发布时间:2023-09-28 10:30:43
导语:想要提升您的写作水平,创作出令人难忘的文章?我们精心为您整理的13篇春节的历史意义范例,将为您的写作提供有力的支持和灵感!
春节是新年里最重要的一天,也是我最开心的时候。
我在水上乐城的喷泉旁边遇到了一个女孩,她和我一样的喜欢音乐喷泉,虽然说她比我大可是我们互相以姐妹称呼,因为兴趣爱好就是女孩子沟通的条件之一。对于女生来说,我们更在乎的是相同的喜好方便了解对方和加深友谊。所以只要同样爱好一样东西就可以轻松的成为朋友了。当我们一起坐在喷泉池边唱歌时,注定了春节快乐的礼物是多一个好朋友。
有趣的是我们在一起唱歌时的默契简直就是心有灵犀,不但可以很快接上调子还能想到一样的歌曲。当所有的一切在我们的心里面被发现以后,我们都更喜欢这个人了,想要做好闺蜜的想法也更深了。最后,我和月月约好了一起去考嘉丽音乐学院,因为那是我们共同的梦想。这是我在这个春节里最高兴的事情,多了闺蜜和朋友。
春节里最开心的一件事
假期里我最开心的事,就是和爸爸妈妈一起去省科技馆玩。一进院子大门,就看见一个大大的红色支架,爸爸说那是太阳钟。在一楼有对话机器人和玩剪刀石头布的游戏机器,我和那个机器玩了一把,我赢了2次(呵呵,又输了3次)。到了二楼,我们走进一个房间,那里像时空隧道一样,还有亮晶晶的星星。走过去,又看到一个“倾斜小屋”,我走进去感觉很像地震似的。
我最喜欢的是那个磁悬浮列车,可惜今天没有开。记得二年前我第一次和妈妈一起来这里玩,看到那儿有很多人围着,我挤进去一看,原是一位讲解员阿姨在给大家讲解磁悬浮列车,正准备找一个小朋友乘坐演示。讲解员阿姨一看到我,就把我拉上去,我被固定好刚坐稳,一眨眼就到了另一边,妈妈还没来得及掏出相机,我又回来了。
哈哈,科技馆真好玩。
文 章来源
如果你问我春节里最快乐的一件事是什么,我会回答:那是大年三十晚上在姥姥家和姐姐、妹妹一起燃放烟花爆竹。
大年三十晚上,我和姐姐、妹妹一起在姥姥家楼下放鞭炮。由于五岁的妹妹不敢放鞭炮,所以她开始躲在姥姥家中窗户前观看我和姐姐放鞭炮。我们买了各种各样的烟花爆竹,有“三角塔”、“照明灯”、“钻石升天”…… 我和姐姐先燃放了“照明灯”,它是圆柱形的,点燃引线,冒出火花,有一个圆球从里面飞出来,随圆球爆炸产生小圆球,并发出劈里啪啦的声音,我们非常开心。之后我燃放了“钻石升天”,它是三角塔形状,外表蓝色。刚点燃引线,火苗就像一只小虫,飞快的向鞭炮跑去。鞭炮一点燃就开始旋转,并迅速地向天空飞去。它就像真正的钻石一样,我们非常惊奇,同时还拍手称赞。
此后我们还燃放了其它各式各样的鞭炮。我和姐姐、妹妹在这个特殊的夜晚开心自由地燃放各种烟花爆竹,我们非常快乐,也希望明年的春节还能开心地燃放让我着迷的烟花爆竹。
一马当先:原指作战时策马冲锋在前,形容领先、带头.也比喻工作走在群众前面,积极带头。
顾名思义:顾,看;义,意义。从名称想到所包含的意义,看到名称就联想到含义。
兴高采烈:原指志趣,后指兴致。形容兴致高,精神饱满。
如法炮制:本指按照一定的方法制作中药,现比喻照着现成的样子做。
(来源:文章屋网 )
春节是新年里最重要的一天,也是我最开心的时候。
我在水上乐城的喷泉旁边遇到了一个女孩,她和我一样的喜欢音乐喷泉,虽然说她比我大可是我们互相以姐妹称呼,因为兴趣爱好就是女孩子沟通的条件之一。对于女生来说,我们更在乎的是相同的喜好方便了解对方和加深友谊。所以只要同样爱好一样东西就可以轻松的成为朋友了。当我们一起坐在喷泉池边唱歌时,注定了春节快乐的礼物是多一个好朋友。
有趣的是我们在一起唱歌时的默契简直就是心有灵犀,不但可以很快接上调子还能想到一样的歌曲。当所有的一切在我们的心里面被发现以后,我们都更喜欢这个人了,想要做好闺蜜的想法也更深了。最后,我和月月约好了一起去考嘉丽音乐学院,因为那是我们共同的梦想。这是我在这个春节里最高兴的事情,多了闺蜜和朋友。
大年三十的早上,我起得比较晚,什么也没干,中午直接在外婆家吃午饭。下午回到家,奶奶和妈妈都在厨房里忙着为过春节准备丰盛的晚餐,爸爸在外面贴春联,而我则在一旁上网。
吃晚饭了,哇!好丰盛的菜啊!有鱼、有螃蟹、还有甲鱼,爸爸说,烧鱼是为了图个吉利,因为“年年有鱼(余)”,之后,我又看见鱼中还有一些白白的东西,问:“这是什么?”妈妈说:“这是年糕,年糕搭配鱼就是“年年有余””我们一家人坐在一起,边吃饭边聊天,还看看电视。
不一会儿,吃完了饭,我们就一起坐在沙发上,看春节联会晚会,晚会的节目有很多种类,有相声、小品、唱歌、舞蹈、魔术,最精彩的就是魔术了。
去年春晚,捧红了一位魔术大师:刘谦。今年春晚,刘谦又上台来为大家表演魔术了!这一次他表演3个魔术,他是先以一个将一杯果汁变没的魔术开头,之后他拿出了一副扑克,让主持人董卿洗过牌后在十秒中之内将扑克分成了十份,并且第一份有一张牌,第二份有两张牌,第三份有三张牌……第十份有十张牌!全场都沸腾了。不过最精彩的是最后一个魔术,刘谦先让旁边的一个人拿了几枚硬币,平举在一张有机玻璃桌下面,之后,刘谦说出了他的经典台词:“接下来,就是见证奇迹的时候。”然后他就在全中国人民的眼前,把手穿过了这张透明的有机玻璃,还把下面的硬币给拿了上来!
每当我看到人们过春节那喜洋洋的照片和节目时,我都会不由自主的想起今年初五的一件“傻事”。
初五也叫“破五”,是送年的意思,传统的送年也要吃饺子,而且饺子里还要包上钱、枣、糖,每样包上6个。意思是:如果吃到带钱的饺子,这一年就会发财,如果吃到带枣的饺子,这一年就会好运早来;如果吃到带糖的饺子,这一年就会过的“甜甜蜜蜜”一家人就会和和睦睦。6是吉祥的数字。虽然这只是人们对新年的期望,但我们家还是继承了这种传统。
初五晚上,我们吃饺子送年。爸爸在吃第一个饺子时,只听见“咯噔”一声,第一个钱被爸爸吃着了,他露出了得意地笑容。这时,妈妈也学着爸爸的样子说:“你猜这个饺子里有没有东西?”我想:妈妈一向爱开玩笑。自信地说:“没有!”结果第一块糖又被妈妈吃着了。现在就我还没有吃着东西呢!我非常着急。最后,我吃了20个饺子,只吃出了3块糖,妈妈吃了25个饺子,吃了4个钱,2块糖,爸爸吃了30个饺子,吃出了2个钱,1块糖和3个枣,现在只剩下了10个饺子,我不甘心落后想:这10个饺子里肯定有3个枣,虽然,我已经吃的很饱了,但还是抵不住枣饺子的诱惑。我揉了揉肚子,不由自主的又吃了两个饺子,可还是没有吃到枣饺子。我看了看一向争强好胜的爸爸和妈妈,他们悠闲的吃着别的菜,好像并不在乎我是否把剩下的3个枣吃出来。我不管那么多,又吃了5个饺子,还是没有吃到枣饺子。我开始怀疑他们是不是已经把剩下的3个枣吃出来了?我看了看他们的“战利品”没有多呀?就在这时他们不约而同的来夹这3个饺子,我看了他们的动作,想:这最后的3个枣,一定就在这三个饺子里!我连忙拿起筷子夹起这三个饺子就往嘴里送,一咬,怎么一个枣也没有。这时,爸爸笑着说:“厨房里还有一盘饺子没煮。”我跑到厨房一看,果然还有一盘饺子没煮呢,我后悔不已。恰好这3个枣就是不在这10个饺子里。
每当我想起这件事,我就会时刻提醒自己,无论干什么事都要考虑周到,不要盲目行事。
六年级:古代1
老师说,
要自己去寻找。
我问桃花,
桃花们笑了,
你看看我,
我看看你,
说:“礼仪是粉红色的。”
我问小草,
小草笑了,
你挠挠我,
我挠挠你,
说:“礼仪是嫩绿的。”
我问白云,
白云笑了,
你笑笑我,
我笑笑你,
说:“礼仪是白色的。”
我问空气,
空气说是透明的;
我问天空,
天空说是蓝色的;
我问太阳,
太阳说是红色的;
我问稻谷,
稻谷说是黄色的;
我问燕子,
燕子说是黑色的……
奇怪,
他们怎么都说自己呢?
我想,
春节里最开心的一件事
假期里我最开心的事,就是和爸爸妈妈一起去省科技馆玩。一进院子大门,就看见一个大大的红色支架,爸爸说那是太阳钟。在一楼有对话机器人和玩剪刀石头布的游戏机器,我和那个机器玩了一把,我赢了2次(呵呵,又输了3次)。到了二楼,我们走进一个房间,那里像时空隧道一样,还有亮晶晶的星星。走过去,又看到一个“倾斜小屋”,我走进去感觉很像地震似的。
我最喜欢的是那个磁悬浮列车,可惜今天没有开。记得二年前我第一次和妈妈一起来这里玩,看到那儿有很多人围着,我挤进去一看,原是一位讲解员阿姨在给大家讲解磁悬浮列车,正准备找一个小朋友乘坐演示。讲解员阿姨一看到我,就把我拉上去,我被固定好刚坐稳,一眨眼就到了另一边,妈妈还没来得及掏出相机,我又回来了。
哈哈,科技馆真好玩。
文 章来源
春节是我国一个古老的节日,也是全年最重要的一个节日,可在当代大学生中反响并不怎么强烈,反而对“圣诞节”很感兴趣,学生过“圣诞节”已经成为一种时尚,但是对于春节已经没有感情,甚至已经完全麻木,没感觉。文化在国家与民族发展中占有举足轻重的位置,民族要生存,国家要发展,离不开民族文化、民族精神的建设与弘扬。因此,不论是从国家、民族的发展还是从大学生的教育而言,都不能不谈文化,而中国传统节日作为中华传统文化的重要组成部分和表现形态,保留了民族文化中最精致、最具代表性的东西,是民族生活和民族精神的典礼和仪式,是中华传统美德代代相传的重要载体,展示着中华民族的精神世界。所以,对传统节日的态度和认识问题,就集中反映了对传统文化认知的许多方面,也正因如此,研究大学生对传统节日的认识可以从另一方面对大学生进行思想教育。
一、传统节日在大学生中缺失的原因
1. 文化的发展多元化
1978年我国改革开放后,国与国之间的交流日益频繁,经济之间的交往也越来越密切,文化交融也是越来越复杂。在吸收外国的先进文化的同时,外国文化中的糟粕也趁机而入,并且在中国的文化领域扮演着一定得角色,中国的文化变得不那么单纯、那么单一,而是逐步向多元化发展,糅合了多元的文化。中国传统文化也在向现代文化转型,出现了“一边倒、一刀切”现象,“洋文化”以其新奇、多样的面孔正在占领着中国的文化市场,这种现象在大学生群体中表现的更为明显。年轻人追求“个性解放、标新立异、时代潮流”,“春节”在他们心中的地位已不那么重要,而“圣诞节”正在年轻人的心目中越来越重要。大学生对“春节”和“圣诞节”的节日内涵已经曲解,在节庆期间衣、食、住、行等生活观念、方式上的改变,直接反映了中国民众正经历一场世界观的巨大转变,这也是文化发展的多元化所致。
2. 场经济的发展和网络的普及
随着经济社会的发展,全球化进程的加快,国际交流日趋频繁,一些国外的生产方式和生活方式逐渐渗透到我国社会生活的各个领域,对人们的思想观念产生了强大冲击。外来节日如圣诞节等也随之进入我国现代都市生活,其新颖的物质形态,包括饮食、礼品、靓装等所形成的较传统节日更为特别的繁华世界,都刺激着人们的感官。特别是电脑的普及,网络已成为人们生活中不可或缺的一部分,作为新时代弄潮儿的大学生,可以足不出户了解国内外大事,但是不可避免的会受到网络上一些文化糟粕的影响。
3. 大学生自身的文化底蕴不够
当代大学生是高层次的知识分子,具有很高的理论水平和接受新事物的能力。大学阶段正处于思想转型期,是非分辨能力还不到位,以至于成为“洋文化”入侵的俘虏。“80后效应”再加上这个张扬的时代背景,他们选择圣诞节而不是春节就不难理解。从深层次来讲,还是由于当今大学生的文化底蕴不够。在当今文化的多元碰撞中和全球化得过程中,多种文化的出现使大学生无所取舍,陷入了选择的误区。
4. 学校教育的缺失
我国长期以来的应试教育教育,家长、学校、老师只关注学生的成绩,而不注重学生整体素质的提高。在学校的课程中很少有关于传统教育的,缺乏对中国的传统文化的培育。
二、挽救大学生中传统节日失落的对策
1.对传统节日进行正确的引导
(1) 引导对文化多元以及过节多元化的正确认识。前提是必须保证本民族的文化不能丧失。文化多元化是世界发展的必然趋势,传统节日是传统文化中的瑰宝,无论怎样多元化、无论怎样融合,中国的这些传统节日都必须保卫好,不能丢。在面对“洋节”问题上,应该是不提倡也不反对,发掘其优点,把其优点和我国的传统节日结合起来,使我国传统节日更具新颖性。同时要引导大学生真正理解传统节日的内涵、意义,并热爱我们的传统节日。
(2) 倡导文明健康的过节气氛和过节方式。中国的传统节日的缺失与现在的时代背景也有很大的关系,人们都在追求高科技、新事物,而对旧的东西没有多少留恋。大学生的思想代表着社会发展的主流思想,一切向前看,注重创新。目前中国的经济飞速发展,物质资料极大提高,生活节奏加快,生活压力增大,于是人们便把节日当作难得的休息时间,吃喝玩乐、外出旅游,抛弃了传统节日的原始意义,久而久之,过节的气氛也就淡化,过节的方式也有所改变。因此,在过节时应该营造良好的节日氛围,改变节日的表现方式,使之为广大人民所接受,能吸引广大人民,使之从中受益。
2. 加强传统文化和传统节日的教育
(1) 中国传统文化在大学生中之所以会缺失,很大一部分原因是教育太少。在大学生的课程体系中,把语文课、历史课和思想政治教育课作为公共必修课,对中国的传统文化和传统节日进行系统的讲解,使大学生从思想上真正了解中国传统文化以及传统节日的内涵和精华所在。并注重与现实实际紧密结合,增强课程的趣味性和实效性。
(2) 加强爱国主义教育。中国传统节日是中国文明的精华,珍爱我们的传统节日也是爱国主义的表现。大学生正处在世界观、价值观、人生观的转型期,在这一阶段加强他们的爱国主义教育显得格外重要。把传统文化作为载体,发掘其中的爱国主义因素,加强爱国主义教育任重道远。
1 引 言
纳米微粒四氧化三铁是一种磁性强、制备相对简单且生物相容性较好的磁性粒子,是生物医学领域常采用的磁性载体材料[1]。将有机高分子和这种磁性物质结合后会形成具有一定磁相应性及特殊结构的微球,其既可以通过共价键来结合酶[2,3]、细胞[4]等生物活性物质,或作为药物的载体[5]和固相吸附材料[6~8]等;又可对外加磁场表现出强烈的磁相应性。目前,用于磁性材料的有机高分子主要有壳聚糖[9]、血清白蛋白[10]等。而用非离子表面活性剂改性的磁性材料少有报道[11]。
失水山梨醇脂肪酸酯(Span80)和聚乙二醇(PEG400)复配形成的类脂囊泡可作为药物助剂,长期稳定存在[12]。本实验合成了Span80PEG400,将其成功地嫁接在磁性粒子上。将聚乙烯醇(Polyvinyl alcohol, PVA)羧基化(PVAc),然后将PVAc涂层在磁性粒子表面,制备出一种新型的靶向药物载体,并将此载体用于两性霉素的包封,效果良好。
2 实验部分
2.1 仪器与试剂
EQUINX55傅立叶变换红外光谱仪(德国Bruker公司);UitraShied 300M核磁共振谱仪(瑞士Bruker公司);XPERTPRO X射线衍射仪(荷兰飞利浦公司); TU1901双光束紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器公司);H800透射电子显微镜(日本Hitachi公司)。
聚氧乙烯(20)失水山梨醇单月桂酸酯(Tween 20)、Span80、PEG400、PVA和丁二酸酐为分析纯试剂;4二甲氨基吡啶(4DMAP, 99%),N,N′二环己基碳二亚胺(DCC, 99%)购于上海 Medpep公司;其它试剂均为分析纯,实验用水为去离子水。
2.2 磁性微球的制备
2.2.1 Span80PEG400的合成 取干燥圆底烧瓶,加入反应溶剂二氯甲烷(CH2Cl2) 200 mL,Span80 21.4 g (0.05 mol),丁二酸酐(Succinic anhydride)15 g(15 mol),及催化剂4DMAP 6.1 g (0.05 mol),于65 ℃水浴搅拌下反应12 h。冷却后抽滤除去未反应的丁二酸酐,旋转蒸发滤液除去CH2Cl2后得Span80的酯化产物。在200 mL CH2Cl2中,按照摩尔比1∶1∶1∶1分别加入PEG400、Span80的酯化物、DCC及催化剂4DMAP,室温下磁力搅拌24 h。反应结束后抽滤除去DCC,滤液旋转蒸发,然后加几滴四氢呋喃于冰箱中保存过夜。
2.2.2 Span80PEG400嫁接的PVA化磁性粒子制备 称取适量Span80PEG400倒入三口烧瓶中,加50 mL甲苯为脱水剂,搅拌溶解后,加入适量Fe3O4PVAc,再加入少量H2SO4作催化剂,加热回流反应3 h后停止。弃去甲苯液,用无水乙醇洗脱粘附在烧瓶壁上的黑色产物,用乙醇冲洗多次后蒸去乙醇,产物置于50 ℃真空干燥后备用。
2.3 新型靶向制剂作为两性霉素的载体
将Fe3O4PVAcSpan80PEG400和水或者一定浓度的两性霉素(AmB)的药物溶液按照质量比1∶99配制,超声15 min后[12],各取1.00 mL装于透析袋中,在25 mL水中透析24 h,测定AmB在407.0 nm处的吸光度,扣除空白的吸收,由工作曲线确定游离药物的浓度,根据EE(%)=(c总-c游离)/c总×100计算包封率[10]。
3 结果与讨论
3.1 磁性靶向载体的合成及表征
3.1.1 Fe3O4PVAc微球的合成及表征 参照文献[13] 合成了Fe3O4PVAc磁性微球。对比红外差谱可知,Fe3O4PVAc即具有FeO在570 cm-1左右的特征吸收峰,又含有1617 cm-1的羰基吸收峰和1049 cm-1处的醚键的吸收峰, 其结果与文献[13]相符。此外,在13CNMR中,δ 163.23×10-6的峰确定为PVAc的羰基所致。由此可知,PVAc已成功嫁接在Fe3O4粒子表面。
采用透射电子显微镜(TEM)观察Fe3O4纳米粒子及Fe3O4PVAc的微观形态。由图1A可见,共沉淀法制备得到的Fe3O4纳米粒子主要为球形结构,粒子大小均匀。粒子的直径约20 nm。其表面包覆后形成的Fe3O4PVAc的形貌见图1B。包覆后的团聚现象减弱,有部分分散的趋势。
Fe3O4在XRD图谱中有6个特征衍射峰(220, 311, 400, 422, 511和440),这些指标参数在图2中的两个谱线里都能观察到,说明合成的Fe3O4纳米微粒具有尖晶石结构,且在表面包覆时无相变现象。
3.1.2 Span80PEG400嫁接的磁性微球的制备及表征 Span80PEG400的合成分为两步,均为酯化反应,其反应原理如下:
由A和B的分子结构可知,B结构式上多了一个双羰基(丁二酸酐打开所致)。而反映在FTIR光谱上(未列出),就是在1740和1850 cm-1之间有双峰(OCOCH2CH2COOH)。此外,采用1H NMR(CDCl3)对所得产物B的化学结构进行表征,其中,与羰基相连的两个亚甲基(OCOCH2CH2COOH)的化学位移出现在δ 2.61处,与文献[13]报道的结果一致,证实了B的存在。产物C的红外谱图与B相比,多了1109 cm-1处的νas(COC)和952 cm-1处的νs(COC)。此外,在Span80PEG400的1HNMR(CDCl3)谱图上(未列出), δ 4.21处出现的亚甲基源于PEG400,且与琥珀酰基(Succinyl group)相连,而δ 3.56处的峰则为PEG400分子结构中的重复单元。证实了通过丁二酸酐Span80已成功连接上PEG400。在靶向制剂Fe3O4PVAcSpan80PEG400的红外图谱中, FeO键(570 cm-1),羰基(1680 cm-1),特别是醚键的(1100~1200 cm-1)峰明显增强,由此可知已成功制备了改性的磁性微球。
3.2 新型靶向制剂包封两性霉素及结果分析
两性霉素是治疗深部真菌感染的首选药物之一,但该药物具有严重毒性,使临床应用受到很大限制。由此,对这类药物的包封和控制释放是提高疗效、降低毒副作用最有效的方法。按照2.3节所述方法,用Fe3O4PVAcSpan80PEG400作为两性霉素药物的载体进行实验,为了解其包封效果,需建立在此体系下两性霉素药物的检测方法。由于是磁性载体,在磁场作用下,很容易实现载体与未包封药物的分离和测定。
3.2.1 脂质体的吸收光谱和标准曲线 以无水乙醇为溶剂配制较低浓度的两性霉素溶液,以无水乙醇为参比,紫外可见分光光度计在300~700 nm内扫描,在407 nm处出现最大吸收。而空白脂质体和包封药物的脂质体的紫外吸收光谱表明,在407 nm处测定时,空白脂质体几乎无吸收,故不影响药物的测定(见图3)。 图3 脂质体和空白脂质体的紫外吸收光谱图
配制浓度分别为0.5, 1.0, 2.0, 3.0和4.0 mg/L的两性霉素标准溶液,在407 nm处测定吸光度。以浓度为横坐标,吸光度为纵坐标进行线性回归得标准曲线。测定两性霉素的线性回归方程为:A=-0.3818+0.08866c(r=0.99883, n=5)。
3.2.2 两性霉素的包封及误差分析 当Fe3O4PVAcSpan80PEG400和0.25 g/L两性霉素(AmB)的药物溶液按照不同质量体积比配制时,包封率见表1。随着质量体积比的增加, 包封率也在逐渐增大;但质量体积比达到一定值后再增大,包封率变化不大,最大包封率为96.6%,高于Span80和PEG400制备的囊泡[12]的包封率95.2%。但由于其具有磁铁靶向性,结果令人满意。需要说明的是,由于这种新型磁性粒子具有两性分子的特点,可用于磁性囊泡等的自组装[15]和作为分离富集的载体等,相关的工作有待于进一步的研究。 表1 在不同质量体积比条件下AmB药物在Fe3O4PVAcSpan80PEG400中的包封率
参考文献
1 GAO HuiLing (高会玲), LI JianPing(李建平). Chinese J.Anal. Chem.(分析化学), 2008, 36(12): 1614~1618
2 Hu F L, Deng C H, Zhang X M. J. Chromatogr. B, 2008, 871(1), 67~71
3 YUAN YongHai (袁永海), LI JianPing (李建平). Chinese J.Anal. Chem.(分析化学), 2007, 35(7): 1078~1082
4 Chu L Y, Li Y, Zhu J H, Wang H D, Liang Y J. Journal of Controlled Release, 2004, 97(1): 43~53
5 Qi D, Deng C, Zhang X. J. Chromatogr. A, 2009, 1216(29): 5533~5539
6 Qi D, Mao Y, Liu J, Deng C, Zhang X. J. Chromatogr. A, 2009. 1217(16): 2606~2617
7 WU ShaoXiong(吴少雄), XING Zhi(邢 志), CHEN HongBing(陈红兵), WANG Juan(王 娟), FENG Lu(冯 璐). Chinese J. Anal. Chem.(分析化学), 2009, 37(5): 711~714
8 Yao G P, Qi D W, Deng C H, Zhang X M. J. Chromatogr. A, 2008, 1215(12): 82~91
9 Li G Y, Jiang Y R, Huang K L, Ding P, Chen J. Journal of Alloys and Compounds, 2008, 466(12): 451~456
10 Zhang C F, Cao J Q, Yin D Z, Wang Y X, Feng Y L, Tan J J. Applied Radiation and Isotopes, 2004, 61(12): 1255~1259
11 Manuel A, Rodrigo F P, Ricardo I, Santamaria J. Nanotoday, 2007, 2(3): 22~32
12 Hua W, Liu T Q. Physicochem. Eng. Aspects, 2007, 302(13): 377~382
对于家庭比较贫困的老人:且老人具有自主支配钱物的能力,而捐助方也没有各种宣传等需要,则尽量把爱心款作为礼金发给老人,无需从款项里抽一部分买礼品。礼品占地方,配发又吃力费时间,且我们送的物品老人不一定能用得上,那就纯属浪费了,还不如直接给老人钱,让老人自己安排,用在自己所需的地方,那样真正的财尽其用。
蛤蚧是壁虎科动物Gekko gecko的干燥体。全年均可捕捉,除其内脏拭净,用竹片撑开使全体扁平顺直,低温干燥。主产于广西、云南、贵州等地,味咸性平,归肺、肾经,具有补肺益肾、纳气定喘、助阳益精功效,用于虚喘气促、劳嗽咳血、阳痿遗精。肝脏分泌的胰岛素样生长因子(IGF1)能刺激颗粒细胞DNA的合成,促进卵泡发育,并能有效抑制体外预排卵卵泡颗粒细胞凋亡的发生。颗粒细胞分泌的抑制素(inhibin)的含量在衰老的卵巢中明显减少。因此,抑制素被公认为是衡量卵巢贮备能力、卵巢衰老的理想指标[1]。本课题从影响卵巢功能的局部调节因素着手,通过研究大鼠不同年龄阶段卵巢细胞生长因子IGF1、抑制素(inhibin)含量的变化,探讨卵巢衰老及蛤蚧抗卵巢衰老作用的机制,从而寻求延缓和治疗卵巢衰老的新方法、新途径。
1 材料和方法
1.1 材料
Wistar大鼠(由重庆医科大学动物中心提供);兔抗鼠IGF1多抗购于武汉博士德公司,鼠抗人inhibinа、兔抗鼠NCadherin多抗、FITC羊抗兔IgG、TRITC羊抗鼠IgG等均购于北京中山生物技术公司。激光共聚焦显微镜由重庆医科大学基础医学研究所提供(Leica sp2,德国)。
1.2 蛤蚧乙醇提取液的制备
将干品蛤蚧体60 ℃烘干后打成粉末,60%乙醇浸泡7 d后过滤去残渣,滤液用旋转蒸馏器蒸馏去除乙醇达饱和后置于4 ℃冰箱备用,每毫升蛤蚧乙醇提取液含蛤蚧原药0.25 g。
1.3 动物分组
取Wister大鼠3月龄[平均体重(180±11)g]和6月龄[平均体重(230±13)g]各20只,随机分为实验组和对照组,每组各10只。实验组按原生药2 g/(kg·d)剂量灌胃,共15 d,对照组相同体积生理盐水灌胃,共15 d。
1.4 标本制备
于末次灌胃后24 h处死大鼠,采集卵巢标本;按常规制备大鼠卵巢的石蜡标本并切片备用。
1.5 免疫荧光标本的制备
取各组的大鼠卵巢石蜡切片常规脱腊至水。冷PBS漂洗2 min × 3 次,加封闭羊血清20 μL,10 min后倾去羊血清不洗。各组分别滴加一抗:兔多抗IGF1(1∶50),鼠抗人inhibin_а,荧光空白对照组用PBS代替,4℃湿盒内孵育过夜。冷PBS漂洗2 min × 3 次,兔多抗IGF1(1∶50)组滴加二抗:FITC羊抗兔F(ab)(1∶50);鼠抗人inhibin_а组滴加TRITC羊抗鼠IgG;37 ℃湿盒内孵育45 min。冷PBS漂洗2 min × 3 次,50%缓冲甘油封固,在激光共聚焦显微镜下观察。FITC标记的IGF1显现黄绿色荧光。TRITC标记的inhibin_а显现红色荧光。
1.6 观察和测定方法
激光共聚焦显微镜观察标本并摄像存储,用激光共聚焦显微镜自身的图像分析系统测量并分析各组的平均荧光强度值。因FITC羊抗兔F(ab)经抗原抗体识别反应特异地结合于IGF1,因此荧光强度值能准确地表示IGF1的相对数量。同样TRITC的荧光强度值则能准确地表示Inh A的相对数量。所有数据均为定量数据,结果采用t检验分析。
2 结果
2.1 大鼠卵巢IGF1和Inh A平均荧光强度值
经激光共聚焦显微镜观察并测量荧光强度值,然后计算各组平均荧光强度值。具体数值见表1。从表1的结果可以看出,蛤蚧醇提液能显著提高IGF1在不同月龄(3月龄和6月龄)Wistar大鼠卵巢中的表达(P<0.01),同时能显著提高Inh A在不同月龄(3月龄和6月龄)Wistar大鼠卵巢中的表达(P<0.01),提示蛤蚧能改善大鼠卵巢的功能,促进优势卵泡和黄体的发育。从表1还可得知,对照组中6月龄组IGF1和Inh A均显著高于3月龄组(P<0.05和P<0.01)。表1 大鼠卵巢IGF1和Inh A平均荧光强度值检测结果(略)
2.2 大鼠卵巢IGF1和Inh A表达的荧光图
从图1中可以看出,实验组3月龄大鼠卵巢颗粒细胞IGF1的表达较对照组显著增加,平均荧光强度值相比差异有统计学意义,见表1。在图2中,6月龄大鼠卵巢颗粒细胞IGF1的表达,实验组较对照组显著增加。其平均荧光强度值分别为 85.52±9.54和57.87±6.48,差异有统计学意义。图3显示,实验组3月龄大鼠卵巢颗粒细胞Inh A的表达较对照组显著增加;具体数据见表1。在图4中,6月龄大鼠卵巢颗粒细胞Inh A的表达,实验组较对照组显著增加。其平均荧光强度值分别为94.98±7.65和 67.19±6.25,差异有统计学意义。
3 讨论
研究表明,蛤蚧醇提物可使幼年雌小鼠子宫和卵巢增重,阴道开放时间提前,使去势雄性大鼠精囊和前列腺增重,且尾全蛤蚧组更明显[2],蛤蚧尾的性激素样作用较蛤蚧体强,可能与蛤蚧尾锌含量较高有关。蛤蚧醇提物能缩短雄性果蝇潜伏期,延长时间,并能显著降低鼠血液中卵泡刺激素(FSH)浓度而显著提高血中雌二醇(E2)的浓度[3]。蛤蚧能明显改善鼠下丘脑垂体性腺轴功能,蛤蚧醇提物对雌性大鼠附性器官(子宫及阴道)主要为直接作用,但其完整作用须经卵巢、垂体及下丘脑[4]。
IGF1是肝脏合成的由70个氨基酸组成的多肽,其主要作用是通过与IGF1受体(IGF1R)结合,介导对生长激素(GH)的促进作用。IGF1能促进生长中的卵泡和黄体产生血管内皮细胞生长因子(VEGF)[5],而VEGF介导的血管发生对优势卵泡的选择和发育致关重要,如果阻断VEGF的活性,则该卵泡周期将被终止,重新开始新的卵泡募集阶段[6]。研究表明,卵巢的颗粒细胞存在IGF1R,在优势卵泡的颗粒细胞中更为丰富[7],IGF1与受体结合后,能增强卵泡对FSH的反应性[8],促进卵泡的发育。体外实验还证实IGF1对鼠卵巢的颗粒细胞凋亡有抑制作用[9]。从表1的结果可以看出,蛤蚧醇提液能显著提高IGF1在不同月龄(3月龄和6月龄)Wistar大鼠卵巢中的表达(P
抑制素是由卵巢颗粒细胞分泌的分子量为31~32 KDa的异二聚体糖蛋白激素,由α亚基及两种β亚基(βA和βB)之一通过二硫键连接而成,即Inh A(αβA)和Inh B(αβB),其主要生理作用是反馈性抑制垂体FSH的分泌。卵巢颗粒细胞分泌的抑制素的含量在衰老的卵巢中明显减少,因此抑制素(特别是Inh B)被公认为是衡量卵巢贮备能力、卵巢衰老的理想指标[1]。Inh B主要由中小窦状卵泡的颗粒细胞产生,可反应卵巢的储备能力,其分泌受FSH的调控。而Inh A主要由优势卵泡和黄体的颗粒细胞产生,可反映卵巢的功能,黄体生成激素(LH)对Inh A的分泌有促进作用[10]。卵泡膜细胞体外培养研究证实,Inh A通过增强LH与IGF1诱导的雄烯二酮(E2的底物)的产生,从而对E2的合成起旁分泌作用。从表1的研究结果可知,蛤蚧醇提液灌畏大鼠能显著提高Inh A在不同月龄(3月龄和6月龄)Wistar大鼠卵巢中的表达(P
从表1还可得知,对照组中6月龄组IGF1和Inh A均显著高于3月龄组(P
【参考文献】
[1]Danforth DR, Arbogast LK, Mroueh J, et at. Dimeric inhibin: a direct marker of ovarian aging [J]. Fertility and Sterility, 1998, 70(1): 119123.
[2]胡绍兰, 袁喜保. 尾全蛤蚧与无尾蛤蚧体活性比较[J]. 北京中医, 1996, 5: 3738.
[3]王荣琪, 沈稚芳, 薛长江, 等. 蛤蚧对大鼠性器官重量及生殖激素水平影响的初步观察[J]. 重庆医科大学学报, 1993, 18(1): 1921.
[4]罗谋伦, 赵 一, 林启云. 蛤蚧雌激素样的作用部位实验研究[J]. 中成药, 1993, 15(5): 2930.
[5]MartinezChequer JC, Stouffer RL, Hazzard TM, et al. Insulinlike growth factors1 and 2, but not hypoxia, synergize with gonadotropin hormone to promote vascular endothelial growth factorA secretion by monkey ranulose cells from preovulatory follicles [J]. Biology of Reproduction, 2003, 68(4): 11121118.
[6]Fraser HM, Wilson H, Rudge JS, et al. Single injections of vascular endothelial growth factor trap block ovulation in the macaque and produce a prolonged, doserelated suppression of ovarian function [J]. Journal of Clinical Endocrinology & Metabolism, 2005, 90(2): 11141122.
[7]ElRoeiy A, Chen X, Roberts VJ, et al. Expression of insulinlike growth factorI (IGFI) and IGFII and the IGFI, IGFII, and insulin receptor genes and localization of the gene products in the human ovary[J]. Clin Endocrinol Metab, 1993,77: 14111418.