直靠投资,对中国经济投资来讲占比比较高的能力是制造业、房地产,但是无论中国的制造业还是房地产业产能过剩压力都非常大,所以看到我们的投资数据是不断往下的。

唯一一个好一点的,大家可以看到就是卫生和社会工作。这一块我们的投资今年好像还可以。因为大家可以做一个推理,比如说住医院,每个人都可以住个单间、套间,没有人说你。但是去三甲医院要个单间或套间,我估计中央委员在协和要个单间好像都挺难的。这说明一个什么问题?说明随着健康需求的增加,整个医疗领域的服务、资源是严重供不应求的,这是中国现在在社会领域的投资唯一一个需求比较大的。另外一个就是上一周发改委刚颁布的一个政策,鼓励社会资本投建停车设施,而且给补贴。也就是说汽车多了没地方停,所以,这个需求也是很明显的,对中国来讲,毫无疑义,大量的需求是严重不足的。

从中国消费结构来看,在2005年之前,在整个消费结构中,吃是我们的第一大消费需求,但是2005年以后,行――汽车成为我们的第一大需求。所以,不管是汽车自身的销售还是汽车相关的油品的销售,已经遥遥领先于消费领域的其他大类。对于中国来讲,已经快要变成了汽车时代,对汽车上数据的变化都严重关系到中国经济的门脉。比如7月份汽车销售是负增长,也就是说引领中国消费的第一大汽车行业也陷入停滞。

出口更不用说了,除了今年2月份出口有一个异常的增长以外,当然这个异常的增长有同比机制的问题,为什么2月份出现这么一个异常数据?我们感觉是和资本市场相关热钱的流动,就是通过贸易手段进入中国是相关的。除了2月份,其他的数据都很差。大家知道在上一轮经济周期,我们讲中国是依靠出口拉动。所以出口没有增长,出口对中国经济拉动的贡献就是负的。所以,对于中国经济来讲,我们的三架马车都面临很大的压力。

另外,这次股灾对于我们正在进行的房地产去库存也产生很大的负面影响。从4月份起,我们的房地产去库存速度一直在提速,一直在加速,曾经出现过深圳房地产爆涨的现象。但是股灾以后,深圳那些预定的房就没人要,而且整个地产去库存的速度迅速下降了20%多。大家知道中国上一轮经济除了出口拉动,另一个重要的就是房地产。现在在每个城市旅游就知道,首先进入眼帘的就是新建的高楼大厦。所以,这些房地产去库存做不好,毫无疑义地产危机就会爆发。地产一出现危机,就会对整个实体经济,对金融体系产生很大的冲击。

所以,2015年我们有一个密切的经济指标,每周每天跟踪的一个指标就是中国地产出库存的速度。我们看到数据在逐步加快的时候我们很欣慰,按照那个速度,整个地产去库存就会把地产的很多风险按下去。但是股灾一来,这个数据一变,经济接下来就面临很大的压力了。

对于三季度GDP的增长,我们给出了一个观点是可能会出现GDP增长的悬崖,也就是说三季度GDP增长可能会迅速下坠。为什么这么讲?因为对于上半年经济贡献最大的是金融行业,一季度贡献1.3,二季度贡献1.4。而去年三四季度同期金融行业对于GDP的贡献只有0.7、0.8。如果我们在接下来的三四季度金融行业对经济的贡献回车,往后回落0.5到0.6个点,那大家想想GDP是不是也要下坠0.6到0.5?即使其他行业略微补一点点,那以这个速度下坠下去,三季度的GDP增长应该也在6.8%之下。所以,对接下来几个季度的经济我们不是很乐观,即使是跌到6.5%我们也觉得不是坏事。

中国未来经济?三个抓手很关键

现在就我们的观点看来,中国经济增长的项目、结构要比经济增长的速度重要。因为从经济以往的政策来看,如果现在还像以前那么放水,那毫无疑义必定导致更严重的泡沫问题。我觉得今年非常好的一点就是很多新兴经济,整个社会的创业的热情在大家的推动之下已经活跃了。除了金融行业,整个社会服务业增长也是比较快的,对于经济增长的贡献也和金融业是持平的。如果保持这个速度,整个经济能够稳定在6.5-6.8,我觉得对于中国经济成功转型是非常有益的。当然这个前提是我们要实实在在把传统产业好好调整,对新兴产业要加快促进,对很多制约经济增长的要素要逐步释放。

对中国未来经济,我们觉得三个抓手是很关键的:

第一,消化过剩产能。因为对于中国来讲,我们经历过两轮的制造业产能增长。第一轮是2001-2007年,制造业产能迅速地提高;第二轮是2009-2011年制造业得到再一轮提升。所以,对中国来讲中国的产能就是世界的产能,中国几乎是每一个行业生产的产能都不是中国自身的市场可以消化的,它是为全球市场准备的。这么大的产能结构,你不把产品销往全球,毫无疑义产能就会闲置,闲置就会带来债务压力,就会产品债务和金融的风险。所以,一带一路是解决我们产能过剩,解决我们经济压力的一个最主要的方法。从现在来看一带一路压力还很大。至少到现在为止,我们提了一年多了,但实际上可以落实的项目还不是很多,所以这个压力是相对来讲比较大的。

第二,国企改革。整个国有资产在中国经济总量中的比例只有30%多,但是它对中国经济的影响力是很大的,因为传统产业里大部分是由国有资本来控制的。所以,在整个传统产业面临很大压力的对比之下,这些国有企业只有通过改革和并购重组才能把这些盘活。但是大家知道并购重组如果没有解决出的问题,1+1是不可能等于3的。只有把走出去消化过剩产能和并购结合在一起才能把这部分国有企业的改革,把这部分资产盘活。

第三,经济结构调整。也就是说在这一块是需要我们资本的推动和创新的催动。因为大家知道银行信贷是带不来创新的,因为它很保守,所以,对中国经济的创新只能依靠资本推动。在今天会场上在座每一位都应该是中国经济结构转型的主要的生源。

资本市场的活跃,给中国经济带来的影响很直接

对于中国资本市场其实我们反过头来回想,近一年的牛市,我们感觉到资本市场的活跃给中国经济带来的影响还是很直接的。

第一个就是提高了社会融资的占比,大家可以看到直接融资和银行的中长期信贷单位的比值,这个比值在今年6月份最高点达到了37%。也就是说,在对于企业给予的中长期资金的支持里面,占到了整个结构中的四分之一。

第二个就是促进了并购的快速崛起。当然这里面有证监会进一步放权的作用,除了重大的收购兼并需要报备以外,其他小一点的收购兼并基本是让权给市场,这也给资本市场的并购带来很大的促进作用。数据可以看到,在今年二季度资本市场发生的并购案例是创了一个记录。

第三个就是促进了社会资本的流动。就是说我们在座每一个投资家把社会资本积累起来,投向那些有成长性的企业。这个数据在2015年二季度应该是一个有热度的数据,7月份也达到了高峰。也就是说通过在座努力,把很多社会的闲钱转化为投资资本给予很多新兴的企业,让他们有一个发展的资本金,促进了经济结构的转型。

我前面讲,资本推动是中国经济结构转型和创新发展最主要的一个动力。这么多年来,尤其是2009年以后,整个社会资本活跃,推动了中国经济的发展。

另外,股市的繁荣还有一点就是把中国资本市场长期低迷的估值得到了修正。大家很羡慕美国资本市场,其实美国估值相比中国来讲,在前几年一直都是高于中国资本市场的。到现在为止,美国道琼斯指数的整体PE还比中国资本市场高。我在去年讲,美国资本市场到头了,到现在来看这个观点还是正确的,因为美国今年资本市场的涨幅还是负的。所以,对中国当下来讲,在全球,中国资本市场也会有吸引力,因为我们的市场的核心的估值水平还是比较平。当然,大家讲这轮股灾为什么会有这轮股灾?这轮股灾的根本的原因还是有一点泡沫。当然这个泡沫不是在核心指数,而是在我们的创业板和中小板。在这个里面确实这个泡沫高得很可怕,最高对于整个指数来讲接近了150倍的PE,这个估值水平应该是高出了纳斯达克历史上曾经有的一个水平。这么高的估值再加上很多杠杆、资金和资本市场很多疯钱的推动,发生这种踩踏就在所难免。

为什么说是风险?从去年三季度开始的牛市带来的财富效应,让更多人都觉得资本市场是一个很好的赚钱的机会。再加上我们政府的舆论引导,几乎是所有人,包括上一回在西安开会,做饭的厨师都拿着手机在炒股,所以,这个市场确实有一点全民皆股的味道。风险最高的时候,在江浙一带可以放大到5-10倍,利息是多少?月息是4分,大家想想月息4分年利率是50%,我借你1000万元炒股,用一年最后我给你50%的利息。我相信没有一个投资人会这么干,都不是傻子。我借你1000万元,我用两个月,给你8分的息,赚完走人。每个人都抱着这个思想,毫无疑义它就会迅速推高手中的筹码,迅速想从市场出来。而且10倍杠杆给你一个10%的下跌,就是要强行平仓。所以,对于这些风险来讲,后面的踩踏就是因为强行平仓,就是计算机自动操作导致的。很多股票一开盘直接封跌停,也卖不出来,就出现了跌停,导致了踩踏。

中国资本市场要想健康发展,长期稳定的资金很关键

中国资本市场要想健康发展,长期稳定的资金很关键。对于前一段整个资本市场的建设,我相信总体来讲还是值得肯定的。在大家的努力下,我们把整个资本市场结构基本上搭建了,就是以地方的股权机构,股权交易平台做基础,在全国新三板和创业板、中小板,加深股市,建立了和美国资本市场相匹配的资本市场结构,这样有利于整个社会资本的流动。

对于中国未来来讲,资本市场仍然是非常有吸引力的,也是对于中国经济非常有意义的一个投资领域。对于未来,无论是中国的资本市场还是中国经济,我们相信风雨过后仍然有彩虹。

美国纳斯达克1987年10月份的那次股灾,两天内迅速跌到30%,但是股灾爆发后美国资本界很有名的格林就主导救市。美国两次大的股灾,一次是1929年美国政府不救,导致世界性金融危机,第二次就是1987年,那次美国救了,后来就有美国纳斯达克10年的牛市,成功保住了美国资本市场的繁荣,促进了美国经济结构的转型。所以,对于中国未来来讲这种救市还是救得正确的,还是比较果断的。

篇3

[中图分类号] R-331 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721(2016)05(c)-0008-05

Development of kits of a single antibody sandwich ELISA for quantitative detection of human nerve growth factor

XU Chun-E1 WANG Wei2 DING Rui2 JI Hong2 WU Xiao-hong3 TIAN Guang3

1.Beijing Center for Drug Evaluation,Beijing 100061,China;2.Beijing Institute for Drug Control,Beijing 100053,China;3.Institute of Microbiology and Epidemiology,Military Medical Science Academy of the PLA,Beijing 100071,China

[Abstract] Objective To prepare mouse monoclonal antibody against human nerve growth factor (hNGF) and develop an ELISA kits for quantitative detection of hNGF. Methods BALB/c mice were immunized with recombinant human nerve growth factor antigen and Freund′s complete adjuvant,the monoclonal antibody against hNGF was prepared by the technique of hybridoma,and then the ELISA detection kit for rapid detection of hNGF content was established. Results 1 hybridoma cell line secreting monoclonal antibodies against hNGF was obtained.1 ELISA kits for the detection of hNGF content was established.The recovery rate of the detection method was 85%-105%,the sensitivity was 0.63 ng/ml,the coefficient of variation was less than 10%,and the peculiarity was good. Conclusion A monoclonal antibody against hNGF is successfully prepared,a rapid and precise ELISA kit is established for detection of rhNGF content.

[Key words] Human nerve growth factor;Monoclonal antibody;ELISA for quantitative detection

神经生长因子(nerve growth factor,NGF)是由其效应神经元支配的靶组织合成和分泌的一种对神经细胞生长发育、分化、新陈代谢等方面具有重要调控作用的活性多肽[1-5],影响外周和中枢神经系统某些神经元的存活和分化,在神经系统的发育以及损伤和修复中具有重要作用[6-10]。多项研究[11-14]成果表明,神经生长因子具有广泛的临床应用前景。

目前,定量检测人神经生长因子的方法有R&D公司的ELISA试剂盒,该试剂盒通过酶联免疫反应对样品中的NGF进行定量,但是,R&D试剂盒是以昆虫细胞表达的重组人神经生长因子为标准品,其以包被抗体包被酶联板,加入抗原后以生物素化的检测抗体结合所捕获的抗原,然后再加入链亲和素-HRP结合物反应,洗涤后显色。由于该试剂盒在双抗体夹心ELISA的基础上采用了生物素-链亲和素放大系统,虽然敏感度高,但操作繁琐,检测过程耗时长,一个实验过程需要6 h完成,而且其标准曲线范围为31.25~2000.00 pg/ml,因此检测高浓度样品时需要高倍稀释,这导致检测结果误差很大。

因此,亟需开发一种快速简便、灵敏度适中且特异性强的hNGF快速检测试剂盒来解决现有试剂盒存在的问题,以推动有关人神经生长因子的研究、药品的开发及临床应用[15-21]。本研究开发了仅基于一株小鼠单克隆抗体的夹心ELISA试剂盒,可以完全满足以上要求。

1 材料与方法

1.1 材料

重组人NGF制品和rhNGF蛋白标准品由北京华安科创生物技术有限公司提供,为精确定量的rhNGF纯品;mNGF标准品(苏肽生,舒泰神药业有限公司)为市售产品;BALB/c小鼠由北京大学医学部实验动物中心提供;可拆卸式96孔板、浓缩洗涤液(20×)、终止液、封板膜、自封袋均为常规实验室耗材,试剂级别为分析纯即可;微量移液器、漩涡混匀器、电热恒温培养箱、超微量微孔板分光光度计均为市售实验室常规检测仪器。

1.2 抗hNGF单克隆抗体的制备

1.2.1 BALB/c小鼠免疫 选取5只雌性BALB/c小鼠,将重组人神经生长因子抗原与弗氏完全佐剂混合,乳化完全后皮下注射,每只小鼠的免疫剂量为80 μg。首次免疫后,间隔2周及3周,将rhNGF抗原与弗式不完全佐剂进行乳化后重复免疫2次,小鼠尾部取血,测血清效价,选取效价高的小鼠进行融合试验。融合前3 d,腹腔加强免疫1次。

1.2.2 细胞融合及杂交瘤细胞筛选 超净台内无菌环境下取免疫BALB/c小鼠的脾脏研磨制成脾细胞悬液,用RPMI 1640培养基洗涤2次,收取1×108脾细胞与2×107~5×107骨髓瘤细胞SP2/0混合于一支50 ml融合管中,补加RPMI 1640培养基至30 ml,充分混匀。1000 r/min离心10 min,将上清尽量吸净。在手掌上轻击融合管底,使沉淀细胞松散均匀。用1 ml吸管在1min左右加预热至37℃的50% PEG 2000(pH=8.0)1 ml,边加边轻轻转动,肉眼可见有颗粒出现,缓慢加入RPMI 1640培养基至20 ml。1000 r/min离心6 min,弃去上清。前10 d在HAT选择性培养基中进行培养,之后直至第1次克隆化完成前选用HT培养基培养。2周后用间接酶联免疫吸附法(ELISA法)检测融合细胞的阳性率,选出阳性值较高的孔,经有限稀释对检测出的阳性杂交瘤细胞进行克隆,连续克隆化3次使阳性克隆孔的阳性率达2次100%后,选出阳性值高的孔转孔并扩大培养并冻存。

1.2.3 抗hNGF单克隆抗体腹水的制备及抗体纯化 采用体内诱生法大量制备单克隆抗体。取6~8周龄的健康BALB/c雌性小鼠,腹腔注射石蜡(0.5 ml/只)。1周后,杂交瘤细胞离心洗涤,用PBS调整细胞数至1×106个/ml,每只小鼠注射0.5 ml。5~7 d后,待小鼠腹部增大,采集腹水。腹水离心后收集上清,用HITRAP Protein A HP预装柱纯化抗体,分装后于-70℃保存。

1.3 抗hNGF单克隆抗体性质鉴定

1.3.1 抗hNGF单克隆抗体亚类鉴定 采用Rapid ELISA Mouse mAB Isotyping Kit鉴定单抗的类及亚类,按照试剂盒说明书操作。

1.3.2 抗hNGF单克隆抗体亲和力常数测定 采用捕获抗体的方法,用GE公司生物分子相互作用分析仪Biacore 3000检测抗hNGF单克隆抗体的亲和力及结合动力学。

1.3.3 抗hNGF单克隆抗体特异性鉴定 采用Western blot鉴定单克隆抗体的特异性,抗hNGF单克隆抗体蛋白的纯化效果用SDS-PAGE鉴定。对rhNGF和mNGF进行SDS-PAGE 电泳,电转印后,用制备的单抗(1 μg/ml)进行孵育,AP标记的羊抗鼠IgG作为二抗(1∶5000稀释),按Western blot的一般步骤操作。

1.4 定量检测hNGF蛋白含量的酶联免疫试剂盒制备

试剂盒按常规方法开发并组装,方法简述如下。

1.4.1 酶标板包被 将抗hNGF单克隆抗体用50 mmol/L、pH=9.5的碳酸缓冲液稀释后加入酶标板的各孔,每孔100 μl,吸附过夜,用吐温-磷酸盐缓冲液洗板,再用吐温-磷酸盐缓冲液封闭过夜,甩干后晾干,即获得单克隆抗体包被的酶标板。

1.4.2 酶标单克隆抗体制备 试剂盒中的酶标单克隆抗体可以用辣根过氧化物酶(HRP)标记抗hNGF单克隆抗体来制备,制备方法如下:①以NaIO4-乙二醇法进行HRP的氧化,达到终浓度10 mg/ml。②在碱性碳酸盐缓冲液(50 mmol/L,pH=9.5)中透析6 h,实现HRP对抗hNGF单克隆抗体的标记,反应结束后用新鲜配制的1 mg NaBH4溶液终止反应,再对PBS透析过夜。③用饱和硫酸铵沉淀,获得纯化的HRP酶标抗hNGF单克隆抗体。

1.4.3 辅助试剂 酶联免疫试剂盒中,辅助试剂包括酶联反应底物溶液、显色液、反应终止液和清洗缓冲液,用于试剂盒的辅助试剂如下。①底物显色溶液:50 mmol/L磷酸-枸橼酸缓冲液(pH=5.0)配制的3%过氧化氢溶液为底物溶液A,浓度为0.1 mg/ml的四甲基联苯胺(TMB)甲醇溶液为底物溶液B;②反应终止液:2 mol/L硫酸;③清洗缓冲液(20倍浓缩液,20×):20 mmol/L PBS(pH=7.4)配制的0.05%吐温20溶液;④样本稀释液:2%小牛血清白蛋白(BSA)。

1.5 酶联免疫试剂盒检测hNGF蛋白含量的方法

检测hNGF蛋白含量的步骤简述如下。

1.5.1 制备标准曲线 ①抗原-抗体反应:在试剂盒提供的酶标板的微孔中分别加入25 μl不同浓度(0、7.8125、15.6250、31.2500、62.5000、125.0000 ng/ml)的rhNGF蛋白标准品,接着每孔加入75 μl酶标试剂混匀,37℃孵育30 min。重复洗板操作4次。②显色反应:每孔依次加入底物溶液A,显色液B各50 μl,显色10 min,每孔再加入50 μl反应终止液结束反应。③比色:将空白对照孔的吸光值调零,用酶标仪在450 nm双波长下测定OD值并记录。④使用直线线性拟和方式进行数据处理,以各标准品的OD450值为纵坐标(Y轴),各标准品的浓度为横坐标(X轴)作图,得到标准曲线。

1.5.2 样品检测 待测样品与标准品同时加样,检测步骤相同,检测样品的OD值减去空白对照的OD值之后,带入标准曲线方程中得到样品NGF浓度,整个检测可在1 h左右完成。

1.6 定量检测hNGF含量的酶联免疫检测试剂盒的评价

1.6.1 准确性 取一批已知浓度110 μg/ml的rhNGF蛋白溶液,在规定范围内根据测定结果进行评价。分别取稀释蛋白含量为10、50、100 ng/ml浓度的供试品溶液各1份,按ELISA检测试剂盒检测步骤进行6次独立试验。用由浓度为10、50、100 ng/ml的标准品所检测得到的吸光度回归标准曲线得到的值进行回收率比较。

1.6.2 精密度 随机抽取2块包被后的板,取一批已知浓度110 μg/ml的rhNGF蛋白溶液,在规定范围内根据测定结果进行评价。分别取稀释蛋白含量为10、50、100 ng/ml浓度的供试品溶液各1份,按ELISA检测试剂盒检测步骤进行6次独立试验。计算每次测定结果,求出均值(x)、标准差(s)和相对标准偏差(RSD)。

1.6.3 检测敏感度 根据上述实验操作结果计算本试剂盒的检测敏感度。

2 结果

2.1 杂交瘤细胞株的建立

选取的5只小鼠经重组人神经生长因子连续3次免疫后,尾部取血测定每只小鼠血清效价。图1结果显示,5只免疫小鼠的血清效价有明显差异,其中2#小鼠的血清效价最高,选取其进行细胞融合试验。

图1 免疫的5只小鼠血清效价图

所选小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合处理后,采用间接ELISA法检测,选出阳性值较高的融合细胞;采用有限稀释法对阳性杂交瘤细胞进行克隆化,共获得13株杂交瘤细胞;采用体内诱生法大量制备单克隆抗体,将所得的13份纯化抗体进行筛选,最终获得高效稳定分泌抗hNGF单克隆抗体的杂交瘤细胞株6G3可用于检测试剂盒的建立,并对其进行低温保藏。

2.2 单克隆抗体性质检定

经鉴定细胞株6G3的IgG亚类为IgG1型,轻链为κ。对所获得单克隆抗体的亲和力结合动力学进行分析,结果见表1。结合速率常数Ka值为1.41×106/(M・s),提示抗体与抗原反应迅速;解离速率常数Kd值为2.48×10-4/s,提示抗原抗体复合物结合稳定;反应平衡常数为1.76×10-4 M,提示结合反应进行完全。

表1 Biacore检测抗hNGF单克隆抗体与rhNGF抗原的亲和力

将图2用Gel-Pro软件分析电泳条带的结果,经计算抗体纯度>90%,能够满足实验要求。对rhNGF和mNGF进行SDS-PAGE 电泳,电转印后,进行Western blot实验,结果见图3。

由于人的NGF与小鼠NGF之间同源性高达89.1%,并有资料证明人与小鼠NGF之间存在免疫交叉反应。由图3结果可见,在Western blot鉴定过程中也得到了相同的结果,Western blot检测结果显示与mNGF存在微弱交叉反应。

图2 抗hNGF单克隆抗体纯化后的SDS-PAGE电泳图谱

2.3 检测试剂盒的制备

根据实验,最终的检测条件是:样品稀释至标曲范围后加入25 μl/孔和酶标抗体75 μl/孔,37℃孵育30 min,洗板3~5次,显色剂A、B混合后100 μl/孔37℃避光显色5~10 min,加终止液50 μl/孔,450 nm波长下读取光吸收值。标准曲线绘制以标准品7.8125、15.6255、31.2500、62.5000、125.0000 ng/ml的浓度为横坐标,其对应的A450值为纵坐标,得到线性方程,其线性关系良好(r2=0.998)(图4),样品定量通过带入标准曲线方程计算得到。

图4 ELISA试剂盒检测重组人NGF的标准曲线图

2.4 检测试剂盒的验证

采用本试剂盒对3份样品进行检测,结果见表2。平均回收率为88.43%,在85%~105%之间;对10、50、100 ng/ml浓度的18次检测结果进行统计,x 分别为8.9252、44.2828、87.4650 ng/ml,s分别为0.3980、2.4547和4.0366,RSD分别为4.46%、5.54%和4.62%,精密度结果显示RSD≤10%,检测灵敏度为0.63 ng/ml。综合以上数据,试剂盒在方法学验证方面表现为回收率略低(

3 讨论

NGF作为神经系统重要的多肽因子,可以促进损伤或病变神经元的再生,是目前用于治疗神经损伤非常有效的一种药物,对NGF制剂的研制具有巨大的经济效益和社会效益。近年来,随着基因工程技术的日益提高,NGF的获得途径也从最早的动物组织提取发展到现在的真核细胞重组表达,在满足日益增长的临床药物需求的同时,新技术的发展也带来了一些新的问题,即在细胞大规模培养进行NGF表达及后期纯化过程中,为满足生产过程中的质量控制,亟需一种快速、稳定、精确的定量方法来监控生产中NGF含量的变化。

ELISA法是高通量筛选和定量检测生物技术药物常用的一种方法,其利用抗原抗体特异结合进行检测,分析灵敏度高,检测速度快。针对NGF含量的检测目前已有商业化的ELISA检测试剂盒提供,但在实际应用中因其检测过程耗时长、标曲线性范围窄、存在数据反馈不及时、检测结果误差大等问题,并不能很好地解决所面临的问题。

本研究对ELISA检测方法进行了重新开发,使用重组人神经生长因子蛋白抗原对动物免疫,通过细胞融合和筛选获得阳性杂交瘤克隆,通过该杂交瘤细胞制备得一株抗人神经生长因子的单克隆抗体,该单克隆抗体特异性强、敏感性高,可以在免疫组化、ELISA等多种方法中使用。由于重组人NGF的活性形式为同源二聚体,相同的抗原表位至少有2个,利用单株抗体分别包被酶标板并制备酶标抗体,最终组装成夹心ELISA试剂盒,所建立的ELISA检测试剂盒能够很好地解决上述问题。

按照国家对药品检测方法的相关要求,新开发的检测方法需要对其进行系统的方法学验证,因此本研究对组装试剂盒进行了相关方法学验证,验证数据显示,采用该试剂盒对样品中的rhNGF进行定量检测,不仅操作简单,而且具有线性好、灵敏度高和特异性强的特点,能够快速准确地计算出待测样品中rhNGF的含量。在实际应用中,通过本试剂盒检测能够真实地反应出发酵液和rhNGF纯化样品中rhNGF的存在水平,尽管Western blot显示该抗体与mNGF存在部分交叉反应,但是制成试剂盒后进行检测,与mNGF没有交叉反应。本试剂盒的建立为NGF大规模生产的质量控制提供了有力支持,能够为推动rhNGF的临床研究做出相应贡献。

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篇4

工商管理在经济发展中占有很高的地位,对经济的发展有着极大的影响,其职能主要有两个:(1)规范市场经济制度。市场经济主要受到内在规律的限制,但同时也要保证市场经济具有一定的规章制度,否则难以保证市场的健康发展。而且当前我国加入了世贸组织,在国际上的经济交流日益频繁,对我国的市场经济来说是一场冲击,在这样的大背景下,如果没有切实有效的法律法规,那么整个市场体系很容易遭到破坏。因此,政府在干涉市场经济的时候,应该着眼于宏观调控,对各个经济主体给予正确的引导,使经济主体不仅能够获得经济利益还可以促进经济发展。(2)管理市场经济。其管理职能主要体现在市场经济会不断地发展,新的情况或者问题也会随之出现,这样的情况下,工商管理就会做出相应的调整,采取措施保证市场经济的健康稳定进步。在我国市场经济的发展中,企业占有较高的地位,当企业迷茫的时候,工商管理部门要及时为其答疑解惑,保证市场经济的正常运行。另外,市场经济具有一定的规划性,对于市场中出现的不正当行为,工商管理有权利、义务和责任为市场经济的运行创造健康的竞争环境,促进各个经济主体之间的良性竞争,以消费者为评判员,促使各个经济主体加强自身实力,提高自身的竞争力。同时,工商管理部门有义务保护消费者的权利和利益不被侵害,可以通过向消费者宣传的方式,让消费者明白要通过法律手段来保护自己的权利和利益,让消费者了解如何保护,进而保护市场的健康稳定发展。我国工商管理的特点:(1)以公平为原则,具有非功利性。相比于其他部门,工商管理部门没有设立资金,体现了其非功利性;另外,工商管理部门最主要的职责就是为市场经济的发展保驾护航,提供强有力的保障。(2)监督手段丰富,监督范围广泛。要想进行有效的监督,相应的法律法规是不可或缺的,加强工商管理的法制建设,保证工商管理的顺利实施,才能够保证市场的发展;且工商管理的管理范围比较广泛,有形市场和无形市场都要接受工商市场的管理。(3)维护消费者和市场的关系。在进行工商管理工作的时候,要注重维护市场经济的秩序和消费者的权利和利益,加强经济主体的社会责任感,也是保护消费者权利和利益的有效措施。

2工商管理对市场经济的相关影响

2.1为市场经济的运行提供法律保障。一般情况下,市场经济都能够通过“看不见的手”进行自我调节,但是它并不是万能的,有时候需要外力的干涉来帮助市场调节,否则会造成难以估量的后果。工商管理部门就是在市场无法自我调节是对市场进行干涉的外力,工商管理部门依据国家相应的法律法规从宏观上来为市场的规范运行提供强有力的保障,对市场的发展起着引导作用,对市场上的不正当行为进行监督和管理,尤其是对于那些重度违规要给予严厉的打击。2.2深化各个经济主体的体制改革。我国大部分的经济主体都会跨越地区或者行业等界限,这是因为各个经济主体之间、不同行业之间需要进行资源的整合,使得经济主体的利益从其他利益之中独立分离开来,加强各个部门之间的联系沟通。如此一来,我国的许多大企业就不会再受到地区或者部门的限制,这种形式的经济主体就不再属于某一行政部门,政府机构不能够对这类经济主体进行干预。所以通过要工商管理部门,进而有效提高此类经济主体的自主性和工作效率,深化了各个经济主体的体制改革,促进市场经济的稳定发展。2.3提高了市场监督的水平。规范市场和经济主体行为是一件非常重要的事情,经济主体的经营要符合规则,工商管理主要要注意以下两个事项:(1)加强监督,一定要坚决反对并且清除市场中的垄断和非良性竞争,采取措施为市场的运行创造健康的环境;(2)企业要加强对于自身商标权的保护。企业的商标是一个企业的标志,对企业有着非常重要的意义,会影响到企业的生存和未来的发展,所以企业商标必须得到强有力的保障,同时这也有利于维持市场经济的秩序稳定。工商管理部门弥补了市场监督的不足,国家对于工商管理部门的责任和权利以及管理范围作出了明确的规定,所以工商管理部门在进行管理的时候,一定要严格按照国家的规定来进行,体现法律的权威性,通过法律手段来保护工商管理部门监督的权利,同时要依法给予违法行为相应的惩处,从而完善了市场的监督体系,弥补了市场监督中的漏洞。2.4工商管理有利于我国的可持续发展。工商管理能够促进我国市场经济的发展是毋庸置疑的。工商管理部门最主要的工作就是协调政府和法律部门与经济主体之间的关系,对经济主体进行有效的监督管理。随着社会经济的不断发展,为了能够更好的适应,工商管理部门要摒弃传统的管理理念,与时俱进,才能够促进我国经济的发展。同时,为了实现经济主体的稳定健康发展,管理者要提高自身觉悟,对工商管理给予足够的重视,工商管理工作的进行能够促进经济的发展,而经济发展能够有利于经济主体的发展。所以经济主体要完善自身的工商管理,保证其科学合理,进而促进经济主体的健康发展,有利于我国市场经济的稳定进步和健康发展。2.5加强了对于消费者权利和利益的保护。保护消费者的权利和利益也是工商管理部门的工作之一,在买卖中,消费者处于弱势,且消费者对企业产品满意与否关系到企业未来的发展,影响着市场经济的发展。对此,工商管理部门可以经常向消费者宣传相关法律知识,加强消费者的维权意识,使消费者懂得如何通过法律来保护自己的合法权利和利益,鼓励消费者投诉非法企业,如此一来,能够促进经济主体对于自身形象的维护,营造健康良好的市场氛围,促进经济主体发展的同时也为国家市场经济的发展做出了一定程度的贡献。

3结束语

综上所述,笔者通过分析工商管理的内涵和特点,对工商管理对于市场经济的影响的简要分析,以期能够加强经济主体对于工商管理的重视,为我国的市场经济尽些绵薄之力。随着我国综合国力的提高、经济社会的发展,工商管理对于我国的市场经济起着越来越重要的作用。当前,我国的社会主义市场经济体制还不够完善,还存在着一些问题有待研究和解决,工商管理部门作为政府性质的部门,其最主要作用就是为国家市场经济的发展提供强有力的保障,促进市场经济的平稳运行,保证其稳定健康的发展,完善社会主义经济体制。经济发展是进行工商管理的基础,也能够促进工商管理的发展,两者联系密不可分,相辅相成,只有做好工商管理工作,才能够促进经济的健康发展。

作者:陈秀梅 单位:福建省三明市尤溪县审计局

篇5

工商管理对企业有一定的引导作用,可以强化企业内部的管理,是企业能够健康的发展。企业的发展离不开工商管理的监督,在市场经济下,企业应该根据市场经济的需求结合自身实际的情况,对企业的发展做出正确的指引。

一、市场经济下工商管理的现状

1.缺乏工商管理人才

社会主义市场经济是我国在改革开放后实行的,主要是借鉴国外的市场经营模式并结合我国实际情况而形成的经济环境。市场经济主要是以人民的消费为基础的,与以前的计划经济有很大不同,市场经济主要是根据现代中国的具体实际情况应运而生的,是适应现代化经济而存在的。

在社会主义市场经济下,我国需要大量的工商管理人才,尤其是一些中高级的管理人才。但是由于我国的市场经济发展的时间较短,工商管理行业发展的还不是很成熟,导致急缺这方面的人才。随着经济的迅速发展,要求国家应该培养专业化水平高的人才,还要了解国际贸易、金融方面的知识。就当前多元化的经济而言,缺乏工商管理人才是市场经济下工商管理行业急需解决的问题。

2.工商管理体制不健全

就目前我国的工商管理情况来看,工商管理体制还不够健全。工商管理体制一般是由人来划分的,各个部门之间都是相互独立存在的、各有各的职责,这导致工商管理的能力比较分散,不利于集中管理。工商管理具有一定的区域性,不同的区域对当地的一些工商企业会有一定的保护,这给各区域之间的联系带来了一定的阻碍,影响了市场经济的整体发展。

工商管理的监督部门没有起到一定的监督作用。工商管理部门在市场经济中起到一定的宏观调控的作用,但是有些工商管理部门在体制上不健全,使工商管理职能只留于形式,没能够充分发挥其职能。

3.工商管理部门执法力度不够

在市场经济的大环境下,存在复杂的社会关系。工商管理部门在市场经济中起到一定的监督作用,作为市场经济的监督部门,起到促进经济发展的作用。但是一些工商管理部门的工作人员,不能够很好的利用自己的权利,没能严格执法,在管理中执法水平有待提高。

二、市场经济下工商管理的策略

1.建立健全工商管理机制

市场经济对工商管理的要求有很多。首先,工商管理部门应该从自身做起,要充分发挥企业到工商部门登记的职能,在企业进行登记的时候要严格把关。对于一些不符合工商管理部门的企业,不予以办理登记工作,对每一个环节都要仔细盘查。对于市场经济中不同企业的发展情况,工商管理部门应该发挥自身的职能优势,建立健全工商管理机制,完善其他宏观调控机制。及时的掌握各行各业的发展以及存在的问题,防止企业在发展的过程中比例失调的问题。起到监督促进产业结构的优化升级,促进经济又好又快的发展。还要使工商管理内部各个部门之间要学会相互联系,交流经验增强管理工作的协调性,不断提高工商管理部门的工作效率,使人民群众能够切实感受到经济发展带来的好处。

2.遵循工商管理的规章制度

在经济蓬勃发展的今天,陈旧的工商管理制度已不能适应当前的市场经济。不能够解决市场经济中遇到的问题,这就要求工商管理部门要不断更新管理方法与时俱进,严格遵守工商管理的规章制度。在管理的过程中,要以企业的发展为为管理的前提,企业的发展是为了能够更好的服务于人民。在管理中要做到具体问题具体分析,学会用科学的手段去管理,促进经济又好又快的发展。

3.加强工商管理的职能

在对企业进行管理的时候,工商管理部门应该依法行使自己的权利。为了避免企业中存在一些违法行为,工商管理部门应该加强监督力度。在监督的过程中,管理部门应该在不同企业中进行相应的法律宣传工作,使企业能够有法律的意识,可以依法办事。在发生问题的时候,能够勇于承担责任而不是逃避,让相关的人员有权责意识。

中国特色社会主义市场经济的发展,需要工商管理部门的引导。市场经济的不断发展,对管理部门的要求也随之提高,工商管理部门应该好好利用职权,与时俱进不同提高管理水平,促进社会主义市场经济水平不断提高。

三、结论

综上所述,为了使市场经济下工商管理的工作能够顺利的进行,需要工商管理部门对企业进行一定的引导,让企业能够遵守工商管理的规章制度,运用工商管理的监督职能,促进市场经济健康的发展,不断提高经济水平。

参考文献:

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