发布时间：2023-09-24 15:39:12
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1 古树名木保护概况
古树名木，即树龄在百年以上的大树即为古树；而那些树种稀有、名贵或具有历史价值、纪念意义的树木则可称为名木。随着岁月的流逝和时间的积累，在城市园林绿化中涌现出一批又一批的古树名木，这些古树名木树龄少则100多年，多则三四百年甚至更远久，古树名木作为一种珍贵的自然资源，必须受到特殊的保护。
现今古树名木主要包括以下保护措施：
1.1 保护树皮
不能在树体上钉钉、缠绕铁丝、绳索、悬挂杂物或作为施工支撑点和固定物，不能刻划树皮和攀折树枝，发现伤疤和树洞及时修补。对腐烂部位按外科方法进行处理。
1.2 加设围栏
一级古树名木及生长在公园绿地或人流密度较大、易受毁坏的2、3级古树名木设置围栏保护。
（1）根据具体情况每年给古树名木做生长情况调查并做好记录。（2）修剪古树名木的枯死枝、梢。（3）古树名木树体不稳或粗枝腐朽且严重下垂，均需进行支撑加固。（4）对于高大的古树名木设置了避雷设施。
在古树名木的众多保护措施当中，其中一项对于古树名木本身和路人都非常重要，那就是古树名木的支撑保护，树龄一百或几百年以上的古树，在现代化城市绿化的建设下，地下部分不免会受到一定的影响，加上地上部分某些枝条木质化严重，承受不了本身的重量或台风的打击，容易折断，这不但对古树名木本身造成损坏，而且对路人的人生安全也构成一定的威胁。故城市园林绿化中就产生了对古树名木的各种支撑方法。
2 古树名木支撑方法
在这里笔者按支撑材质的不同把各种支撑方法分为两种，分别是硬支撑和软支撑。接下来分别介绍一下以上2种支撑方法。在现代古树名木的支撑方法中最常见的就是硬支撑。硬支撑主要指的是支撑材料使用钢丝、木杆、铁管或仿真树干等的支撑方法。这种硬支撑方法现在随处可见，也是业界普遍采用的方法，而且为确保支撑效果和保护枝干，采取了很多技术措施，如用有弹性的橡胶垫作垫层，还有用铁箍或螺纹把枝条包起来并随着树体生长定期松扣等，但这种方法相对于软支撑来说方便，但存在着很多问题，需要定期检查麻烦不算，因营养回流受阻支撑部位的枝条总是比别处长得细，出现凹陷成为风折的致命部位，而且景观效果一般比较差。
由于植物是一生命体，具有一定的自我再生能力，因此软支撑的方法应运而生。与硬支撑相对，软支撑方法主要是指使用的材料为与需支撑的古树品种相同或相近的树龄较年轻的植物体。这种软支撑方法也有人称为树木活体支撑。这种方法主要是把古树需要支撑的枝条下部与支撑活体树木的受力点处的皮层拨开，通过靠节技术结合在一起来实现。笔者曾经在中国花卉报上看到一成功例子。北京植物园的某棵古槐，树冠有25m，其中有一个平伸的大枝足有14m长，该植物园的研究人员在这个大枝下安放了一棵胸径约8cm的国槐，树冠经修剪后只剩下三个分杈，其中两个主杈恰好形成一个支撑架托起古槐的大枝。但事实上这古槐不是简单地压在小国槐上，而是在古槐大枝下部与小国槐支撑枝的受力点上，将两株树该部位的皮层拨开通过靠接技术接合在一起，而且成功成果了，这跟嫁接的道理比较相同。这种方法不仅解决了树体支撑的物理问题，同时通过年轻树体输送的营养让古树生长得更健壮，景观效果也比硬支撑显得更加自然。
3 总结与分析
但是软支撑方法在技术上还存在着很多不完善，譬如接合部位的选择以及接口的处理，而且落叶树的靠接比较容易，比较难的是常绿针叶树，不容易成活。虽然这种软支撑技术在实际应用当中还甚不完善，但相信经过研究人员的研究在将来的城市园林绿化中会得到更广泛的使用。
参考文献
1 常智珍.古树名木养护与复壮技术[J]. 山西林业，2008（4）
[摘要] 目的 探讨筋膜外植法在鼓室成形术中的应用及价值。方法 回顾性分析2011年9月—2013年12月，在该院五官科接受筋膜外植法鼓室成形术治疗62耳的临床资料，对患者进行随访调查，观察患者的外耳道宽敞度、鼓膜的形态以及听力的恢复情况等。结果 该研究中62耳包括中耳胆脂瘤23耳，慢性化脓性中耳炎39耳。术后均在Ⅰ期愈合。经随访调查，所有患者的外耳道均宽敞，鼓膜的形态良好，未见听力下降者，同时未见任何并发症情况。 结论 筋膜外植法鼓室成形术的治疗效果显著，具有操作流程规范、术中视野暴露充分、病变清除干净彻底等优点，可以作为治疗慢性中耳炎的首选术式。
关键词 筋膜外植法；鼓室成形术；中耳炎
[中图分类号] R764.7 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742（2014）09（c）－0121-02
鼓室成形术是近年来治疗耳科疾病的常用方法，该术式科依据鼓膜移植物与残余鼓膜的关系，将鼓室成形术分为筋膜外植法和筋膜内植法[1]。临床治疗慢性化脓性中耳炎和中耳胆脂瘤疾病时，通常采用筋膜外植法鼓室成形术，必要时可加做开放式乳突根治术[2]。该研究回顾性分析该院2011年9月—2013年12月期间收治的五官科接受筋膜外植法鼓室成形术治疗62耳的临床资料，探究该术式的手术方法及临床价值，现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
该研究选取在该院五官科接受筋膜外植法鼓室成形术治疗的53例患者（62耳），男性患者29例，女性患者24例；年龄21～65岁，平均年龄（42.3±2.9）岁；病程3个月~35年，平均病程（12.6±3.5）年；左侧病变32耳，右侧病变30耳；其中双耳患病为9例，单耳患病为44例。患者入院后，均详细询问患者的病史，并进行详细的耳部检查和相关辅助检查，例如纯音测听、CT扫描等。
1.2 方法
筋膜外植法鼓室成形术的类型有3种：筋膜外植法鼓室成形术、筋膜外植法鼓室成形术辅以完璧式乳突根治术以及筋膜外植法鼓 室成形术辅以开放式乳突根治术，这3种统称为筋膜外植法鼓室成形术。
筋膜外植法鼓室成形术主要有以下八个步骤组成：①耳道内行骨耳道皮瓣：采用镰刀状刀沿着骨鼓乳缝合鼓鳞缝行两个纵形切口，同时使用柳叶刀在近鼓环附近1～2 mm处横行低位于外耳道的后方连接处行纵切口，在近外耳道骨-软骨交界处及外耳道前方高位连接处行宗切口。②行耳后切口并取颞筋膜：在耳后行C型切口直至筋膜层，取面积为2 cm×2 cm的颞筋膜备用，然后掀开门型肌骨膜瓣，向前撑开耳廓和耳道后壁的皮瓣，将外耳道充分暴露。③切除外耳道皮肤：将外耳道的前壁皮肤游离并取下，放置在生理盐水中备用，在分离皮肤时一定要尽量将残留的鼓膜上皮层同时取下[3]。④扩大骨性外耳道：采用电钻将外耳道前下壁骨性隆起磨除，扩大骨性外耳道。⑤残余鼓膜去上皮化：在第3步中已将大部分的鼓膜上皮去除，此时要尤其注意清理鼓环外侧1 mm的外耳道前下骨壁，防止残留上皮形成囊肿，同时要去除锤骨柄上的残余鼓膜，在行鼓膜上去皮化时如果发现鼓膜出现钙化或局部萎缩，要将相应的部位去除，只剩下鼓环也不会对筋膜铺放造成影响。所有患者经颞骨CT扫描，分别进行水平位扫描和冠状位扫描，CT机为我国迈瑞公司生产的BC-3 600 CT。待完成去上皮化后，一定要探查并清除中耳病变，依据患者病情、CT检查结果、术中所见患者的病变范围及病变程度，判断是否采用开放乳突腔，同时依据实际需求，放置人工听小骨。⑥筋膜铺放：将在第一步中备用的颞筋膜经脱水后修剪成1.3 cm×1.5 cm的椭圆形，为了利于筋膜骑跨于锤骨柄的下方，可在筋膜上剪一个小口，切口的前端可与鼓膜张肌腱接触。颞筋膜向下铺开时，尽量不要与骨壁有过多的接触，接触最多不能超过1 mm，颞筋膜切口处的前缘覆盖于裸露的锤骨柄上，保持较好的鼓膜外观。如果患者的锤骨柄缺失，为了加固筋膜，可将筋膜剪开两个小口，在中间形成小片附着于上鼓室外侧壁后方，筋膜的后上缘可向前覆盖，重叠在筋膜前缘并封闭中耳腔。如果手术一期完成，可在鼓室内衬以0.13 mm的薄硅胶膜，以防止鼓膜粘连，同时有利于鼓室内的黏膜修复[4]。⑦修复外耳道前壁皮肤：将取下的外耳道前壁皮肤修复后重新放置在原骨面处，可稍微重叠与筋膜1 mm，能够有效提升上皮化的速度，同时能够防止局部瘢痕和钝角的形成，同时采用可吸收的止血明胶海绵进行固定。⑧修复皮瓣并缝合切口：修复外耳道后壁皮瓣，经耳道内调整回原位，耳道内可填充浸入抗生素溶液的明胶海绵，在耳道口留置消毒棉球，将耳道切口进行分层缝合，最外层可采用可吸收线进行皮内缝合，增加美观性，然后行常规加压包扎。
地塞米松磷酸钠的氧氟沙星滴耳液的制备：氧氟沙星3.0 g（浙江新昌制药有限公司），地塞米松磷酸钠0.5 g（天津药业有限公司），氯化钠8.3 g（天津开发区海光化学制药厂），新洁尔灭0.5 g，醋酸（1 mol/L），氢氧化钠适量，注射用水加至10 000 mL，无菌分装即得。患者在术后需要给予静脉滴注抗生素治疗5 d，术后2 d可拆除包扎，术后7 d可给予含有0.05%地塞米松磷酸钠的氧氟沙星滴耳液，2滴/d，2次/d，连续使用6周。完成手术后对患者实施家庭回访，对患者疾病恢复情况进行调查。手术患者听力检测采用纯音测听，采用电子纯音电子听力计施加不同频率纯音，检测患者耳听阈值。
1.3 统计方法
利用spss15.0统计学软件对该研究数据进行分析与统计，计数资料采用χ2检验。
2 结果
2.1 病变类型
该研究中62耳经CT扫描和术中检查可见，中耳胆脂瘤23耳（37.1%），慢性化脓性中耳炎39耳（62.9%）。经听力学检查可见，传导性聋38耳（61.2%），混合性聋20耳（32.3%），全聋4耳（6.5%）。
依据术前的CT检查及术中观察，所有患者均存在鼓室和乳突内病变的情况，因此术中痛过外耳道入路和乳突入路去除病变，并依据患者病情进行听力重建，见表1。
2.2 术后随访
该研究中的62例患者均全部回访，回访时间在术后的6个月—2年。所有患者均在术后Ⅰ期愈合，个别患者的耳道内明胶海绵排空过快，因此又重新填塞明胶海绵。经随访调查，所有患者的外耳道均宽敞，鼓膜的形态良好，未见听力下降者，同时未见任何并发症情况。
3 讨论
临床治疗慢性化脓性中耳炎的目的是去除中耳病变，同时尽量为患者重建听力功能。采用筋膜外植法或者筋膜内植法鼓室成形术都有各自的优缺点，因此，术式的选择要依据患者病情、CT诊断结果、术式的适应症、术者自身的专业技能能力等。
该研究中采用筋膜外植法鼓室成形术，该种手术治疗方法的优点为：①能够清楚的探查外耳道、鼓膜及鼓室内病变，在麻醉的情况能够彻底的将外耳道和鼓膜表面的病变去除，这样就有效的避免了患者需要先行耳后及耳内切口[5]。②手术视野的充分暴露，由于磨除了外耳道前下悬骨，从而扩大了外耳道和手术视野，使前下鼓沟能够充分暴露，可清晰的观察鼓沟至鼓室腔的全部结构，而不需要不断的移动显微镜。③能够不受限制的切除残余鼓膜，完全去除穿孔边缘的鳞状上皮及钙化和局部萎缩的病变部位。④筋膜移植物的存活率较高，而且筋膜外植法能够降低并发症的发生率[6]。⑤移植物放置于鼓膜的外侧，能够充分保留鼓室内空间。⑥由于该术式能够在显微镜下充分暴露并清除鼓室及乳突内的病变，尤其是前上鼓室病变，因此，能够充分的探查听骨链、前庭窗、蜗窗及后鼓室，依据探查的结果可判断是否行乳突根治术，保留了正常的解剖结构[7-8]。⑦该术式的适应症广泛，可用于外耳道狭窄及需要再次手术的患者。诸多因素都会对鼓室成形术的成败造成影响，因此将视野进行充分暴露、对操作进行明确规范，最终才能够有效将病灶清除，达到功能重建的目的。完璧式鼓室成形术虽然可使外耳道和中耳接近正常审理结构，但是多适用于病灶较轻或是鼓窦的患者，对于病灶区域较严重的患者对听神经损伤较大，并且容易产生并发症。
在进行进行该研究过程中，62耳经CT扫描和术中检查可见，中耳胆脂瘤23耳（37.1%），慢性化脓性中耳炎39耳（62.9%）。经听力学检查可见，传导性聋38耳（61.2%），混合性聋20耳（32.3%），全聋4耳（6.5%）。前对患者实施CT检查，在手术过程中对患者进行密切观察，患者均出现了鼓室和乳突内病变的情况，所以术中通过外耳道入路和乳突入路去除病变，并依据患者病情进行听力重建。所有患者完成手术后，对其进行家庭回访发现，所有患者均在手术后Ⅰ期愈合，个别患者的耳道内明胶海绵排空过快，因此又重新填塞明胶海绵。经随访调查，所有患者的外耳道均宽敞，鼓膜的形态良好，未见听力下降者，同时未见任何并发症情况。
综上所述，筋膜外植法鼓室成形术是治疗化脓性中耳炎病变的有效方法，该术式能够最大限度饿暴露外耳道和中耳腔，从而能够保障术者能够彻底的去除病变，具有极高的移植物存活率，严格的手术操作过程能够降低并发症的发生，值得临床推广和应用。
参考文献
[1] 王灿，李培华．开放式鼓室成形术治疗胆脂瘤型中耳炎21例临床观察[J]．河北医学，2013，19（1）：82-84．
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[3] 王宏伟，李旭青，潘明金，等．改良完壁式乳突切除术联合鼓室成形术在慢性中耳乳突炎患者中的应用[J]．海南医学，2013，24（24）：3709-3710．
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【Abstract】 AIM: To study the effect on osteoblastic differentiation and proliferation of bone marrow stromal cells in vitro by administration of simvastatin in vivo and to elucidate the mechanism of the anabolic osteogenetic effect of simvastatin. METHODS: Thirty 3monthold virgin female SD rats， weighting 250-300 g were randomly pided into 3 groups: Group 1， control， 10 rats; Group 2， given simvastatin 10 mg/(kg・d)， 10 rats; Group 3， given simvastatin 20 mg/(kg・d)， 10 rats. All of the animals were given the agents through gastric tube for 28 d. At 29th day all the rats were sacrificed. Bone marrow stromal cells in femur and tibia were cultured in vitro. After treated with same condition for 14 d ALP activity of bone marrow stromal cells in supernatant was determined. The mRNA level of cbfa1 was detected by RTPCR， and cbfa1 protein expression was analyzed by Western blot. Cell count kit (CCK8) was used to examine the cell proliferation. RESULTS: After the rats were administrated with differentdose simvastatin in vivo for 28 d， and then the bone marrow stromal cells were cultured for 14 d in vitro， the level of cbfa1 mRNA was increased， and the expression of cbfa1 protein also increased in a dosedependent manner， and supernatant ALP activity increased in a dosedependent manner. Ttest showed that the proliferation of bone marrow stromal cells in Group 2 had significant difference， but no significant difference in Group 3， when compared with control group. CONCLUSION: Simvastatin leads to the high expression of cbfa1 in bone marrow stromal cells and increased ALP activity， which may be parts of the mechanisms underlying the anabolic osteogenetic effect of simvastatin.
【Keywords】 Simvastatin; bone marrow stromal cell; osteoporosis; osteoblast; cbfa1
【摘要】 目的：研究辛伐他汀体内给药后对大鼠骨髓基质细胞在体外培养过程中成骨分化和增殖的影响，探讨其刺激成骨的作用机制. 方法：30只SD雌性大鼠，随机分为3组，每组10只. G1组（C）为对照组；G2组（SIM10）给予辛伐他汀10 mg/(kg・d)；G3组（SIM20）给予辛伐他汀20 mg/(kg・d). 连续给药28 d后，取大鼠的骨髓细胞体外培养，诱导14 d后用RTPCR和Western blot分别检测cbfa1 mRNA和蛋白表达的变化；收集上清液，检测细胞碱性磷酸酶；应用cell counting kit(CCK8) 测定细胞增殖情况. 结果：辛伐他汀体内干扰28 d后，再经过骨髓细胞体外培养诱导14 d后，cbfa1因子的mRNA及蛋白表达水平均增高，呈剂量依赖关系. 上清液碱性磷酸酶表达增高，呈剂量依赖关系. 实验组与对照组比较，G2组（10 mg）组促进细胞增殖，而G3组（20 mg组）未见显著性差异. 结论： 辛伐他汀可促进骨髓基质细胞中cbfa1 mRNA和蛋白的表达，碱性磷酸酶活性增高，辛伐他汀刺激成骨的作用机制可能与此有关.
【关键词】 辛伐他汀； 骨髓基质细胞； 骨质疏松； 成骨细胞； 核心结合因子
0引言
他汀类药物是竞争性3羟基3甲基戊二酰辅酶A（HMGCoA）还原酶抑制剂，能够降低肝内胆固醇的生物合成. 是近20 a来发展起来的一类新型调脂药，目前广泛用于治疗高胆固醇血症. 1999年Mundy等［1］经过动物实验筛选了30 000多种天然或人工化合物后发现，他汀类药物可引起成骨细胞系的骨形成蛋白2（BMP2）的高表达，并能有效地刺激骨形成. 继Mundy之后，同样的发现，通过灌胃法口服给药（辛伐他汀），正常及去势大鼠［2］ 皆可见小梁骨量增加. 并伴随成骨作用有破骨细胞数量的减少. 在临床的回顾性研究中也发现，服用他汀类药物可以增加血清中骨钙素（osteocalcin，OCN）的水平［3］. 并降低股骨颈骨折的发病率［4-5］. 但具体作用机制尚不清楚，辛伐他汀对骨髓基质细胞向成骨细胞分化的作用如何，目前国内外少见报道. 本研究采用体内给药然后体外对骨髓基质细胞培养诱导的方法，旨在观察辛伐他汀对骨髓基质细胞（BMSc）成骨分化的影响，以探讨其促进骨形成，治疗骨质疏松的机制.
1材料和方法
1.1材料
1.1.1动物30只3 mo龄雌性SD大鼠（郑州实验动物养殖中心提供. 动物合格证号为医动字第410117号）平均体质量250~300 g. 所有受试大鼠均置于动物房中饲养1 wk，以适应环境. 然后随机分为3组，每组10只. G1组（C）为对照组， G2组（SIM10）给予辛伐他汀10 mg/(kg・d)， G3组（SIM20）给予辛伐他汀20 mg/(kg・d).
1.1.2材料DMEM培养基（Sigma）， β甘油磷酸钠(Sigma)，维生素C(Sigma)，辛伐他汀（商品名：西之达，国药准字H20000007）浙江瑞邦药业有限公司生产，碱性磷酸酶检测试剂盒(南京建成生物制品有限公司)， CCK8(日本协和化学研究所)，Trizol(Invitrogen)， MMLV逆转录试剂盒(BBI公司)， Taq DNA聚合酶(BBI公司)， 引物由北京华美生物工程公司合成.. 兔抗 cbfa1抗体，辣根酶标记的山羊抗兔Ⅱ抗，ECL发光试剂盒均购自美国SantaCruze公司.
1.2方法
1.2.1给药方法各亚组动物分笼，标准固体饲料和自由饮水摄食喂养，光照12 h，黑暗12 h，室温为（25±2）℃左右. 各实验组动物于手术后次日通过灌胃给药，对照组给予安慰剂灌胃. 连续灌胃给药28 d后处死所有动物.
1.2.2骨髓基质细胞的体外培养无菌条件下，处死的大鼠即刻取双后肢股骨和胫骨，将其附着肌肉和结缔组织分离干净. 用DMEM培养液（青霉素100 u/mL，链霉素100 μg/mL，100 mL/L胎牛血清，维生素C 50 μg/mL，β甘油磷酸钠10 mmol/L）反复冲洗骨髓腔，收集细胞于离心管中，1000 r/min离心10 min，弃上清，细胞重悬后反复吹打成单细胞悬液，细胞计数板计数，接种于培养瓶中，50 mL/L（体积分数）二氧化碳，37℃温箱中培养. 24 h后换液，以后，每2~3 d更换培养液，弃掉未贴壁的悬浮细胞. 至细胞融汇成致密单层后进行传代，细胞计数后接种于培养瓶和培养板中.
1.2.3RTPCR骨髓基质细胞在体外培养诱导14 d后，采用Trizol一步法提取细胞总RNA，RNA定量后反转录合成第一链后进行PCR， PCR反应体系: 总体积25 μL，包括：10×PCR buffer 2.5 μL， 25 mmol/L MgCl2 5 μL， 2.5 mmol/L dNTP 0.5 μL， 引物(25 μmol/L)各1 μL， Taq酶0.25 μL (5 U/μL)，cDNA模板2.5μL. PCR引物的序列: Cbfa1(扩增产物为 240 bp)上游引物： 5′CCCAACTTCCTGTGCTCC3′，下游引物：5′AGTGAAACTCTTGCCTCGTC3′)；GAPDH(扩增产物为288 bp)的上游引物: 5′TGCTGAGTATGTCGTGGAG3′ ，下游引物: 5′GTCTTCTGAGTGGCAGTGAT3′. PCR反应条件：cbfa1为95℃ 5 min； 94℃ 30 s； 55℃ 45 s； 72℃ 50 s； 35个循环；72℃ 10 min. GAPDH为95℃ 4 min；94℃ 30 s；54℃ 40 s； 72℃ 35 s；30个循环；72℃ 10 min. 循环结束后取扩增产物5 μL于20 g/L的琼脂糖凝胶电泳，电泳后再经溴化乙碇染色，最后将凝胶置于凝胶成像分析系统中扫描检测各条带的光密度值并求出与内参照物GAPDH的光密度比值.
1.2.4Western blot5 cm×5 cm培养瓶内细胞在经过诱导培养基诱导14 d后，细胞刮刀收集细胞. 细胞浆核蛋白抽提缓冲液［5］〔A：10 mmol/l HepesNaoH(pH 7.8)， 15 mmol/L KCl， 1 mmol/L MgCl2， 0.1 mmol/L EDTA， 1 mmol/L DTT， 1 mmol/L PMSF， 1 μg/mL Leupeptin. B: 20 mmol/L HepesNaoH(pH 7.9)， 1.5 mmol/L MgCl2， 0.42 mol/L NaCl， 0.2 mmol/l EDTA， 250 mL/L(体积分数)甘油， 0.5 mmol/L DTT，
0.5 mmol/L PMSF，
1 μg/mL Leupeptin. PMSF使用时临时加入. 〕顺序抽提提取核蛋白. 考马斯亮蓝G250蛋白定量，取相同蛋白量的样品，以排除细胞量的差别，SDSPAGE电泳，转膜，封闭液（50 g/L脱脂奶粉TBS+1 mL/L Tween20）封闭过夜，1∶200（体积比）稀释的兔抗Cbfa1多克隆抗体第一次杂交，室温温育2 h后，TBST洗膜3次以上，每次不少于5 min. 然后辣根酶标记的羊抗兔Ⅱ抗第二次杂交，室温温育1.5 h即可，洗膜后ECL发光试剂盒发光，显影，定影. 密度扫描仪定量分析.
1.2.5ALP（碱性磷酸酶） 活性的检测细胞培养14 d后，取培养液上清，ALP检测试剂盒检测碱性磷酸酶活性，单位为nkat/L.
1.2.6细胞增殖的测定将消化所得细胞以2×104/mL密度接种于96孔培养板，每组50孔，每孔培养基总量为100 μL，次日起每天选择各10孔细胞，连续测5 d，每孔加入CCK8溶液10 μL，37 ℃孵育4 h停止，在酶联免疫检测仪上测定每孔的光密度值（波长450 nm，参比波长655 nm），以时间为横轴，A值为纵轴绘制细胞生长曲线.
统计学处理： 实验数据以x±s表示，采用SPSS 10.0统计软件包进行分析. 不同给药剂量的实验组与对照组进行方差分析及Dunnettt检验，P＜0.05，具有统计学意义.
2结果
2.1倒置相差显微镜下细胞形态观测骨髓细胞接种后6~8 h，骨髓基质细胞（BMS）开始贴壁. 随培养时间延长，未贴壁的悬浮细胞死亡或随细胞液丢弃. 培养瓶中只有贴壁的骨髓基质细胞，骨髓基质细胞呈典型梭形或多角形的成纤维细胞. 培养约5~6 d后，细胞融汇至0.8左右.
2.2RTPCR骨髓基质细胞在辛伐他汀给药组中cbfa1的mRNA水平较对照组升高，G3组（20 mg组）水平更高（P
2.3Western blot结果显示辛伐他汀给药组G2 和G3组较对照组核蛋白cbfa1表达增高，而G3组（20 mg组）表达更高(P
2.4上清液ALP活性辛伐他汀给药组ALP活性高于对照组. G3组（20 mg组）增加更显著(P
2.5细胞增殖与对照组比较，辛伐他汀给药组中，G2组（10 mg组）与对照组比较有统计学差异（P0.05， 图4).
3讨论
通过本实验我们发现辛伐他汀促进大鼠成骨细胞相关因子ALP及cbfa1基因的表达，从而促进骨髓基质细胞的成骨分化，10 mg组有促进成骨细胞增殖的作用.
骨髓基质细胞作为一种多能干细胞，在特定条件下不仅可分化为成骨细胞，还可分化为脂肪细胞，成软骨细胞，甚至神经细胞等［7］. 而在骨组织工程学和骨质疏松治疗学方面，如何能有效的刺激BMSc定向诱导分化为成骨细胞，具有重要的理论和应用价值. ALP是成骨细胞的特异表型，ALP的活性在一定程度上反映成骨细胞分化程度和功能状态. 其活性越高，说明前成骨细胞向成熟成骨细胞分化越明显. 宋纯理等［8-9］发现在辛伐他汀对骨髓基质细胞体外培养干扰过程中，ALP活性明显增高，BMP2高表达并呈现剂量依赖关系OCN，骨桥蛋白（osteopontin，OPN）表达水平增高，呈现剂量依赖关系. 本研究结果与其一致，提示辛伐他汀有促进骨髓基质细胞向更多成骨细胞分化的潜质，并且可能具有刺激分化成熟的成骨细胞的成骨功能.
新近研究表明，核结合因子a1 即cbfa1转录因子是调节成骨细胞生成的关键因子，属于Runt结构域家族，因此又称Runx2（Runt related gene 2）. Cbfa1是成骨细胞分化早期的标志物，它可调节OCN基因表达. Ducy等［10］在小鼠和大鼠骨钙素基因启动子区发现了与cbfa1的Runt结构域特异性结合的连接基序，即成骨细胞特异性作用元件2（OSE2）. 随后又发现在Ⅰ型胶原（COI1）， OPN，骨结蛋白（ON）等成骨细胞标志基因中也存在这种启动子元件，cbfa1通过调节这些基因在成骨细胞的表达，来促进成骨细胞的分化和成熟. 当非成骨细胞异位表达cbfa1时，可使这些细胞表达骨钙素，而缺乏cbfa1基因的小鼠骨组织仅有软骨细胞和软骨，而无骨形成［11］. 人类常染色体显性遗传病锁骨颅骨发育不良综合症就是由cbfa1一个等位基因突变引起［12］. OPG（osteoprotegerin）是由成骨细胞分泌的破骨细胞分化和功能的抑制因子，其在体外培养细胞中的表达也同cbfa1密切相关［13］. 本实验中可见到辛伐他汀促进了cbfa1因子mRNA和蛋白的表达，说明辛伐他汀可通过提高cbfa1因子的表达来促进BMS分化为成骨细胞，从而使成骨细胞表达增强.
Cbfa1表达也受许多生长因子，激素以及转录因子的影响，Viereck等［14］报道cbfa1为成骨细胞分化成熟过程中BMP2， TGFβ和地塞米松的靶基因. 其中BMP是促进成骨细胞分化有效的细胞外因子，这类因子可通过Smads信号途径诱导cbfa1表达，并可能通过调节cbfa1Osx和其他转录因子来影响成骨细胞分化［15］. 他汀类药物进入体内后以前体药物的形式对蛋白酶体有抑制作用，进而抑制了BMP的下游信号调节蛋白Smad的降解，使BMP的含量增加. 但其明确，具体的作用靶点和途径机制有待进一步研究和证实.
目前已知与增殖激活有关的基因有cmyc， cfos， cjun， 与细胞周期有关的基因有组蛋白，细胞周期素基因. H4组蛋白的基因表达伴随细胞内DNA的合成，与增殖密切相关. 本实验中10 mg组促进细胞增殖，而20 mg组与对照组比较未见显著性差异. 辛伐他汀对增殖作用的机制是与激活相关基因有关还是与细胞周期基因有关，是否存在双向作用机制，即在较低剂量时促进成骨细胞增殖，而在较高剂量时抑制成骨细胞增殖尚待进一步研究证实.
目前，辛伐他汀已成为治疗骨质疏松的新型药物，对其成骨作用做了大量研究，但其临床应用尚待进一步证实，同样也有报道［16］，辛伐他汀可促进小鼠骨折愈合. 对骨折愈合的相关因子表达和具体作用机制未见其他报道. 因此，通过体内外实验探讨辛伐他汀对成骨作用的机制，为他汀类药物用于临床骨质疏松和骨折愈合治疗提供依据，将更有意义.
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近年来，随着经济的快速增长和城镇化水平的快速提高，我国的文化建设和发展水平也快速提高。从文化资源、文化服务、文化产业、文化创新、文化消费和文化政策六个方面，构建区域城镇文化建设和发展评价指标体系(RUCI)，包含6个一级指标、14个二级指标、36个三级指标;运用2012年数据，对我国31个省份的城镇文化建设和发展总指数以及各分类指数进行评分和排名，结果表明，在各个省份之间以及在一些省份内部，文化建设和发展水平都存在较大的非均等性。因此，文化建设和发展的均等化应当成为区域经济一体化的重要方面。
关键词:
城镇文化建设和发展指数;文化发展水平评价;文化资源;文化服务;文化产业;文化创新;文化消费;文化政策;城镇化
一、引言
我国城镇化水平在过去30多年里大幅提升，2014年城镇人口占总人口比重已经由2000年的35%上升为54．8%。随着大量乡村人口进入城镇，居民在物质生活水平不断提升的同时，对文化、教育等人类精神层面的需求也开始快速增长。经济、社会和文化的统筹发展成为目前政府工作的重要方面。党的十八届五中全会提出要统筹推进经济建设、政治建设、文化建设、社会建设、生态文明建设和党的建设，实现全面建成小康社会的目标。然而在我国城镇化发展过程中，长期以来过分强调经济增长，忽视城镇化的文化内涵，大拆大建，不注重保留城镇文化特色，从而造成“千城一面”等问题。《国家新型城镇化规划(2014—2020年)》指出，新型城镇化应以人为本，重视传承历史和生态文明建设，由过去片面追求城市规模扩大、空间扩张，向以提升城市文化公共服务等内涵为中心转变，使城镇真正成为具有较高品质的宜居之所。城镇化过程中存在的忽视文化内涵建设问题，与地方政府长期以来以GDP绩效为主要考核指标，缺乏有关文化建设和发展的考核指标有关。因此，目前亟须建立一套综合评价区域城镇文化建设与发展状况的指标考核体系。20世纪90年代我国学者开始针对文化建设指标进行研究，“文化指标”成为文化建设和发展尤其是文化产业研究的重要内容，并取得包括制度设计、数据统计、标准制定等一系列研究成果，涉及宏观、中观、微观等各个层面。2011年以来，文化部连续三年组织开展全国文化文物领域统计分析的研究工作，对中国内地31个省级区域的文化发展数据进行了统计分析，为构建文化发展评价指标体系奠定了统计数据的基础(文化部，2013)。国内研究机构及学者对文化建设和发展指标体系从不同层面进行了研究。胡惠林和王婧(2013)建立了中国文化产业发展指数的理论模型，提出中国文化产业发展指数由内涵指数和表征指数两套体系构成，构建了包括16个一级指标、51个二级指标、91个三级指标和151个四级指标的中国文化产业发展指数。张京成(2014)、彭翊(2013)也进行了文化产业发展指标及指数方面的研究。倪鹏飞(2014)构建了城市竞争力指数，将城市文化评价指标体系分为历史文化、现代文化、文化多元性和文化产业四个维度。高福民和花建(2012)基于城市评估理念，构建了文化城市统计评估指标体系，共计6大体系、18个板块和72个具体指标。国内学者的研究为新型城镇化进程中区域城镇文化建设和发展指标体系的构建提供了有益借鉴。已有的研究分别涉及文化产业发展指数、宜居城市指数、城市可持续发展指数、城市竞争力指数等，但是目前还没有一个能够全面反映区域城镇文化建设和发展状况的指标体系。有鉴于此，本文构建了我国城镇化进程中区域城镇文化发展指数(RegionalUrbanCulturalDevelopmentIndicator，RUCI)，由6个一级指标、14个二级指标、36个三级指标构成，从不同侧面对区域城镇文化建设和发展的状况进行测度;同时，运用2012年的统计数据，对中国31个省份(由于数据可得性和可比性等原因，没有包括中国港、澳、台地区)的RUCI指数以及各分类指数进行了评分和排名，并对其地区之间的差异性、与GDP指数的相关性以及相互之间的相关性进行了分析，从而总结出影响区域城镇文化建设和发展的因素，进而提出促进新型城镇化中城镇文化建设和发展的政策建议。
二、RUCI的构建框架和评分方法
文化建设和发展具有多元性和复杂性，对其评价需要从多维度进行。根据影响城镇文化建设和发展的重要程度，首先将最重要的因素作为一级指标，然后将其进行细化，从而形成数目更多、更具体的二级指标，继续这一步骤，直至落实到具体指标层，指标层中所包含的因素可以用统计指标来测度。指标层中统计指标的选取应具有代表性，彼此尽量不相关，还要兼顾全面性，即尽量用有代表性的指标反映理论层面所界定的因素。首先将RUCI指数分为6个一级指标，分别为“文化遗产与旅游资源”“公共文化设施、服务及效率”“文化产业就业与文化市场规模”“文化创新实力和潜力”“文化消费水平和偏好”和“文化政策的支持力度”。“文化遗产与旅游资源”包括3个二级指标，分别为“文化遗产”“旅游资源”和“旅游吸引”，衡量区域自然和人文资源、文化底蕴和文化特色以及对国内外游客的吸引力。“公共文化设施、服务及效率”主要刻画基本公共文化服务的水平，二级指标包括“公共文化设施”“公共文化服务”“文化教育”和“利用效率”，是地方政府，特别是文化管理部门为居民提供基本文化服务的最为关键的评价指标。“文化产业就业与文化市场规模”主要刻画文化产业的发展状况，包含“文化产业就业”和“文化市场规模”两个二级指标。“文化创新实力和潜力”主要衡量文化创新的现状和未来的潜力，包含“文化创新成果”和“文化创新潜力”两个二级指标。“文化消费水平和偏好”衡量城镇居民的文化消费能力以及对文化消费的偏好，即相对于其他消费的重要程度，用“文化消费水平”和“文化消费偏好”两个二级指标来刻画。“文化政策的支持力度”测评地方政府对文化建设和发展的重视程度以及文化政策执行力度和执行效果，包括“政策效果”和“政策支持”两个二级测度指标。总结起来，我们设计的RUCI指标体系是从文化资源、文化服务、文化产业、文化消费、文化创新、文化政策六个方面对区域城镇文化建设和发展进行评价，基本覆盖了国家在新型城镇化过程中对文化建设和发展的各项要求。考虑到数据的可获取性和数据之间的相关性等因素，模型中实际使用了6个一级指标、14个二级指标、36个三级指标(见表1)。统计数据的来源是已有的公开出版的各类统计年鉴和电子数据库、省市区统计年鉴、文化发展统计年鉴等，一方面能够保证数据的权威性，可以在不同地区之间进行比较，另一方面也为今后的跟踪研究确立了较好的数据基础。在对各个指标进行加权平均之前，还需要进行无量纲化处理，即对每个三级指标进行评分，使其能够直接比较。构建RUCI指标结构时，我们设计了专家打分表，并进行了两次专家打分，将专家的意见和打分结果作为确定RUCI结构和权重的参考。由于涉及的统计指标数目较多、层级较多，用层次分析法需要多次的专家打分和反馈，过于费时费力;而主成分分析法通常适用于数目较大的统计指标，并且第一主成分能够解释80%以上变量的变动，我们现有的数据也不能支持这些条件。因此在本研究的计算过程中，假设所有的指标具有相同的权重，没有采用在综合评价指数研究中较常用的层次分析法(AHP)和多元统计分析法(如主成分分析法、因子分析法等)。
三、我国各省份RUCI评价结果及分析
1．城镇文化建设和发展的总体评价及区域差异从全国31个省份的36个3级指标的发展轨迹看，在过去10年中，除个别年份外，基本上所有的指标都有明显的增长和改善。在这一时期，我国GDP增长了近4倍，城镇化水平大幅提高，经济的快速增长和城镇化水平的快速提高，大大促进了文化建设和发展，无论是基本文化设施及服务，还是文化产业和文化消费，都出现了快速的增长。因此，从总体上看，在过去的10年，我国的文化建设和发展水平得到了较快的提高，对文化建设和发展的总体评价是积极的。表2为31个省份RUCI、一级指标以及人均GDP的评分结果。排在前5位的分别是北京、上海、浙江、江苏和广东，排在后5位的是青海、海南、贵州、宁夏和。从区域分布看，得分较高的地区大多集中在东部沿海地区，排在后几位的集中在西部经济欠发达地区。北京的综合评分显著高于其他省份，反映出北京作为首都、历史文化名城、高等院校和科研院所的集中地，在文化建设和发展方面所具有的突出优势，也在一定程度上验证了RUCI指标体系设计的合理性。大多数省份RUCI得分与其人均GDP得分的排名是基本一致的，在个别省份存在较大的差距。其中安徽省虽然人均GDP比较靠后，为第26位，但在RUCI得分中表现良好，为第11位，其他类似的省份有河南、山西等。与之相反的是宁夏，人均GDP位于第16位，但RUCI得分比较靠后，为第30位，其他类似的省份有内蒙古、吉林等。这些差距过大的省份，其经济增长与文化建设和发展的关系值得进一步地深入研究。
2．一级指标及其差异性分析从“文化遗产与旅游资源”的得分情况看，除了山东、北京、江苏这些在RUCI总分和GDP得分都很靠前的省份外，云南、河南、四川、河北分别名列第4、5、6、8位，远远优于其在人均GDP中的得分排名;而上海和天津的排名较靠后，为第23和27位，远远低于在GDP中的排名。由于“文化特色和吸引”中包含的指标主要为物质和非物质文化遗产和资产、旅游景区数量和接待游客数量，因此，河南、云南、四川等在文化遗产方面具有较大优势的省份，排在了前列。尽管某些省份在经济发展和文化建设与发展的其他方面不具优势，从时间序列的数据看，随着经济发展、基础设施的建设和完善、居民收入水平的提高，这些具有鲜明文化特色的省份正在加速吸引到更多的游客，获得更多的旅游收入。以云南省为例，旅游景区接待人数从2010年的0．64亿猛升到2012年的1．30亿，接待入境旅游人数从2008年的250万快速上升到2012年的457万。文化特色和文化遗产的价值得到国内外游客越来越多的青睐，也产生了越来越多的经济收入。但是也有一些省份，如山西省，在文化资源和文化特色方面具有相当的优势，但是在吸引国内外游客方面的得分却很低，这些省份在将文化资源优势转化为文化吸引力方面还大有潜力。从“公共文化设施、服务及效率”的得分情况看，总体上各省份的得分与人均GDP的得分有非常高的相关性，其排名也与GDP的排名基本一致。特别是排在前10位的省份，除了陕西和重庆人均GDP排名分别排在第14和第12位之外，其他8个省份人均GDP排名都位于前10位。“公共文化设施、服务及效率”基本上反映了政府提供公共服务的水平，与地方的经济增长和收入水平紧密相关。由于基本公共服务的属性，这一指标评分的方差也比较小，说明全国的公共服务均等化程度较高。但是排在后面的贵州、的得分明显低于其他省份，尤其是在公共文化设施、公共文化服务和文化教育方面的评分都显著低于平均水平，说明这些省份在基本公共文化服务方面亟待加强。从“文化产业就业与文化市场规模”的得分情况看，北京、广东、上海和浙江的得分居于前列，并且显著高于其他省份;位于后几位的省份是黑龙江、海南、新疆、甘肃和青海，基本上都属于西部或东北经济欠发达地区。其中“文化产业和市场”排名远远优于GDP排名的省份为江西、湖南和四川，分别相差16、10和13位;而在吉林、黑龙江和内蒙古，情况却是相反，人均GDP的排名明显优于“文化产业就业与文化市场规模”。从中可以看出，“文化产业就业与文化市场规模”的发展状况，不完全取决于GDP的增长，同时还与地区的人口密度、文化底蕴、文化政策、文化体制改革和开放程度等密切相关。
从“文化创新实力和潜力”的得分情况看，除了北京、上海、江苏、浙江、天津得分较高之外，山东省排名非常靠前，为第3位。另外值得一提的还有陕西和安徽省，排名为第6和11位，远远优于人均GDP的排名(第14和26位)。从“文化消费水平与偏好”的得分情况看，排在前几位的依然是经济发达和人口密度较大的省份，排名靠后的地区大多是经济发展水平和人口密度都较低的省份。但是，其中有些省份比较特殊，例如安徽省，其在“文化消费水平与偏好”和人均GDP的排名差距非常大，分别为第8和第26位，广西的排名分别为第13和27位;与此相反的是重庆市，排名分别为第28和第12位。文化消费的指标是由人均教育文化娱乐的产品及服务支出以及它们占家庭总支出的比重来反映的，因此，在GDP水平相近的省份中，安徽和广西等具有较高的居民文化消费水平和偏好，而重庆市的居民文化消费水平和偏好都较低。从“文化政策的支持力度”的得分情况看，除了北京、上海、天津、浙江、江苏和广东这些经济发达的省份排名靠前之外，值得一提的是新疆、青海、海南、这些经济欠发达的省份排名非常靠前，分别为第7、8、9和13位，远远高于其人均GDP的排名。“文化政策的支持力度”指标包含的三级指标是“人均文化事业费”和“地方公共财政支出中人均教育科技支出”，说明这些经济欠发达省份的地方政府，对文化教育科技的重视程度和支持力度较强。相反，湖南和河北等省份虽然GDP排名比较靠前，但在政府对文化的支持方面的得分却排在非常靠后的位置。在总得分排在前列的几个省份中，其一级指标的各项排名也居于前列，即这些省份在各个方面都表现优秀，例如RUCI总分排在第一位的北京，除了“文化遗产与旅游资源”排在第2位之外，其他几个指标都是排在第1位;排在前列的上海、江苏、浙江和广东的情况也基本类似。排名相对靠后的几个省份的情况略有不同，这些省份某些单项的排名还比较靠前，如青海和海南等在“文化政策的支持力度”方面的排名比较靠前(第8、9位)，宁夏在“公共文化设施与服务”方面的表现也比较好，排在第14位。
从区域经济的角度看，东部和东南沿海地区的RUCI基本都排在前列，中部地区的省份大多排在中间，而排名后10位的基本上都是西部省份。因此，从文化建设和发展的角度看，东、中、西部还存在着明显的差距。3．RUCI及一、二级指标与GDP的相关性分析虽然经济的快速增长会在一定程度上对保留城市风貌、文物古迹保护等构成威胁，但是，必须承认，文化的建设和发展离不开经济和社会的发展。从RUCI总评分与GDP的相关性看，两者高度相关，相关系数达到0．77。从6个一级指标和14个二级指标看，除了“文化遗产”，其他所有指标都与GDP有正相关关系(篇幅所限，这里没有列出二级指标的相关性)。6个一级指标中，GDP评分与“文化遗产与旅游资源”的相关性很弱，相关系数只有0．16，其中的“文化遗产和文化资源”基本上与GDP的评分无关，“旅游资源和吸引”与GDP的相关系数为0．47，这个结果是在意料之中。“文化遗产和旅游资源”等评分并不会随着GDP的增长而提高，但随着经济的增长，文化遗产和旅游资源将成为一个地区更为珍贵的文化资产，需要加以保护和传承。另一方面，建立和开发人文景观、提供优质的基础设施和服务，也是增强地区吸引力的重要渠道。与GDP相关性最高的是“公共文化设施、服务与效率”，相关系数达到0．83，说明经济发展对于提供基本公共文化设施和服务具有重要的作用，同时也可以预见，随着我国经济的进一步增长，居民享有的基本公共文化服务还将得到进一步的改善和提高。其中“公共文化设施”与GDP的相关性最强，达到0．85;而“公共文化服务”与GDP的相关性较低，只有0．34。说明在经济较发达的地区，居民享有较高的人均图书馆、博物馆、人均公园面积等设施和服务，但是即使在人均GDP较低的地区，在“文艺活动和演出的观众人数”等指标方面，也可以得到较高评分。从文化消费与GDP的相关关系看，“文化消费水平”与GDP的相关性显著高于居民的“文化消费偏好”，分别为0．65和0．38，说明除了收入增长之外，还有一些因素会影响到居民的文化消费偏好，在相同的GDP水平下，可以通过影响和加强这些因素来促进居民的文化消费。此外，GDP评分与地方文化政策的相关性也较高，达到0．77。
四、结论和启示
本文通过构建RUCI指数，对全国31个省份的文化建设和发展水平进行了全面的、多方位和多角度的评估，并对RUCI总指数以及构成RUCI的二级和三级指标进行了打分和排名。虽然只对2012年的数据进行了分析，但建立了基础计量模型和数据库，今后在得到更多数据的情况下，可以利用已经建立的计量模型进行追踪和扩展，进一步描述和分析RUCI的变化趋势和规律。需要说明的是，虽然我们已经对评价结果进行了反复的讨论，并对出现的问题进行了修正，但是由于数据来源的有限性，指标体系中所包含的指标必然具有一定的局限性，还是有可能出现个别地区的评价与实际情况有较大偏差的现象。对于一些暂时没有发现的问题，将在今后的研究中进一步修正。此外，各个指标的得分是相对分数，不同指标的分数不宜用来进行比较。从目前的数据和计算结果看，我国文化建设和发展水平与过去相比有很大程度的提高，其中经济增长和城镇化水平的提高所起到的作用是毋庸置疑的。随着我国经济的增长和城镇化水平的进一步提高，我国居民享有的文化设施和服务将进一步完善，文化产业就业人数及其占总就业的比重也会继续增加;更多的旅游景区将被开发，以满足居民不断增长的旅游和休闲的需要，文化的多样性将更加丰富;自然和非自然文化遗产越来越受到重视和喜爱，价值不断体现，正在成为一个城市或地区的靓丽名片和吸引力的重要来源;对文化遗产进行保护和适度开发与利用正在成为全社会的共识，对其进行保护也越来越得到有关部门的重视。
目的研究苍术挥发油对成骨样细胞UMR-106的增殖作用。方法苍术挥发油和UMR106 成骨样细胞体外共同培养，用MTT 法检测细胞增殖。结果挥发油在0.001 mg/ml 培养48h具有最强的促进细胞增殖作用。结论苍术挥发油中可能含有促进成骨细胞增殖的活性成分。
【关键词】 苍术挥发油 增殖作用 成骨样细胞UMR－106 MTT 法
Abstract：ObjectiveTo research the proliferative effects of essential oil in Atractylodes lancea on osteoblast - UMR-106 cells .MethodsOsteoblasts－UMR-106 cells were cultured with essential oil of Atractylodes in vitro，and MTT method was used to detect the cell proliferation. ResultsEssential oil of Atractylodes lancea at a concentration of 0.001 mg/ml， within 48 h ，strongly stimulated the proliferation of UMR-106 cells.ConclusionEssential oil of Atractylodes lancea probably has some chemical compositions which can stimulate the proliferation of UMR-106 cells.
Key words：Essential oil in Atractylodes lancea; Proliferation effect; UMR-106 cell; MTT method
苍术（Rhizoma atratylodes）为菊科植物南苍术Atractylodes lancea ( Thunb.) DC.或北苍术Atractylodes chinensis Koidz.等的干燥根茎。苍术性辛、苦、温，归脾、胃、肝经，具有燥湿健脾、祛风散寒、明目作用。主治脘腹胀满、泄泻、水肿、风湿痹痛、风寒、感冒等［1］。
苍术在中医临床中使用十分广泛。已有研究发现苍术挥发油增加去卵巢雌性大鼠的骨钙含量（闫雪生《苍术油软胶囊的研制》。山东中医药大学硕士学位论文，2002），但对苍术挥发油是否影响成骨细胞的增殖，尚未见报道。本实验研究苍术挥发油对成骨细胞UMR-106的增殖作用。
1 材料与方法
1.1 材料
苍术药材购自上海德康药业有限公司，经中国第二军医大学药学院生药教研室黄宝康副教授鉴定为苍术Atractylodes lancea (Thunb.) DC.的干燥根茎。
1.2 试剂
DMEM 培养基(Cibco)；3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基-四唑氢溴酸盐MTT(Sigma)；胎牛血清FBS(杭州四季青生物工程材料研究所)；胰蛋白酶(Cibco)；其它试剂均为国产分析纯。
1.3 方法
1.3.1 挥发油样品的制备水蒸气蒸馏法：将药材样品粉碎过40目筛，精确称取200 g的苍术，加水浸泡1 h，然后用挥发油提取器按常规水蒸气蒸馏，提取直至挥发油的量不再增加，蒸馏液用正己烷萃取，萃取液用无水硫酸钠干燥，过滤，微热蒸去溶剂得挥发油样品，挥发油样品为淡黄色透明油状物，具有刺激性气味。取50 mg挥发油样品溶于1 ml二甲基亚砜中，用灭菌过的0.2 mm 滤器( Gelmann Sciences) 除菌，并于4℃保存，备用。临用时用DMEM培养液稀释至所需浓度。
1.3.2 成骨样细胞UMR－106的培养［3］UMR－106 (大鼠成骨肉瘤细胞系) 细胞株获赠于江苏镇江医学院病原生物教研室，源于美国麻省医学院。将UMR-106细胞培养于10％胎牛血清（100KU/L青霉素，100 mg/ml链霉素）的无菌DMEM培养基中，置37℃，5%CO2培养箱中进行培养。取生长状态良好的细胞，用0.25％胰蛋白酶消化，加含胎牛血清的培养基制成细胞悬浮液，调整细胞浓度为5×106个/ml接种于100 ml培养瓶中，二氧化碳培养箱中孵育，2～3 d换液1次。
1.3.3 MTT 法测定细胞的增殖［2］取对数生长期细胞消化计数后，用含血清的DMEM 细胞培养液将细胞浓度稀释至1×105个/ml ，铺入96孔细胞培养板中(100 μl/孔)培养24 h后加入含不同浓度挥发油(每个浓度6孔)的无血清DMEM培养。结束培养4 h前弃去培养液，每孔加入20 μl MTT(5 mg/ml，用PBS配制)继续孵育4 h，有蓝紫色沉淀生成，每孔加入150 μl二甲基亚砜(DMSO) ，振荡10 min待沉淀完全溶解，用酶标仪以550 nm 为测定波长、650 nm为参比波长测定吸光值，以不加中药的细胞孔测得的吸光值为空白，用t检验进行各加药组与空白组之间均值的比较。细胞增殖率的计算如下：
增殖率（%）= Ai实验组- Ao对照组Ao对照组×100%
Ai：不同条件下的吸光值；Ao：空白组的吸光值
2 结果
2.1 MTT 法测定细胞增殖与吸光度的关系将UMR-106细胞分别以6个不同浓度(1×105～1.2×106个)铺入96 孔板，培养8 h贴壁后，用上述方法测定每孔吸光度(Y)，与细胞数目(X)作线性回归，得标准曲线方程：Y=0.054+0.092 6×10-6X(r=0.986 0，n=6)，两者具有良好的线性关系。见图1。
2.2 挥发油对细胞增殖的作用用1，0.1，0.01，0.001 mg/ml 4种浓度的挥发油作用于细胞24 h，在λ＝550 nm测定其吸光值。结果见表1 。表1 不同挥发油浓度对UMR-106的增殖作用(略)
苍术挥发油浓度0.001 mg/ml时培养24 h，可明显促进细胞的增殖，细胞的增殖率为10.44%。在低的浓度下对细胞增殖有轻微的抑制作用，表明挥发油短期内使用低浓度较好。
为了观察挥发油促细胞增殖的最适宜的作用时间，用浓度为0.001 mg/ml的苍术挥发油作用于细胞分别为24，48，72 h ， 在λ＝550 nm测定其吸光值。结果见表2。表2 不同作用时间对细胞增殖的影响(略)
由表2可见，当挥发油在浓度为0.001 mg/ml作用24 h时能明显刺激UMR-106增殖，在近48 h时增殖率为20.96％， 达到最强，72 h 时细胞数目又下降。
3 讨论
苍术挥发油在0.001 mg/ml浓度下作用24，48 h，均对UMR-106增殖有明显的促进作用。UMR-106大鼠成骨肉瘤细胞系从形态和性质上都保留了成骨细胞独有的特征， 并且具有稳定、均一、纯度高等优点。 因此，UMR-106 细胞作为一种国际公认的成骨细胞系可以用来代替成骨细胞［3］。在骨形成最初阶段的成骨细胞增殖期， 成骨细胞数量增多， 形成多层细胞并合成、分泌I型胶原以便最终矿化形成骨结节。成骨样细胞的增殖与细胞培养液中药物的成分有关， 与成骨样细胞UMR-106共同体外培养的方法可能作为对骨形成有促进作用的活性化合物的筛选模型， 经过进一步的动物体内实验从这些活性药物中追踪对骨形成有促进作用的活性成分。因此，以成骨样细胞UMR-106 的增殖为活性指标，观察了苍术挥发油对该细胞系增殖的作用。由于采用的是苍术挥发油和细胞共同体外培养的方法，推测苍术挥发油中含有直接刺激成骨样细胞增殖的成分，为苍术治疗骨质疏松症提供初步筛选，具体机制有待进一步研究。
【参考文献】
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目的通过临床观察来分析髋臼股骨头成形术结合通络生骨胶囊治疗成人髋臼发育不良的疗效机制。方法采用髋臼股骨头成形术结合通络生骨胶囊治疗89例(122髋)成人髋臼发育不良患者。用髋关节百分法进行临床评估。测量X片上的关节间隙作为评估骨关节炎进展的指标，并比较术前和术后的股骨头覆盖率、Sharp角、CE角、股骨头中心高度和水平距离。结果经平均3.8年随访，按百分疗效评价标准评定，122髋中优35髋(28.7%)，良51髋(41.8%)，可27髋(22.1%)，差9髋(7.4%)。AHI由术前平均63%提高到术后100%，Sharp角由术前平均46.64°改善为术后平均26.73°，CE角由术前平均8.27°提高到术后平均58.82°。股骨头中心与理想旋转中心的水平距离术后明显减少。结论髋臼股骨头成形术结合通络生骨胶囊治疗成人CroweⅠ型和Ⅱ型髋臼发育不良伴中晚期骨关节炎的临床效果较好，是一种能替代或延迟人工关节置换术的有效方法。
【关键词】 髋臼发育不良; 晚期骨关节炎; 成形术; 通络生骨胶囊
髋臼发育不良(developmental dysplasia of the hip ，DDH)在临床上并不少见，而髋臼发育不良继发骨关节炎（OA）的治疗较为困难，保守治疗难以奏效。因此，对髋臼发育不良伴有临床症状者，多需手术治疗已为多数学者所共识。髋关节股骨头臼匹配良好，无或有轻微骨关节炎者，可根据情况进行髋臼加盖成形术或各种截骨术。对于骨关节炎较严重，髋臼与股骨头的对应关系差者，则不适宜做截骨术治疗。若患者年龄大于50岁，可考虑全髋关节置换。对于不适宜截骨术治疗的髋臼发育不良伴较严重骨关节炎的中青年患者来说，缺乏比较好的治疗方法。笔者采用髋臼股骨头成形术结合通络生骨胶囊治疗成人髋臼发育不良取得了较好疗效。现报道如下。
1 临床资料
1.1 一般资料从199701～200301共治疗89例DDH，男9例，女80例；年龄18～65岁，平均47.1岁；单侧56例，双侧33例，共122髋；发病时间最短6个月，最长35年，平均11.9年；平均随访3.8年(2～6年)。采用Crowe分型：Ⅰ型，股骨头脱位＜50%；Ⅱ型，股骨头脱位程度为50%～75%；Ⅲ型，股骨头脱位程度为75%～100%；Ⅳ型，股骨头脱位程度大于100%［1］。122髋中Ⅰ型84髋，Ⅱ型38髋。
1.2 诊断标准在骨盆前后位X片上髋臼顶短小，股骨头裸露25%以上，CE角45°)，可诊断为DDH。
1.3 临床表现与OA分级病人均有髋部酸痛，僵硬，73髋伴有不同程度跛行、关节功能受限。对髋关节OA的X线分期，采用Tǒnnis ［2］法，即0期:无OA的特征；1期:股骨头和髋臼有骨硬化，关节面轻度变窄，关节边缘轻度唇样变；2期:股骨头和髋臼出现小囊性变，关节间隙进一步狭窄，股骨头出现严重变形；3期:股骨头和髋臼大囊性变，关节间隙严重狭窄和倾斜，股骨头严重变形、坏死。122髋中，0期15髋，1期36髋，2期27髋，3期44髋。
2 治疗方法
2.1 术式选择对OA 0期和1期患者可不切开关节囊，只进行髋臼成形(加盖)术；对OA 2期和3期患者切开髋关节囊，进行股骨头成形，血管束植入、软骨下骨钻孔、髋臼成形(加盖)术。如有下肢短缩还可考虑进行骨盆延长术。
2.2 手术步骤采用髋前改良S-P切口，应用显微外科技术无创分离旋股外动静脉血管的升支、横支及其属支30～50支，直到阔筋膜层以保证有9～12 cm长度，组成2～3束，检查搏动良好，保护待用。切开关节囊，脱出股骨头，清理头臼骨赘、破裂的髋臼盂唇及增生滑膜，关节面完全退化骨质裸露者，在软骨磨损区用0.15 cm克氏针钻孔，孔距约0.3 cm，深度到达股骨头颈处。在股骨头颈前外侧用0.6～0.8 cm钻头钻2个V型血管骨隧道，至软骨下骨，植入血管束，复位。在髋臼外上缘髋臼软骨的上方凿一约1.5 cm×0.5 cm大小隧道，取一约1.5 cm×2.5 cm×3.5 cm大小游离髂骨块，植入隧道为髋臼造盖，使造盖骨块与原有髋臼形成一个半圆形，增加髋臼包容。有单侧下肢短缩明显者行骨盆延长并造盖，本组有6例做了骨盆延长。缝合部分关节囊，置一引留管接负压瓶。对于内肌挛缩明显、外展位小于15°的病人，加做内收肌切断术。
2.3 术后处理及功能锻炼术后外展位胫骨结节骨牵引6周。术后第1天即开始股四头肌等长收缩活动，3 d后开始主动、被动髋关节伸屈功能活动，同时加强臀中肌收缩锻炼，并进行理疗。去除骨牵引后改为每晚小腿皮套牵引。视植骨愈合情况扶双拐下地(一般为术后6周)。3个月后开始负重行走，行走时采用袁浩塑形疗法，即双髋外展超过肩宽，脚尖朝内，向前向后行走，每天锻炼4次，30 min/次。继续加强髋部肌肉及髋关节功能锻炼。
2.4 药物治疗术后第1天开始服用通络生骨胶囊，4粒/次，3次/d。
3 治疗结果
本组病人经平均3.8年随访，按百分疗效评价标准［3］评定，根据总分分为4个级别，优、良、可、差，85分以上为优，70～84分为良，60～69分为可，60分以下为差。
结果见表1～2。由表1知，122髋中优35髋，占28.7%；良51髋，占41.8%，总优良率为70.5%；可27髋，占22.1%；差9髋，占7.4%。其中Ⅰ型优良率为75%，Ⅱ型优良率为60.5%。表1 术后疗效一般资料个（略）表2 术后疗效一般资料个（略）
由表2可知，OA早期 (0期和1期)52例中44例(84.6%)结果优良。OA晚期(2期和3期)70例中只有42例(60%)结果优良。
AHI由术前平均63%提高到术后100%，Sharp角由术前平均46.64°改善为术后平均26.73°，CE角由术前平均8.27°提高到术后平均58.82°，股骨头中心水平宽度对侧术侧比由术前平均83%提高到术后平均93%，髋关节上方关节间隙由术前平均1.7 mm提高到术后平均2.91 mm，内侧关节间隙由术前平均14.82 mm减少至术后平均11.36 mm。手术前后X线测量比较用SPSS11.5软件包进行t检验，详见表3。本组病例全部造盖，术后1例出现造盖断裂，3例臼盖吸收超过植入骨块厚度的50%，无重要血管神经损伤。
4 讨论
4.1 成人DDH的病因病理DDH的发病率国外文献统计为1%～10%，女性多于男性，约6～10∶1，其中0.01%的DDH很晚才能得到诊断［4］。成人型DDH临床症状出现的早晚与发生继发病变的时间有关，取决于患者的性别、职业、年龄及髋关节劳损情况等因素。女性患者多在生育后几年内发病，其引起髋关节OA的平均年龄是31.5岁［5］。
正常髋关节的稳定性主要有以下因素共同维持，骨性髋臼，特别是半球窝光滑的骨性髋臼顶和发育良好的唇样骨性髋臼缘对股骨头良好的覆盖；关节软骨和关节囊及其周围的软组织。DDH改变了维持正常髋关节力学稳定性的解剖基础，在髋臼浅小，倾斜度过大，臼盖发育不良和髋臼半球窝构成不良等情况下，随着年龄和体重的增加，股骨头容易向外移位。股骨外移后使关节承重区的范围缩小，局部关节软骨所承受的应力明显增大，进而加速了软骨细胞的变性，逐渐软骨变薄使关节接触面积发生异常改变，进而关节面粗糙，关节间隙变窄，运动障碍，持重关节疼痛，形成OA。
4.2 髋臼股骨头成形术的作用由于假体松动仍是一个没有彻底解决的问题，目前对于青少年及成人DDH或轻度半脱位者或同时伴有早期OA者常行截骨术，避免或推迟行人工全髋置换术［6］。成人DDH保髋手术主要有髋臼造盖成形术、各种骨盆截骨及股骨上端截骨。股骨上端截骨只能改变负重点，覆盖的改善并不满意。各种骨盆截骨手术大多适用于早期关节面光滑患者，要求关节软骨必须保留，X片显示关节间隙至少为正常的50%，骨赘或囊变较少，股骨头外形接近正常。因此，成人DDH伴有髋关节中晚期关节炎，股骨头有明显变形，髋臼又比较浅的病例并不适于做关节囊周围截骨，适宜采取股骨头和髋臼成形术。
Courtois等［7］进行了230例造盖术治疗DDH，208例病人随访超过1年，79人随访为10～24年。88%的病人疼痛大为缓解。手术效果常常可以持续多年。
我们在临床中运用髋臼股骨头成形术治疗DDH，其机制为：①髋臼外形与股骨头的对应关系改善，接触面增大，向髋关节外侧集中的生物应力得以分散。②软组织松解及加盖能使股骨头中心向内下移位(主要是向内侧移位)，股骨头中心和重心线的水平距离缩短，髋关节的所受压力减少，减少了脱位的危险性。③术后髋关节上方关节间隙增宽，软骨下骨钻孔结合术后牵引，有利于软骨的再生与修复。塑形疗法转移了行走时股骨头的负重面，通过一张一弛的运动产生关节液及压应力，刺激软骨的代谢与修复［8，9］。④对中晚期患者可进行股骨头、髋臼成形，清除骨赘、破裂的髋臼盂唇和关节内致炎物质。⑤钻孔还能够减轻骨内压，对OA的疼痛有良好的缓解作用［10］。
4.3 血管束植入的作用我们在股骨头成形术后进行多血管束植入治疗股骨头坏死各期患者，其中不少伴有OA。随访发现多条血管束植入能有效地防止或延缓髋关节OA的产生［11］。研究表明在矫正生物力学失衡的同时，增加股骨头的血供可以改善软骨的营养，防止软骨的退变和OA的发生［12］。OA病例股骨头均存在动脉充血和静脉回流障碍，导致骨内压增高及静脉窦扩张，静脉血流通向异常通道。植入30～50条血管束可改善股骨头内的供血和促进静脉回流，骨内高压下降，所以术后病人静止痛常立即消失［13］。
4.4 通络生骨胶囊的作用通络生骨胶囊(曾用名生脉成骨片)是导师袁浩教授经四十余年临床、实验总结出来的方药，具有活血化淤止痛、补肾生髓成骨的作用。袁浩等［14］进行药效学实验研究，结果表明该药有: ①促进骨组织血管修复和再生、骨髓再生作用；②促进骨吸收，促进骨再生作用；③改善、防止骨细胞的脂肪变性，降低骨内高压的作用。此外，通络生骨胶囊还能够防治OA：①能够促进软骨细胞增殖［15］；②可抑制由IL-1β诱导软骨细胞产生的金属蛋白酶的分泌［16］；③抑制IL-1β诱导软骨细胞合成NOS， 提高软骨细胞SOD活性，抑制PGE2的产生［17］；④调节bax和bcl22基因之间的平衡，防止软骨细胞的凋亡，对软骨细胞有较好的保护作用［12］。
笔者认为DDH继发OA属于先天秉赋不足，后天劳损所致。由于通络生骨胶囊不仅能活血化淤止痛，还能补肾生髓成骨，标本兼治，因而取得了良好效果。患者通常服药1～3个月左右，关节疼痛等症状即能缓解。对一些双髋病变患者，我们通常采用重的一侧进行手术，轻侧服药的方法，均能取得满意的疗效。
4.5 本术式的适应证及优点
4.5.1 适应证对于成人CroweⅠ型和Ⅱ型DDH伴有中晚期OA者，进行髋臼股骨头成形、血管植入和软骨下骨钻孔术，有比较满意的临床效果；单纯髋臼加盖成形术的适应症为成人髋臼短小的DDH，无半脱位，OA前期或早期者。
4.5.2 优点手术通过一个入路进行，其间无重要组织，操作简单、安全；不破坏骨盆的完整性。手术方法简单，创伤小，使髋臼增宽加深，增强了关节的稳定；通过多血管束植入可有效改善股骨头血液供应；通过髋臼造盖增加包容，清理头臼骨赘可改善关节功能与生物力学；能为将来可能进行的全髋置换术臼杯的放置提供骨床。
尽管多数患者经本方法治疗后临床症状消失或明显缓解，但仍有27例患者疗效一般，9例患者疗效差。这些患者主要属于CroweⅡ型和Tǒnnis OA晚期的患者。导致效果差的因素包括年龄大，髋关节半脱位及显著的OA改变。这提示我们对于DDH患者应尽早治疗，以提高治疗成功率。
笔者认为髋臼股骨头成形术结合通络生骨胶囊治疗成人DDH操作简单、安全。对CroweⅠ型、Ⅱ型DDH伴早期OA患者单纯进行髋臼成形术即可获得满意效果；对中晚期OA较严重的患者，能够对股骨头修理成形，清除骨赘和破裂的关节盂唇，髋臼加盖，而且通络生骨胶囊能促进软骨的形成，因此能取得比较满意的临床效果。这是一种能替代或延迟人工全髋关节置换术的有效方法。
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苍术（Rhizoma atratylodes）为菊科植物南苍术Atractylodes lancea ( Thunb.) DC.或北苍术Atractylodes chinensis Koidz.等的干燥根茎。苍术性辛、苦、温，归脾、胃、肝经，具有燥湿健脾、祛风散寒、明目作用。主治脘腹胀满、泄泻、水肿、风湿痹痛、风寒、感冒等［1］。
苍术在中医临床中使用十分广泛。已有研究发现苍术挥发油增加去卵巢雌性大鼠的骨钙含量（闫雪生《苍术油软胶囊的研制》。山东中医药大学硕士学位论文，2002），但对苍术挥发油是否影响成骨细胞的增殖，尚未见报道。本实验研究苍术挥发油对成骨细胞UMR-106的增殖作用。
1 材料与方法
1.1 材料
苍术药材购自上海德康药业有限公司,经中国第二军医大学药学院生药教研室黄宝康副教授鉴定为苍术Atractylodes lancea (Thunb.) DC.的干燥根茎。
1.2 试剂
DMEM 培养基(Cibco)；3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基-四唑氢溴酸盐MTT(Sigma)；胎牛血清FBS(杭州四季青生物工程材料研究所)；胰蛋白酶(Cibco)；其它试剂均为国产分析纯。
1.3 方法
1.3.1 挥发油样品的制备水蒸气蒸馏法：将药材样品粉碎过40目筛，精确称取200 g的苍术，加水浸泡1 h，然后用挥发油提取器按常规水蒸气蒸馏，提取直至挥发油的量不再增加，蒸馏液用正己烷萃取，萃取液用无水硫酸钠干燥，过滤，微热蒸去溶剂得挥发油样品，挥发油样品为淡黄色透明油状物，具有刺激性气味。取50 mg挥发油样品溶于1 ml二甲基亚砜中，用灭菌过的0.2 mm 滤器( Gelmann Sciences) 除菌,并于4℃保存，备用。临用时用DMEM培养液稀释至所需浓度。
1.3.2 成骨样细胞UMR－106的培养［3］UMR－106 (大鼠成骨肉瘤细胞系) 细胞株获赠于江苏镇江医学院病原生物教研室,源于美国麻省医学院。将UMR-106细胞培养于10％胎牛血清（100KU/L青霉素，100 mg/ml链霉素）的无菌DMEM培养基中，置37℃,5%CO2培养箱中进行培养。取生长状态良好的细胞，用0.25％胰蛋白酶消化，加含胎牛血清的培养基制成细胞悬浮液，调整细胞浓度为5×106个/ml接种于100 ml培养瓶中，二氧化碳培养箱中孵育，2～3 d换液1次。
1.3.3 MTT 法测定细胞的增殖［2］取对数生长期细胞消化计数后,用含血清的DMEM 细胞培养液将细胞浓度稀释至1×105个/ml ,铺入96孔细胞培养板中(100 μl/孔)培养24 h后加入含不同浓度挥发油(每个浓度6孔)的无血清DMEM培养。结束培养4 h前弃去培养液,每孔加入20 μl MTT(5 mg/ml,用PBS配制)继续孵育4 h,有蓝紫色沉淀生成,每孔加入150 μl二甲基亚砜(DMSO) ,振荡10 min待沉淀完全溶解,用酶标仪以550 nm 为测定波长、650 nm为参比波长测定吸光值,以不加中药的细胞孔测得的吸光值为空白,用t检验进行各加药组与空白组之间均值的比较。细胞增殖率的计算如下：
增殖率（%）= Ai实验组- Ao对照组Ao对照组×100%
Ai：不同条件下的吸光值；Ao：空白组的吸光值
2 结果
2.1 MTT 法测定细胞增殖与吸光度的关系将UMR-106细胞分别以6个不同浓度(1×105～1.2×106个)铺入96 孔板,培养8 h贴壁后,用上述方法测定每孔吸光度(Y),与细胞数目(X)作线性回归,得标准曲线方程：Y=0.054+0.092 6×10-6X(r=0.986 0,n=6),两者具有良好的线性关系。见图1。
2.2 挥发油对细胞增殖的作用用1，0.1，0.01，0.001 mg/ml 4种浓度的挥发油作用于细胞24 h，在λ＝550 nm测定其吸光值。结果见表1 。表1 不同挥发油浓度对UMR-106的增殖作用(略)
苍术挥发油浓度0.001 mg/ml时培养24 h，可明显促进细胞的增殖,细胞的增殖率为10.44%。在低的浓度下对细胞增殖有轻微的抑制作用,表明挥发油短期内使用低浓度较好。
为了观察挥发油促细胞增殖的最适宜的作用时间,用浓度为0.001 mg/ml的苍术挥发油作用于细胞分别为24，48，72 h , 在λ＝550 nm测定其吸光值。结果见表2。表2 不同作用时间对细胞增殖的影响(略)
由表2可见，当挥发油在浓度为0.001 mg/ml作用24 h时能明显刺激UMR-106增殖，在近48 h时增殖率为20.96％， 达到最强,72 h 时细胞数目又下降。
3 讨论
苍术挥发油在0.001 mg/ml浓度下作用24，48 h，均对UMR-106增殖有明显的促进作用。UMR-106大鼠成骨肉瘤细胞系从形态和性质上都保留了成骨细胞独有的特征, 并且具有稳定、均一、纯度高等优点。 因此,UMR-106 细胞作为一种国际公认的成骨细胞系可以用来代替成骨细胞［3］。在骨形成最初阶段的成骨细胞增殖期, 成骨细胞数量增多, 形成多层细胞并合成、分泌I型胶原以便最终矿化形成骨结节。成骨样细胞的增殖与细胞培养液中药物的成分有关, 与成骨样细胞UMR-106共同体外培养的方法可能作为对骨形成有促进作用的活性化合物的筛选模型, 经过进一步的动物体内实验从这些活性药物中追踪对骨形成有促进作用的活性成分。因此，以成骨样细胞UMR-106 的增殖为活性指标,观察了苍术挥发油对该细胞系增殖的作用。由于采用的是苍术挥发油和细胞共同体外培养的方法,推测苍术挥发油中含有直接刺激成骨样细胞增殖的成分,为苍术治疗骨质疏松症提供初步筛选，具体机制有待进一步研究。
虞世南说他“不择纸笔，皆能如意”。而且他还能写一手好隶书。贞观五年《徐州都督房彦谦碑》就是其隶书作品。他的书法，以隶书为最。究其用笔，圆兼备而劲险峭拔，“若草里惊蛇，云间电发。又如金刚怒目，力士挥拳。”其中竖弯钩等笔画仍是隶笔。他所写《化度寺邑禅师舍利塔铭》，《虞恭公温彦博碑》，《皇甫诞碑》被称为“唐人楷书第一”。
他的楷书无论用笔，结体都有十分严肃的程式，最便于初学。后人所传“欧阳结体三十六法”，就是从他的楷书归纳出来的结字规律。他的行楷书《张翰思鲈帖》体势纵长，笔力劲健。墨迹传世，尤为宝贵。欧阳询的儿子欧阳通，书法一本家传。父子均名声着于书坛，被称为“大小欧阳”。小欧阳《道因法师碑》，隶意更浓，然而锋颍过露，含蓄处不及其父。
欧阳询的书法早在隋朝就已声名鹊起，远扬海外。进入唐朝，更是人书俱老，炉火纯青。但欧阳询自己却并不满足于已经取得的成就，依然读碑临帖，精益求精。
有一次，欧阳询外出游览，在道旁见到一块西晋书法家-索靖所写的章草石碑，看了几眼，觉得写得一般。但转念一想，索靖既然是一代书匠，那么他的书法定会有自己的特色。我何不看个水落石出。于是伫立在碑前，反覆地观看了几遍，才发现了其中精深绝妙之处。欧阳询坐卧于石碑旁摸索比划竟达三天三夜之久。欧阳询终于领悟到索靖书法用笔的精神所在，因而书法亦更臻完美观止。
中图分类号：F407文献标识码： A
引言
长输管道工程地质灾害危险性评估工作的特点是线路长，跨越的地貌单元多，地质环境条件复杂等。以“闽粤支干线天然气管道工程地质灾害危险性评估工作”为例，根据《地质灾害防治条例》及国土资发[2004]69 号文件等法规要求，对长输管道工程地质灾害危险性评估方法进行探讨。
1、工程概况及评估范围
闽粤支干线属于西三线工程九条支线之一，线路总体走向呈东西向。管道起点位于闽粤两省交界的潮州市饶平县上善镇，向西南经潮州市、揭阳市后，折向西经揭西县，惠州市北，东莞市北后到达终点从化市龙潭镇。中间设置四座分输站，设计输量100×108Nm3/a，管径Ф1016mm，设计压力10MPa。管道基本埋深1.2m，石方段埋深最小可减至0.8m。
根据 “技术要求” 的规定，结合工程特点、规模及地质环境条件，以管道为中轴、两侧及两端各1km的带状区域。整个评估面积约1056km2。
2、地质环境条件
2.1气象、水文
评估区横跨广东省中东部，属亚热带地区，夏长冬暖，雨量充沛。年平均气温22℃，年日照时数1828小时。评估区内雨量分布特点是自东向西递增，属湿润地区。管道经过区域的降雨主要集中于4～9月份，多年平均降雨量以龙门县最大（2140.1mm），饶平县最小（1400mm）。
评估区所在区域的河流从西至东，主要有黄冈河、韩江、榕江、东江、增江和流溪河等，具有流量大，含沙量小，汛期长，终年不冻，水力资源丰富的特点。
2.2地形地貌
拟建管道工程沿线地形地貌条件复杂，地貌类型多样有低山、丘陵、平原和岩溶盆地、溶蚀准平原，以低山丘陵为主，其次为平原。管道所经最高点高程约650m，位于K54～K57区段的潮州市凤凰镇南岭山；最低点高程约为3m，位于K120～K140区段的榕江岸边揭阳冲积平原。
2.3地层岩性
评估区内地层岩性复杂，评估区及周边地层由老到新主要为泥盆系、石炭系、二叠系、侏罗系、白垩系、古近系、新近系和第四系；西三线广东段沿线的岩浆岩分布广泛，以侵入岩为主，其次为潜火山岩。
2.4地质构造与区域地壳稳定性
2.4.1地质构造
评估区在大地构造上属于华南褶皱系，为加里东期形成的地槽褶皱系，区内地质构造比较复杂，以断裂为主。评估区范围主要发育有四条断裂带和三条断裂，以NE向为主，其次为EW、NW向，其中河源断裂带活动性中等；莲花山断裂带和紫金-博罗断裂活动性较弱。
2.4.2地震
拟建管道工程所经区域位于我国环东南沿海地震带上。根据《中国地震动参数区划图》（GB18306-2001），确定评估区的地震动峰值加速度为0.05～0.15g，地震基本烈度为Ⅵ～Ⅶ度。
2.5水文地质条件
评估区地下水分为松散岩类孔隙水、基岩裂隙水和碳酸盐岩岩溶裂（溶）隙水等三种类型。低山、丘陵区地下水的补给主要来源于大气降水入渗；沟谷、平原区及滨海区地下水的补给来源除大气降水的入渗补给外，局部有地表水体下渗渗透补给。地下水位随地形变化，河谷平原及滨海区水位埋深较浅，地下水的稳定水位埋深多为1～3m；低山区和丘陵区地下水埋藏较深，稳定水位埋深多为4～8m。
2.6岩土类型及工程地质性质
评估区岩土体按其岩性、结构、物理力学性质分为以下四类：
松散土类（Ⅰ）：较集中于冲积平原，山前平原及丘陵次之，包括第四系全新统（Qh）、更新统（Qp），松散层是管道的主要致灾体。
碎屑岩组（Ⅱ）：包括第三纪至泥盆纪地层，分布于评估区中部大部分地区，岩性为砂岩、粉砂岩、泥质粉砂岩等，自上而下，岩石风化程度变弱。
碳酸盐岩岩组（Ⅲ）：主要为石炭系和泥盆系灰岩、白云岩、白云质灰岩等，岩质较坚硬，微风化岩石天然单轴饱和抗压强度值为17.1～88.1MPa，平均值为39.3MPa。零星分布于评估区西部龙门县见田村、龙华镇、石下村和增城市灌村镇一带，以覆盖型为主。
块状岩组（Ⅳ）：评估区内广泛分布，主要为侵入岩和潜火山岩，岩性为黑云母花岗岩、二长花岗岩、花岗斑岩等。块状岩区植被中等发育至发育，风化层一般较厚，易发生沿基岩面滑动的滑坡或崩塌。
2.7人类工程活动对地质环境的影响
评估区所经区域为广东省经济开放区，人类工程活动以山村民宅和交通工程建设对周边地质环境的改变最为明显，尤其是民宅和道路修建时人工开挖形成且未采取防护工程措施的高切坡在评估区内较多，部分已产生变形破坏，破坏形式以中、小型崩塌和滑坡为主。在地质环境保护较好的区域地段，则少见地质灾害发生。
3、地质灾害危险性现状评估
据收集资料及野外实地调查结果表明，评估范围内已知滑坡、崩塌、地面塌陷等地质灾害点合计29处。
3.1滑坡
评估区内共有滑坡11处，其中小型滑坡8处，中型3处，未发现大型滑坡。灾害点距离管线较远，对管道工程的影响程度小，其地质灾害危险性小。
3.2崩塌
评估区管道沿线有一定规模的崩塌15处，其规模10～1800m3不等，未见大型崩塌发生。灾害点规模以及对管线的影响程度较小，其地质灾害危险性小。
3.3地面塌陷
评估区内地面塌陷有3处，均为岩溶地面塌陷。主要分布于评估区西部龙门县永汉镇-增城市派潭镇岩溶盆地及溶蚀准平原等地下水活跃地区。其中GDT-003对管道工程的影响程度大、危险性大，GDT-001和GDT-002对管道工程的影响中等、危险性中等。
4、地质灾害危险性预测评估
4.1工程建设引发或加剧地质灾害危险性的预测
4.1.1管道开挖工程建设可能引发滑坡、崩塌地质灾害预测
随着工程建设的实施，人工开挖可能引发的地质灾害将以斜坡变形破坏为主，主要表现为引发和加剧滑坡、崩塌地质灾害。
针对层状碎屑岩区段，预测管道顺坡或横坡敷设开挖过程中引发或加剧边坡产生崩塌或滑坡的可能性，评估方法采用赤平投影分析法，结合斜坡的地质环境条件分析斜坡的稳定性，利用边坡稳定性分析结果，结合与之对应的管道之间的位置关系进行危险性评估。
针对评估区岩浆岩分布地段，边坡的稳定性主要根据边坡高度、边坡角度、岩土体性质、地貌特征、水文地质条件及人类工程活动强度等进行危险性评估。
工程沿线有2个区段边坡的岩体为块状构造，边坡稳定性差，发生崩塌、滑坡的可能性大、危险性大；有12段边坡的岩体风化强烈，节理裂隙发育，发生崩塌、滑坡的可能性较大、危险性中等；其余区段发生崩塌、滑坡地质灾害的可能性小、危险性小。
4.1.2隧道工程可能引发或加剧地质灾害预测
拟建管道工程共有2处隧道工程，分别为大窝肚顶隧道和亚婆髻隧道，总长3.7km。根据边坡岩土体及不利结构面的赤平投影关系，分别对隧道的进出口边坡稳定性进行分析，综合评定隧道进口段斜坡稳定性较差、危险性中等。隧道开挖工程弃土石渣堆放不当可能形成不稳定斜坡进而引发崩塌、滑坡或泥石流地质灾害的可能性中等、危险性中等。
4.1.3穿越工程可能引发或加剧地质灾害预测
1）河流穿越
拟建工程穿越河流、沟渠等30728m /896处，其中大、中型穿越5530m /9处。其中韩江、东江段以钻爆隧道方式穿越，穿越围岩为花岗岩及砂砾岩，穿越处断裂构造较发育，岩体较破碎、强度低。预测引发地质灾害的可能性较大、危险性中等。其余中、小型河流采用大开挖、定向钻穿越方式，由于河床与岸坡较稳定，河道宽浅，水流平缓，河水冲刷深度小，两岸均平整开阔，砂层一般较薄，易于防治，预测引发地质灾害的可能性小、危险性小。
2）道路穿越
管道沿线穿越高速公路4处、国道4处、省级公路及普通公路多处，穿越铁路2处，均采用非开挖顶管方式，根据道路所在地段地形地貌、地层岩性、地质灾害发育程度及采取的施工工艺等预测道路穿越工程可能加剧、引发、遭受地质灾害危险性小。
4.2工程建设可能遭受地质灾害危险性预测
4.2.1管道工程可能遭受滑坡、崩塌地质灾害危险性预测
1）露天矿山开采环境条件
评估区内共有11处露天开采的矿山。根据《中华人民共和国石油天然气管道保护法》第三十五条、五十八条规定结合《爆破安全规程GB6722-2003》针对露天岩土爆破最大安全允许距离。预测管道在露天矿山开采区段内的危险性中等～大。
2）自然斜坡条件
根据斜坡所处的地质环境条件采用地质分析与量化打分相结合的方法对斜坡的稳定性现状进行评估，在其基础上，结合斜坡与拟建管道工程的关系对斜坡的潜在危险性进行评估。预测K0+000～K5+600等3个区段，遭受崩塌、滑坡的地质灾害影响的可能性大、危险性大；K5+600～K8+500等19个区段，遭受崩塌、滑坡的地质灾害的影响的可能性较大、危险性中等；其余区段遭受崩塌、滑坡的可能性小、危险性小。
4.2.2管道可能遭受地面塌陷地质灾害危险性预测
1）管道工程可能遭受岩溶地面塌陷地质灾害危险性预测
根据《广东省地质灾害危险性评估实施细则》岩溶地面塌陷稳定性预测评价要素，结合评估区的岩溶发育程度，对岩溶地面塌陷的可能性进分析，预测工程施工产生的振动或引起地下水位变化时，极易引发和遭受岩溶地面塌陷的危害，预测K392+000～K398+000等4段岩溶盆地区，引发或遭受地面塌陷的可能性大、危险性大。
2）管道工程可能遭受采空地面塌陷地质灾害危险性预测
评估区内有5处地下开采矿区，分别为金属矿、煤矿。根据《中华人民共和国石油天然气管道保护法》第三十五条、五十八条，预测管道工程可能遭受矿山开采产生的地面塌陷危险性小2处、危险性中等1处、危险性大2处。
4.2.3管道工程可能遭受软土地面沉降地质灾害危险性预测
评估区内软土主要分布于韩江、东江、榕江等大、中型河流沿岸及部分水库尾部，其中以榕江流域平原区规模较大。根据评估区软土的特点，结合工程型式，采用有限数值模拟法，估算各软土路段软土地基沉降量，评估软土地基不均匀沉降的危害性和危险性。预测软土分布地段不均匀沉降量相对较小、危险性小。
4.2.4管道工程可能遭受泥石流地质灾害危险性预测
评估区内未发现泥石流地质灾害，在此主要是对沟谷泥石流的易发性进行分析。据泥石流的形成条件，结合1:5万地形图、1:20万地质图等资料及野外调查，沿线区域范围内已发生的滑坡、崩塌等地质灾害分布规律和发育特征，综合分析拟建管道工程沿线两侧的主要溪河沟谷产生泥石流的可能性。预测发生泥石流的可能小，工程遭受泥石流地质灾害的可能性小、危险性小。
4.2.5管道工程可能遭受活动性断裂地质灾害危险性预测
评估区内有三条活动性断裂分布，断裂与管道呈较大角度的接触，因软弱带蠕动潜在引发管道变形，对管道安全带来隐患，但因以上断裂活动性较弱，采取合理的选材和施工，可以有效的降低活动性断裂对管道工程的影响。预测评估区内活动性断裂对管道工程影响程度较小、危险性小。
4.2.6输气场站可能遭受地质灾害危险性预测
管道沿线共设置输气站场4座，阀室22座。其中21#、23#阀室遭受岩溶地面塌陷地质灾害的可能性大、危险性大；13#阀室遭受滑坡、崩塌的可能性大、危险性大；6#、11#阀室遭受滑坡、崩塌地质灾害的可能性较大、危险性中等；其余输气站、阀室遭受地质灾害的可能性小、危险性小。
5、地质灾害危险性综合分区评估及防治措施
5.1地质灾害危险性综合评估
5.1.1评估方法
评估办法采用“危险性积分法”，即列出与地质灾害危险性最密切的评分项目，按百分制逐段、逐项进行考核打分，分高为危险性大，分低为危险性小。最后根据评分结果，结合实际情况给出危险性不同级别的标准分值，并按这个标准综合评估每一地段地质灾害危险性等级。
5.1.2评估结果
按照确定的综合评估原则与量化指标，将闽粤支干线526km管道划分为58个区段进行地质灾害危险性综合评估。
1）地质灾害危险性大区（Ⅰ）
K0+000～K5+600等共16段为地质灾害危险性大区。大区线路全长94.8km，占评估管道全长的18.02%。管道工程建设可能引发、加剧或遭受地面塌陷、崩塌、滑坡等地质灾害的可能性大，危险性大，应开展专项勘察，并采取相应防治措施。
2）地质灾害危险性中等区（Ⅱ）
K5+600～K8+500等共19段为地质灾害危险性中等区。中等区全长116.15km，占评估管道全长的22.08%。为崩塌、滑坡灾害中发育区段，灾害点距离管道线路均较远，总体孕灾因素中等，有可能遭受崩塌、滑坡、泥石流等地质灾害，危险性中等，应引起重视。
3）地质灾害危险性小区（Ⅲ）
其余23段是地质灾害危险性小区，共315.05km，占评估管道全长的59.9%。危险性小区无明显的现状地质灾害，预测发生地质灾害的可能性小，危险性小，但不排除小范围、小规模的灾害仍然存在，管道通过时也要引起注意。
4）站场工程建设地质灾害危险性综合评估
四个分输站场区条件较好，周边未发现地质灾害发生，综合评估拟建的四个场站遭受地质灾害的可能性小、危险性小。
5.1.3适宜性综合评定
根据以上评述结果，综合评定拟建管道工程用地适宜性级别为基本适宜。
5.2防治措施
1）项目建设前需对工程场地作详细的岩土工程勘察，特别是重要工程、不良工程地质条件段，为设计提供详细的工程地质资料。
2）在穿越地质灾害较为集中段和灾害体时，应进行线路调整，避免大的灾害对线路产生影响。
3）在管道定线前，应对地下矿区分布情况进行详细调查，管道要尽可能绕避地下采空区，或采取对应措施对管道加以保护。
4）针对输气场站等重要工程，应进行专项地质灾害危险性评估工作。
5）管道工程建设应尽量选择在旱季进行，认真做好水土保持工作，同时加强施工过程中的监测，预警等工作。
6）管道工程建设中应严格执行地质灾害防治工作“三同时”制度。
6、结束语
1）长输管道工程一般具备线路长，跨越地貌单元多元化，地质环境条件复杂的特征，全面收集和分析地质环境条件资料至关重要。
2）根据管道沿线地质灾害易发程度，有针对性的查明沿线地质灾害和不良地质环境条件分布、规模、特征，对其危险性和对工程危害范围及程度定性的作出现状评估。
3）根据沿线的地质环境条件，结合管道工程的施工特点，对工程建设中和运营后可能引发或加剧地质灾害和遭受地质灾害的可能性、危险性进行定量、半定量的预测评估。
4）根据地质灾害的现状评估和预测评估结果，采用“危险性积分法”对拟建管道工程的适宜性作出综合评估，有针对性的提出防治措施和建议。
5）地质灾害危险性评估工作一般在可行性研究阶段进行，受工程研究阶段和现场实际勘查工作量的限制，评估成果不能满足工程施工设计要求。后续工程勘察和设计、施工、监测等工作对地质灾害防治中具有重要作用。
参考文献
［1］中华人民共和国石油天然气管道保护法，2010.6.25
［2］地质灾害防治条例释义编委会．地质灾害防治条例释义[M]．北京：中国大地出版社，2004．
【Abstract】 AIM: To explore the categorization， prevention and treatment of bone cement leakage following percutaneous vertebroplasty (PVP). METHODS: PVP has been performed for vertebral angioma and vertebral body osteoporotic compression fracture in 38 cases (11 men and 27 women) since November， 2002. Followup ranged from 8 to 16 months in all cases. The curative effect was evaluated based on the standard of WHO. RESULTS: The symptoms were relieved completely or partially in all the cases. Bone cement leakage following PVP was classified into 4 types as type Ⅰ (vertebral side)， type Ⅱ (intervertebral disc)， type
Ⅲ (vertebral canal) and type Ⅳ (mixed type). Different treatments were planned according to the different types. The experience of preventing bone cement leakage was summed up. CONCLUSION: To prevent the bone cement leakage， we should pay attention to the preoperative preparation of bone cement， the choice of the anesthesia and the monitoring of the whole operation. The patients of typeⅠ and Ⅱneed not be treated， but the patients of type Ⅲ and Ⅳ who have the symptoms of nerve compression must have an open operation.
【Keywords】 percutaneous vertebroplasty; bone cements; leakage
【摘要】目的： 介绍经皮椎体成形术（PVP）在我院的临床应用，并探讨骨水泥外溢的分型及防治. 方法： 200211选择老年性骨质疏松性椎体压缩骨折及椎体血管瘤患者38（男11，女27）例，应用经皮椎体成形术治疗. 随访8～16 mo，疗效评定采用WHO标准. 结果： 所有治疗患者的症状完全或部分缓解. 将该组患者PVP术后骨水泥外溢的情况分为四型，即Ⅰ型(椎旁型)、Ⅱ型(椎间盘型)、Ⅲ型(椎管型)和Ⅳ型(混合型)，并针对不同的分型提出治疗方案，同时总结预防骨水泥外溢的经验. 结论： 经皮椎体成形术在治疗骨质疏松性胸、腰椎压缩骨折及椎体血管瘤中，具有增强椎体强度、防止骨折移位、止痛效果确切和微创治疗等优点. 通过术前及骨水泥的准备、麻醉的选择、术中监控等，以防止骨水泥外溢. 骨水泥外溢Ⅰ，Ⅱ型无需采取治疗. Ⅲ，Ⅳ型外溢，如骨水泥漏入椎管内引起神经压迫症状，则必须采取开放手术治疗.
【关键词】 经皮椎体成形术；骨粘合剂；外溢
0引言
经皮椎体成形术(percutaneous vertebroplasty， PVP)是近年来在治疗骨质疏松性胸、腰椎压缩骨折及椎体血管瘤等疾患中的一种非血管性介入治疗手段. 具有增强椎体强度、防止骨折移位、止痛效果确切和微创治疗等优点. 但PVP中骨水泥外溢的并发症则是临床工作的又一难题. 我院200211起应用PVP治疗38例老年性骨质疏松性锥体压缩骨折及椎体血管瘤，对PVP中骨水泥外溢分型及防治进行了探讨.
1对象和方法
1.1对象
骨质疏松性胸、腰椎压缩骨折33（男9，女24）例，年龄56～87（平均69.10±8.72）岁. 接受椎体成形术的病变椎体有49个，分别为T11 5个、T12 8个、L114个、L2，3各11个. 33例均有明显腰背疼痛，翻身转侧困难，但无脊髓、神经损害症状. X线摄片示明显骨质疏松的椎体不同程度压缩性骨折，CT扫描示病变椎体后壁完整，椎管内无占位性病变. 椎体血管瘤5（男2，女3）例，年龄42～56（平均48.62±5.13）岁，病变椎体7个，分别为T102个、T121个、L32个、L42个.
不透X线的进口独立包装慢凝骨水泥，椎弓根穿刺针（天津合成材料工业研究所），CT机使用SIEMENS SOMATOM Emotion6，X光机使用100 mA高频C臂ITALYR91.
1.2方法
术前对患者的一般状况进行评估，包括凝血七项，心肺功能，术前均摄脊椎正侧位X线平片、CT检查，以观察椎体后缘是否完整，术前30 min常规使用镇静剂，术中生命体征监护，手术在局麻下进行，C臂X光机监控下操作，取俯卧位，首先侧位透视下，确定病椎及椎弓根方向，再正位透视下确定椎弓根位置并确定穿刺点及穿刺方向，穿刺点应位于椎弓根眼的外上方，用龙胆紫体表定位标志，消毒铺巾，进针点局部浸润麻醉，于C臂X光机监控下，经椎弓根入路，进针到达椎体前1/3处，混合骨水泥两种成分（粉状的甲基丙烯酸树脂多聚体和液态的甲基丙烯树脂单体）待其呈牙膏状抽入空针内，接到穿刺针加压推注，注射骨水泥全程于C臂X光机下，监视骨水泥于椎体内弥散情况，当骨水泥到达椎体后壁充满椎体时停止推注，2～3 min后待骨水泥稍固化后再拔出穿刺针. 本组38例患者均采用单侧椎弓根进针注射，骨水泥注射量为3～8 mL. 骨水泥注射完毕后观察10～15 min，了解患者骨水泥聚合反应的情况，术后脊椎正侧位X光机复查，卧床休息12～24 h后，戴腰围保护下活动，常规应用抗生素3 d.
2结果
本组38例全部得到随访，随访时间8～16（平均11.7±2.1） mo，其中36例术后疼痛消失，2例术后疼痛减轻，经口服非甾体类药物疼痛消失. 疗效评定采用WHO标准将腰背疼痛缓解程度分为完全缓解（CR），部分缓解（PR），轻微缓解（MR），无效（NR）. 结果38例中36例CR， 2例PR，CR+PR为100%. 并发症：骨水泥外溢11例.
在经皮椎体成形术中骨水泥外溢是该术式的严重并发症，该组患者中11例出现骨水泥外溢. 本组资料骨水泥的外溢分为四型： Ⅰ型骨水泥外溢进入椎体旁5例(图1). Ⅱ型骨水泥外溢进入椎间盘2例（图2）. Ⅲ型骨水泥外溢进入椎管内2例（图3）. Ⅳ型骨水泥外溢为混合型，即骨水泥外溢进入椎管合并骨水泥外溢进入椎间盘或椎旁2例（图4）.
3讨论
3.1PVP的临床作用原理PVP是一种脊柱非血管介入治疗技术，与既往开放性手术相比属微创手术. 椎体病灶内注入骨水泥，通过骨水泥的粘合性及骨水泥凝固成形后的抗压性，增加椎体的强度和局部稳定性，防止椎体继续受压变形和骨折移位. 关于治疗的止痛作用，国内学者认为［1］： ① 骨水泥注入后，因其机械作用使局部血管的截断、其化学毒性作用以及其聚合时产生的热效应均可使周围组织的神经末梢坏死； ② 骨水泥的注入加强了椎体强度，减少了骨折区对椎体神经的刺激.
3.2PVP中骨水泥注射量及分布与椎体生物力学的关系PVP骨水泥的注射量及分布与椎体生物力学的关系，一直是术者探讨的问题. Cotton等［2］认为： ① 同一椎体骨水泥充填量颈椎平均为2.5 mL，胸椎为5.5 mL，腰椎为7.0 mL; ② 骨水泥的充填量、几何分布与增加椎体最大载荷无关，适量充填和骨水泥不对称分布亦可有效强化椎体，防止塌陷. 而Liebschner等［3］认为： 椎体刚度的恢复与骨水泥的充填量紧密相关，骨水泥充填整个椎体的14％即可将破坏后的椎体刚度恢复到破坏前水平，如果充填整个椎体的30％，将超过破坏前刚度的一半以上，在相同的加载条件下，单侧椎弓根穿刺与双侧相比刚度测定值相似， 过量充填并不能获得最佳生物力学效果，而应是骨水泥的椎体内小量充填和对称分布. 我们认为，胸、腰椎骨水泥注射量为4～6 mL，该剂量已能达到治疗目的，过大的注入剂量则易导致椎体破裂骨水泥外溢，特别是老年骨质疏松并压缩性骨折，不能追求单纯增加骨水泥充填量来提高治疗的临床效果.
3.3PVP骨水泥外溢的预防PVP对老年骨质疏松性椎体压缩骨折的治疗，其根本目的是增加椎体强度，恢复脊柱稳定性，从而缓解疼痛，使患者早期恢复日常活动，避免骨质疏松进一步加重［4-7］；在治疗脊柱的血管瘤方面能够以微创的方式达到治疗目的，减少了传统外科治疗的风险. 但PVP骨水泥外溢的高发，在一定程度上限制了该方法的推广运用，故对PVP骨水泥外溢的预防是临床中所必须解决的问题. 我们认为从以下几个方面有助预防骨水泥外溢： ① 术前准备. 该类患者在术前必须对患椎进行CT检查，以了解椎体后壁的完整性及是否有血管与椎管相通，椎体后壁完整及椎体内血管不与椎管相通方能采取该术式. ② 麻醉的选择. 该术式要求采取局麻，便于术中观察. ③ 骨水泥的准备. 骨水泥应在牙膏状态进行椎体内注射. ④ 术中操作. 椎弓根穿刺针须穿刺至椎体的前1/3处，注射时不停变动针尖的方向，使骨水泥能尽量均匀的分布在椎体内. 骨水泥注射超过椎体中线后则需谨慎，达到椎体的后2/3时则应停止注射. 骨水泥进行椎体内注射时往往有一定的阻力，如注射时阻力突然消失则提示因椎体内压增高，椎体破裂，必须立即停止注射. 术中全程须在C臂X光机的监控下进行，观察第1次1 mL灌注剂的分布情况，如出现骨水泥外溢（此时主要是静脉注射），则暂停注射，待骨水泥进一步凝固，并改变针尖的方向. 术中患者如出现神经症状则改为开放手术.
3.4PVP骨水泥外溢的治疗经观察Ⅰ型、Ⅱ型无需采取手术治疗. 而Ⅲ型、Ⅳ型则根据骨水泥外溢进入椎管内是否引起神经压迫症状进行处置，如果未引起神经压迫症状，则无需手术治疗，如引起神经压迫症状，则必须采取开放手术治疗. 本组资料中2例为择期手术，2例为在PVP中改为开放手术. 该组患者术后恢复良好，无神经症状. 我们主张一旦发现Ⅲ型、 Ⅳ型骨水泥外溢，并出现神经压迫症状，则马上采取开放手术治疗，清除椎管内的骨水泥.
参考文献
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[摘要] 目的 比较经皮椎体成形术（PKP）与保守法治疗老年骨质疏松性胸腰椎压缩骨折的效果。方法 回顾分析该院自2013年5月—2014年5月收治的47例老年骨质疏松性胸腰椎压缩骨折患者。47例患者随机分为观察组（n=26）和对照组（n=21），观察组患者采用经皮椎体成形术，对照组患者采用保守法治疗。比较两组患者经治疗1周后、1月后和3月后的视觉疼痛评分(visual analogue scale，VAS)；治疗1个月后的Cobb角和椎体高度；随访1年内并发症发生情况。结果 观察组患者的手术前、治疗1周、治疗1个月和治疗3个月的VAS评分为（7.56±1.23）、（3.24±0.73）、（2.36±0.19）、（2.01±0.41），观察组患者的手术前、治疗1周、治疗1个月和治疗3个月的VAS评分差异有统计学意义（P<0.05）。对照组患者的手术前、治疗1周、治疗1个月和治疗3个月的VAS评分为（7.61±1.03）、（5.11±0.53）、（2.31±0.27）、（2.03±0.28）。对照组患者的手术前、治疗1周、治疗1个月和治疗3个月的VAS评分均有显著性差异（P<0.05），两组患者比较，只有在治疗1周的VAS评分有显著性差异（P<0.05）。观察组和对照组治疗1个月后的Cobb角为（17.55±2.10）和（17.69±2.41）。两组患者经治疗1个月后，Cobb角明显下降和椎体高度明显恢复，两组间差异具有统计学意义（P<0.05）；随访1年内，两组患者均没出现压缩骨折椎体邻近椎体的骨折，观察组有2例患者出现骨水泥泄漏，对照组患者没出现并发症。结论 椎体成形术相对保守法治疗老年骨质疏松性胸腰椎压缩骨折可缓解早期疼痛、明显缩短卧床时间，但可出现并发症情况，费用较高昂。
关键词 经皮椎体成形术；保守法；骨质疏松性；胸腰椎压缩骨折；视觉疼痛评分
[中图分类号] R683.2[文献标识码] A[文章编号] 1674-0742（2014）11（a）－0096-02
胸腰椎压缩性骨折是常见的脊柱骨折损伤类型指前屈伤力造成椎体前柱压缩，而脊椎的椎弓（后柱）正常，老年骨质疏松骨折也可能是压缩性骨折。在我国，骨质疏松在60岁以上人群中发病率为56％，女性的发病率更高达60％~70％，女性发生率明显高于男性，特别是60～64岁女性[1]。骨质疏松症的患者骨强度降低，骨折危险性增加，容易发生骨折，骨密度和骨质量是骨质疏松主要影响因素[2]。老年骨质疏松性胸腰椎压缩骨折通常采用卧硬板床、腰背肌功能锻炼为主的保守疗法。PKP是经皮通过椎弓根或椎弓根外向椎体内注入骨水泥以增加椎体强度和稳定性的一项微创技术[3]，是未来的发展趋势。回顾分析该院自2013年5月—2014年5月收治的47例老年骨质疏松性胸腰椎压缩骨折患者，现将结果报道如下。
1资料与方法
1.1一般资料
回顾分析该院自2013年5月—2014年5月收治的47例老年骨质疏松性胸腰椎压缩骨折患者。47例患者随机分为观察组（n=26）和对照组（n=21）。47例患者临床表现为严重胸腰椎部疼痛，影响日常生活，但无脊髓和神经根受压症状。所有均经过CT或X线片确诊为胸腰椎压缩性骨折，均损伤1个椎体，缩程度为l/3～3/4。同时排除良恶性骨肿瘤及其他骨病造成的病理性椎体压缩骨折和1个以上体压缩性骨折患者、排除合并有严重的肝、肾、心疾病的患者。
观察组患者年龄分布60～75岁，平均年龄（67.56±3.57）岁；男性8例，女性18例；病程4～36 d，平均病程（12.12±4.57）d；损伤节段：T11 2例，T12 4例，L1 14例，L2 6例；治疗前X线吸收法测定骨密度：轻度骨质疏松9例，中度骨质疏松13例，重度骨质疏松4例。对照组患者年龄分布60～77岁，平均年龄（66.16±3.97）岁；男性7例，女性14例；病程3～41 d，平均病程（13.44±4.15）d；损伤节段：T12 3例，L1 12例，L2 5例，L3 1例；治疗前X线吸收法测定骨密度：轻度骨质疏松7例，中度骨质疏松12例，重度骨质疏松2例。两组患者的一般资料差异无统计学意义（P>0.05），具可比性。
1.2治疗方法
观察组: 患者取俯卧位，经C臂机透视和定位病椎弓根体表投影，记号笔标记，标记穿刺点，麻醉满意后进行手术。正位透视引导下，将穿刺套针经椎弓根穿入椎体内。采用穿刺针抵到椎弓根外上缘，通过侧位透视确定针尖方向，缓慢进针，随时调整进针角度。至针尖达到椎体的前中l/3处，再正位透视针尖，确保其在棘突附近。在建立通道时不断询问患者下肢感觉，避免伤及神经侧位。拔出针芯，插入扩张球囊，缓慢撑开压缩的椎体，注意观察上下椎板是否有破裂迹象，如果有，则停止撑开。调制骨水泥(PⅢA)，待其硬度合适后，侧位透视下通过所建立通道注入到病椎中。在C臂透视监视下，控制性加压注射骨水泥，注入量胸椎为3～4 mL，腰椎为4～6 mL。若出现骨水泥渗漏现象即停止注入，插入针芯，待骨水泥凝固后拔出穿刺针，压迫切口止血，无菌包扎，根据患者穿刺部位疼痛情况使用非甾体抗炎药。
对照组：患者入院后在止痛镇静药辅助下，在损伤椎置下放置矫形复位枕垫，逐渐升高枕垫至患者所能耐受的最大高度。入院3 d后疼痛缓解者即可进行卧硬板床、腰背肌功能锻炼，采用五点支撑拱腰法[4]，患者将腰部拱上，保持姿势停留数秒，再缓慢放平，此为1次，每天进行50次以上，以不疲劳为度，不设上限，患者应根据自身情况多加锻炼。疼痛明显者给予静脉镇痛泵治疗，使受伤椎体尽快复位。
两组患者在治疗期间配合使用药物治疗，血塞通粉针剂200 mg加注射用生理盐水250 mL溶解后使用静脉滴注，1次/d，14 d为1疗程。痛舒胶囊（中药，每粒装0.3 g）饭后温开水送服，一次3粒，3次/d，3个月为1个疗程。
1.3疗效评价标准
采用视觉疼痛评分（VAS）[5]评价患者在治疗前、治疗后1周、1个月、3个月时的疼痛程度，VAS的标准分值为10分，数值大代表疼痛程度严重。两组患者在治疗前及治疗后1个月摄X片，测量其椎体高度及Cobb角，测量方法参考Phillips的方法[6]。测量夹角是从伤椎上1个椎体的上终板到伤椎下1个椎体的下终板，该夹角反映病变椎体高度恢复情况和后凸畸形的矫正程度。
1.4统计方法
计量数据均以均值±标准差标示，用spss进行统计学分析。两组数据之间的比较采用t检验，P<0.05 表示两组数据差异具有统计学意义。计数资料采用χ2检验，P<0.05 表示数据差异有统计学意义。
2结果
结果如表1、2和表3所示，观察组患者的手术前、治疗1周、治疗1个月和治疗3个月的VAS评分差异有统计学意义（P<0.05）， 对照组患者的手术前、治疗1周、治疗1个月和治疗3个月的VAS评分差异有统计学意义（P<0.05），两组患者比较，只有在治疗1周的VAS评分差异有统计学意义（P<0.05）；两组患者经治疗1个月后，Cobb角明显下降和椎体高度明显恢复，两组间差异有统计学意义（P<0.05）；随访1年内，两组患者均没出现压缩骨折椎体邻近椎体的骨折，观察组有2例患者出现骨水泥泄漏，对照组患者没出现并发症。
3讨论
PVP可缓解早期疼痛、明显缩短卧床时间，但可出现并发症情况，费用较高昂。PVP是脊柱外科近年来发展的一项新微创技术，是在经皮椎体成形术（PVP）的基础上的革新。该技术通过球囊膨胀使骨折椎体复位后注入骨水泥。它具有恢复椎体的高度和强度的优点，同时又减少了PVP的因骨水泥渗漏造成的并发症。从而增加压缩椎体的高度及强度，提高脊椎的稳定性，加固伤椎、避免椎体进一步塌陷，改善功能，缓解疼痛。具有创伤小、见效快等优点，但是常常出现填充材料的渗漏等并发症。此次研究中，观察组患者有例出现骨水泥泄漏，但没有伤及神经和脊髓，无需特殊处理。而当手术过程中一旦发生渗漏，手术将无法继续，严重者，需急诊开放手术减压。骨水泥注入量及椎体周壁有无破坏是影响PKP手术发生骨水泥渗漏的主要危险因素，手术技术的提高是预防并发症的关键因素[7]。
卧硬板床、腰背肌功能锻炼，五点支撑拱腰法等知识保守疗法的物理治疗，保守疗法还有西药疗法和中医疗法，保守疗法治疗骨质疏松性椎体骨折一般不单用一种疗法，往往联合应用。对于老年患者，保守疗法无需开刀，并发症少，费用低，可能更加适合，但是治疗周期长。因此，功能锻炼、加强护理、积极预防并发症等保守疗法，仍然是一种简便易行、经济可靠的治疗方法[8]。患者因根据自身需要，选择合适的治疗方法。该研究中，两组患者经过治疗后，VAS评分显著下降，从治疗前的7分下降至2分。经皮椎体成形术，保守治疗法医治老年骨质疏松性胸腰椎压缩骨折均有显著疗效。但明显较低，经PVP治疗，患者康复速度较快，仅需一周时间可使患者的VAS评分下降至3分。而保守治疗法保守治疗1周，VAS评分仅下降2分。另外，Cobb角和椎体高度丢失率方面，PVP的优势更加明显。
椎体成形术相对保守法治疗老年骨质疏松性胸腰椎压缩骨折可缓解早期疼痛、明显缩短卧床时间，但可出现并发症情况，费用较高昂。
参考文献
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[6]Phillips FM， Ho E， Campbell–Hupp M， et al. Early radiographic and clinical results of balloon kyphoplasty for the treatment of osteoportie vertebral compression fractures[J].Spine(Phila Pa 1976)，2003，28(19): 2260-2267.
老年人骨质疏松性椎体压缩性骨折（OVCF）的患者逐年增长，已经严重影响患者的生活质量和身体健康状况。本文选取2012年6月～2015年7月42例老年性骨质疏松性压缩性骨折患者，采用不同的治疗手段。
1 资料与方法
1.1一般资料 选取2012年6月～2015年7月42例老年性骨质疏松性压缩性骨折患者，所有患者临床症状为胸部及腰背部疼痛，检查后存在后凸畸形、骨折处棘旁压痛等症状。年龄60～81岁，平均年龄（69.18±7.81）岁；男性18例，女性24例；其中，单椎体骨折32例、双椎体骨折8例、三椎体骨折2例；伤椎为T9～L3，其中胸椎10个、腰椎32个，平均椎体丢失高度为53%。纳入标准：①年龄60岁以上，外力损伤，检查诊断为OVCF；②MRI检查显示为新鲜骨折或陈旧骨折没有愈合；③无神经功能损害；④患者签署知情同意书。所有患者随机平均分成两组，观察组和对照组，每组21例，观察组采用手法复位结合经皮椎体后突成形术，对照组仅采用经皮椎体后突成形术。两组患者一般资料无明显差异（P>0.05），具有可比性。
1.2方法
1.2.1手法复位 手术前对患者进行X线和MRI检查，了解患者伤椎关节突、椎弓根、椎体的受伤情况以及脊髓、硬脊膜的受压情况，采取手法复位时注意力度。给予患者40mg帕瑞昔布钠镇痛处理。患者取俯卧位于手术台，胸部和骨盆部垫枕，将腹部悬空，双手抓住床头。一位助手双手握紧双腋下，另一位助手握住患者双足踝关节，持续进行纵向牵引约3 min，主要目的是为了减轻相邻椎体之间的压力。医生双手掌叠压置于于伤椎棘突后方，垂直床面加压至棘突后凸畸形消失。医生对患者手法复位时力度要做到快、准、稳[1-2]。
1.2.2 PKP 患者采取俯卧于手术台上，消毒铺巾后准确找到进针点同时标记。局麻采用1%利多卡因10 ml，C臂X线机监视下，把带有针芯的穿刺针钻入。胸椎穿刺经肋横突间隙钻入，腰椎穿刺经椎弓根或后外侧途径钻入，适当增加外展角度。针尖在到达椎体的后壁并且正位于椎弓根影内侧，继续进针达到3～4 mm时，拔出穿刺针内芯，然后有序的置入导针、扩张套管以及工作套管，建立椎体通道，同时椎体通道扩大导入可扩张球囊。对可扩张球囊进行施压，椎体复位后取出可扩张球囊，注入聚甲基丙烯酸甲酯骨水泥，骨水泥即将要流出椎体范围或已流出锥体外，停止注射骨水泥，这个过程需把握好骨水泥的注射量[3]。通常腰椎注入骨水泥5 ml，胸椎注入骨水泥4 ml，当骨水泥呈拉丝状时注入，在骨水泥凝固前把工作套管旋转，将其分离，等到骨水泥干后拔出工作套管。局部压迫3 min，切口覆盖无菌敷料.术后注意观察患者生命体征，采用抗生素防止感染。
1.3判定标准 ①手术后3个月患者通过拍摄X线片或CT片了解椎体恢复高度、后凸Cobb角矫正情况；②采用疼痛视觉模拟（VAS）评分，记录患者术前、术后3 d、术后3个月的评分；③两组骨水泥平均注射量、泄漏情况。
1.4统计学分析 采用SPSS17.0统计学软件进行数据分析。计量数据以均数和标准差（x±s）表示，采用t检验，以P
2 结果
2.1两组患者椎体前缘高度、后凸Cobb角、VAS评分比较 两组患者治疗前与治疗后椎体前缘高度、后凸Cobb角、VAS评分有显著差异（P
2.2两组患者骨水泥平均注射量、泄漏情况 观察组与对照组的骨水泥平均注射量、泄漏情况差异明显（P
3 讨论
老年人骨质疏松性椎体压缩性骨折多发于胸腰椎体，其中楔形压缩骨折发病率较高，容易易造成患者脊柱后凸畸形，腰背部疼痛、驼背，严重的甚至会影响患者的呼吸功能[4]。
临床治疗老年人骨质疏松性椎体压缩性骨折的方法主要包括保守治疗，经皮椎体成形术（PVP）和PKP。保守治疗中的手法复位，可以纵向牵引缓解相邻椎体的压迫，背部下压使脊柱的生理弯曲有一定程度的缓解。但是这种方法对于复位后的位置不能长时间的维持，患者需要卧床休养，恢复时间长，疼痛缓解慢，容易反复。
PKP术是在PVP术的基础上进一步改进的一种治疗方法，在穿刺针末端导入可膨胀性扩骨球囊，充分扩张后注入骨水泥增加椎体强度，可以有效缓解老年人骨质疏松性椎体压缩性骨折患者的疼痛，并且伤椎的强度增加。此次研究发现，观察组的骨水泥平均注射量高为（5.21±0.95）ml，骨水泥泄漏1例；对照组的骨水泥平均注射量高为（4.34±1.27）ml，骨水泥泄漏4例；观察组效果明显好于对照组，这主要是手法复位使被压缩椎体得到一定程度恢复，利于减小骨水泥推注，降低骨水泥的泄漏几率。所以手法复位结合经皮椎体后突成形术治疗老年性骨质疏松性压缩性骨折效果突出，值得临床推广。
参考文献：
[1]黄昊，何仕诚，方文，等.经皮椎体成形术治疗骨质疏松疼痛性椎体压缩骨折的临床疗效分析[J].中华医学杂志，2014，94（27）：2119-2122.